- •Кожина Ольга Владимировна
- •Раздел 1. Белки
- •Тема 1 аминокислотный состав белка. Классификация и свойства аминокислот. Качественные реакции на белки и аминокислоты
- •Лабораторная работа №1 цветные реакции на белки и аминокислоты
- •1.4 Реакция на серусодержащие аминокислоты (реакция Фоля).
- •Контрольные вопросы:
- •Тема 2 физико-химические свойства белков. Методы осаждения белков. Высаливание и денатурация
- •Лабораторная работа №2 диализ растворов белков
- •Лабораторная работа №3 осаждение белков высаливанием
- •Лабораторная работа №4 осаждение белков при кипячении
- •Лабораторная работа №5 осаждение белков солями тяжелых металлов
- •Лабораторная работа №6 осаждение белков концентрированными минеральными кислотами
- •Лабораторная работа №7 осаждение белков органическими веществами
- •Контрольные вопросы:
- •Тема 3 количественное определение белка. Оценка на основании фотометрии продуктов цветной реакции. Построение калибровочных графиков
- •Лабораторная работа №8 количественное определение белка
- •Контрольные вопросы:
- •Тема 4 гидролиз белка. Характеристика пептидной связи
- •Лабораторная работа №9 кислотный гидролиз простого белка
- •Лабораторная работа №10 формоловое титрование (по Серенсену)
- •Контрольные вопросы:
- •Тема 5 хроматографическое разделение аминокислот
- •Лабораторная работа №11 хроматографическое разделение аминокислот на бумаге
- •Контрольные вопросы:
- •Раздел 2. Ферменты
- •Тема 6 ферменты как биологические катализаторы. Свойства ферментов
- •Лабораторная работа №12 специфичность действия ферментов
- •Лабораторная работа №13 термолабильность ферментов
- •Лабораторная работа №14 влияние реакции среды на действие ферментов слюны
- •Определение оптимума рН действия амилазы слюны
- •Лабораторная работа №15 влияние активаторов и ингибиторов на действие ферментов
- •Контрольные вопросы:
- •Тема 7 действие ферментов отдельных классов
- •Лабораторная работа №16 определение активности пепсина
- •Лабораторная работа №17 действие пепсина на белок фибрин
- •Лабораторная работа №18 обнаружение каталазы в крови
- •Лабораторная работа №19 действие липазы на жиры
- •Лабораторная работа №20 действие пероксидазы крови
- •Контрольные вопросы:
- •Тема 8 витамины, как структурные компоненты ферментов
- •Лабораторная работа №21 качественные реакции на жирорастворимые витамины
- •Лабораторная работа №22 качественные реакции на витамины группы в
- •Лабораторная работа №23 качественные реакции на витамин с
- •Лабораторная работа №24 количественное определение витамина с
- •Контрольные вопросы:
- •Раздел 3. Нуклеиновые кислоты и их обмен
- •Тема 9 структура и функции нуклеиновых кислот. Нуклеопротеиды
- •Лабораторная работа №25 выделение дезоксирибонуклеопротеидов (днп) из тканей
- •1. Экстракция и выделение днп из тканей.
- •Лабораторная работа №26 гидролиз нуклеопротеидов
- •2. Качественные реакции на составные части нуклеопротеидов.
- •Контрольные вопросы:
- •Раздел 4. Углеводы и их обмен
- •Тема 10 углеводы. Восстанавливающая способность углеводов
- •Лабораторная работа №27 качественное определение глюкозы
- •Лабораторная работа №28 качественное определение фруктозы
- •Лабораторная работа №29 обнаружение восстанавливающей способности углеводов
- •Контрольные вопросы:
- •Лабораторная работа №31 обнаружение молочной кислоты в мышечной ткани
- •Лабораторная работа №32 количественное определение пировиноградной кислоты
- •Контрольные вопросы:
- •Раздел 5. Липиды и их обмен
- •Тема 12 структура и функции липидов
- •Лабораторная работа № 33 качественное определение липидов сыворотки крови
- •Лабораторная работа №34 сравнение ненасыщенности жиров
- •Лабораторная работа №35 обнаружение стеролов
- •Лабораторная работа №36 качественные реакции на холестерин
- •1. Реакция Либермана-Бурхарда.
- •2. Реакция Сальковского.
- •Контрольные вопросы:
- •Лабораторная работа №38 качественные реакции на желчные кислоты
- •Контрольные вопросы:
- •Раздел 6. Гормоны
- •Тема 14 регуляция обмена веществ. Гормоны
- •Лабораторная работа №39 качественные реакции на инсулин
- •Лабораторная работа №39 качественное определение адреналина
- •Контрольные вопросы:
- •Раздел 7. Энергетический обмен
- •Лабораторная работа №42 обнаружение над в дрожжах
- •Контрольные вопросы:
- •Список литературы
- •Содержание
2. Качественные реакции на составные части нуклеопротеидов.
