Контрольные вопросы:

Что такое белок? Как связаны между собой аминокислоты в молекуле белка?

Назовите функции аминокислот. Охарактеризуйте структуру и общие свойства функциональных групп аминокислот.

Кислотно-основные свойства аминокислот. Какие химические реакции характерны для аминокислот?

Классификация аминокислот по свойствам радикалов.

Особенности оптической изомерии аминокислот. Сколько стереоизомеров имеют аминокислоты?

Что открывает нингидриновая реакция? Напишите уравнение реакции.

Что открывает биуретовая реакция? Напишите уравнение реакции.

Что открывает ксантопротеиновая реакция? Напишите уравнение реакции.

Напишите аминокислоты, содержащие серу. С помощью какой реакции можно их открыть?

С помощью какой реакции можно обнаружить аминокислоту гистидин в белке?

Покажите образование пептидной связи на примере любого трипептида. Охарактеризуйте особенности и свойства пептидной связи.

Тема 2 физико-химические свойства белков. Методы осаждения белков. Высаливание и денатурация

Белки образуют коллоидные растворы (размеры частиц - 0,1-0,001 мкм), для которых важны следующие характеристики: низкое осмотическое давление, высокая вязкость, низкая способность к диффузии.

Коллоидные свойства белков характеризуют способность белков образовывать устойчивые коллоидные растворы. Коллоидный раствор (раствор ВМС) - размеры частиц дисперсной среды и дисперсной фазы различаются в десятки и сотни раз. Коллоидный раствор состоит из жидкой фазы (золь) и студенистой (гель).

Растворы белков способны к осаждению (коагуляции).

Различают 2 вида реакции осаждения:

1) обратимое осаждение. Белковая молекула в растворе удерживается двумя факторами: зарядом и гидратной оболочкой. При высаливании нарушается гидратная, или водная оболочка, белка. Суммарный заряд белковой молекулы, его структура и свойства при этом не изменяются. Обратимое осаждение вызывается действием нейтральных солей аммония, щелочных и щелочноземельных металлов (высаливание), спирта, ацетона, эфира и некоторых других органических растворителей. Осажденные таким образом белки могут быть вновь растворены, например, если соли удалить методом диализа.

2) необратимое осаждение – денатурация. При этом нарушается гидратная оболочка белковой молекулы и изменяется ее суммарный заряд. Для большинства белков изоэлектрическая точка соответствует слабокислой среде (рН около 5,0). Снятие заряда осуществляется путем подведения рН к изоэлектрической точке. Удаление гидратной оболочки производится водоотнимающими средствами (органические растворители, соли щелочноземельных металлов в высокой концентрации), изменением температуры и др.

Лабораторная работа №2 диализ растворов белков

ПРИНЦИП РАБОТЫ:

С помощью диализа очищают высокомолекулярные растворы белковых веществ от примеси низкомолекулярных соединений (солей, сахаров и др.).

РЕАКТИВЫ и ОБОРУДОВАНИЕ:

1) раствор яичного белка с хлористым натрием; 2) AgNO₃, 0,5 % (в склянке из темного стекла); 3) HNO₃, 10 %; 4) NaOH, 10 %; 5) CuSO₄, 1 %; 6) кусочки целлофана размером 12,5х12,5 см; 7) дистиллированная вода; 8) стакан, стеклянные палочки.

ХОД РАБОТЫ:

В мешочек из целлофана наливают до половины раствор яичного белка (с хлористым натрием). Мешочек подвешивают на стеклянной палочке и погружают в стакан с дистиллированной водой. Диализ проводят при комнатной температуре. Через 40-60 минут из стакана берут в две пробирки по 2 мл воды. В одной пробирке проводят реакцию на ионы хлора, для чего воду подкисляют несколькими каплями 10 % раствора азотной кислоты и добавляют 2-3 капли раствора азотнокислого серебра, выпадает осадок хлористого серебра. С пробой во второй пробирке производят биуретовую реакцию. Если диализ проводится правильно, биуретовая реакция будет отрицательной.

РЕЗУЛЬТАТЫ и ВЫВОД: