2. Бактериологические методы

Бактериологические методы дают возможность подучить чистую культуру возбудителя болезни, что необходимо для комплексного исследования культурных, морфологических, биохимических, антигенных и других свойств возбудителя. В практике чаще приходится иметь дело с биологическим материалом, содержащим смесь микроорганизмов. Выделение возбудителя в чистом виде является основой бактериологического исследования. Нужно помнить, что способ забора биологического материала для исследования очень сильно влияет на эффективность конечного результата.

Обязательные правила при заборе биологического материала для бактериологического исследования:

1. Материал нужно забирать до начала этиотропной терапии.

2. Строго соблюдать стерильность при заборе.

3. Категорически запрещается обрабатывать посуду дезинфицирующими растворами, посуду стерилизуют сухим паром или ополаскивают кипятком,

4.Достижение минимального промежутка времени между забором материала и посевом на питательные среды, при невозможности посева в первые 3 часа используют консервирующие смеси (водно-глицериновая 7:3, Кери-Блера и др.). При отсутствии консервантов, материал хранят в холодильнике или на льду.

Бактериологическому исследованию подвергают все биологические материалы.

Исследуемые материалы высевают на питательные среды, используя специальную методику посева, получают отдельные колонии, которые далее пересевают в пробирки с косым агаром. Для культивирования микроорганизмов используются различные питательные среды: простые (мясо-пептоный бульон, агар) и сложные (сывороточная среда).

Для выделения и накопления микроорганизмов применяют консервирующие среды (глицериновая смесь), среды обогащения (щелочная пептонная вода) и элективные (избирательные) среды (желчный бульон). В ряде случаев питательные среды применяют для определения микроорганизмов (среды Эндо, Левина, Плоскарева – для диагностики кишечных бактерий).

Характер роста микроорганизмов (культурные свойства) является одним из критериев для распознавания микроорганизмов. Значение имеют величина, форма, консистенция, плотность, цвет, поверхность колоний на плотных питательных средах, а в бульоне - наличие мути, осадка, плёнки.

Одним из основных диагностических методов при распознавании микроорганизмов является изучение их биохимических свойств. Особое значение это имеет при диагностике кишечных инфекций. Изучается способность микроорганизмов сбраживать углеводы с образованием кислоты или кислоты с газом, разлагать белковые продукты, способность образовывать католазу и др.

Для обнаружения всех свойств материал помещают на дифференциально-диагностические среды, содержащие вещества, в отношении которых микроорганизмы проявляют свою ферментативную активность. Добавление в среду индикаторов меняющих цвет среды и дает возможность легко узнавать результаты. Этот метод бактериологической диагностики называется - ''посев на пестрый ряд».

3. Биологические методы.

Биологическими методами называют методы заражения лабораторных животных. Воспроизведение заболевания у животных является абсолютным показателем патогенности микроорганизмов. Для исследования биологических свойств паразитов используются только наиболее чувствительные к ним животные (при туберкулёзе - морские свинки, при пневмококковой инфекции и сибирской язве - белые мыши, при стрептококковой инфекции - кролики и т.д.).

Метод заражения лабораторных животных чаще применяется при вирусных инфекциях, и выбирают с учётом тропизма (сродства) исследуемого вируса к определённым тканям животного и человека. Нейротропные - вводят в мозг, пневмотропные - в трахею и т.д.

После заражения животных размножение паразитов в них устанавливают по:

А) клинической картине;

Б) патофизиологическому изменению в организме животного;

В) нахождению микроорганизмов организме животного;.

Г) нахождению антител в сыворотки крови животного:

В некоторых случаях лабораторных животных используют для выделения чистой культуры, при введении сильно загрязненного материала, различными патогенными микроорганизмами. После смерти животного из его организма выделяют чистую культуру. С помощью лабораторных животных можно такжен определить вирулентность выделенного патогенного штамма микроорганизмов.

II

Выделяют два косвенных метода лабораторной диагностики инфекции, с помощью которых по косвенным признакам находят возбудителей инфекционных болезней:

I) Серологические (сывороточные) методы

2) Аллегические методы