2.1. Биуретовая проба на полипептиды. К 5 каплям гидролизата прибавляют 10 капель 10 % раствора NaOH и 1 каплю 1 % раствора CuSO4. Жидкость окрашивается в розовый цвет.
2.2. Серебряная проба на пуриновые основания. Нейтрализуют 10 капель гидролизата 1 каплей концентрированного аммиака и добавляют 5 капель 1 % раствора AgNO3. При стоянии через 3-5 мин выпадает небольшой бурый осадок серебряных производных пуриновых оснований.
2.3. Качественная реакция Молиша на пентозную группировку. При взаимодействии концентрированной серной кислоты с гексозами или пентозами происходит дегидратация их: из пентоз образуется фурфурол, а из гексоз – оксиметилфурфурол. Они дают с тимолом (метилизопропилфенол) или α-нафтолом в присутствии концентрированной серной кислоты продукты конденсации красного цвета.
К 10 каплям профильтрованного гидролизата дрожжей добавляют 2-3 капли 1 % алкогольного раствора тимола, перемешивают и по стенке пробирки осторожно (!) приливают 20 капель концентрированной Н2SO4.
При встряхивании на дне пробирки образуется красное окрашивание вследствие образования продукта конденсации фурфурола с тимолом.
2.4. Молибденовая проба на фосфорную кислоту. К 3-5 каплям гидролизата приливают 20 капель молибденового реактива (раствор молибденовокислого аммония в азотной кислоте) и кипятят несколько минут. Жидкость окрашивается в лимонно-желтый цвет. При охлаждении образуется желтый кристаллический осадок комплексного соединения фосфорно-молибденовокислого аммония.
РЕЗУЛЬТАТЫ и ВЫВОД:
Контрольные вопросы:
Химический состав нуклеиновых кислот.
Назовите особенности строения нуклеотидов ДНК и РНК.
Что такое минорные основания? Приведите примеры.
Какой состав имеют нуклеопротеиды.
При каких условиях проводится гидролиз нуклеопротеидов? Что является продуктами такого гидролиза? Как можно его контролировать?
Синтез пуриновых и пиримидиновых нуклеотидов de novo.
Синтез нуклеотидов из готовых продуктов.
Распределение нуклеотидов в организме.
Циклические нуклеотиды.
Типы и распределение рибонуклеиновых кислот в клетке.
Раздел 4. Углеводы и их обмен
Тема 10 углеводы. Восстанавливающая способность углеводов
Углеводы представляют собой полигидроксиальдегиды и полигидроксикетоны с общей формулой (СН2О)n.
В организме человека и животных они выполняют энергетическую, защитную, структурную, механическую и другие функции. Так, глюкоза является ценнейшим питательным веществом для большинства клеток и особенно ткани мозга.
Все углеводы условно делят на две группы:
1. Углеводы с преимущественно энергетической функцией. Глюкоза при полном окислении одной молекулы дает 38 молекул АТФ. Гомополисахариды (крахмал – в растениях; гликоген – в животных клетках) состоят из остатков α-D-глюкозы. Откладываются в цитозоле в виде гранул и несут резервную функцию.
2. Углеводы с преимущественно структурной функцией. Гликопротеины и гликолипиды входят в состав мембран клеток и участвуют в специфических взаимодействиях (например, рецепторы). Гликозаминогликаны входят в состав соединительной ткани. Некоторые из них (гепарин) выполняют регуляторную функцию.
Классификация углеводов основана на их структуре и физико-химических свойствах.
ЗАДАНИЕ: заполнить таблицу 22.
Таблица 22
Класс углевода |
Особенности строения |
Основные представители. Формулы |
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
Восстанавливающая способность углеводов.
В растворах сахаров можно обнаружить карбонильную группу, спиртовой и полуацетальный гидроксилы. Каждая из этих групп вступает в реакции окисления-восстановления. Восстанавливающая способность моносахаридов характеризуется тем, что при действии слабых окислителей или ферментативно альдегидная группа в положении С1 переходит в карбоксильную.
У дисахаридов, обладающих восстанавливающей способностью, связь между мономерами осуществляется за счет спиртового и полуацетального гидроксилов. Одно из мономерных звеньев сохраняет свободный полуацетальный гидроксил, который определяет восстанавливающие свойства и все реакции, свойственные моносахаридам.
У невосстанавливающих дисахаридов гликозидная связь образована за счет полуацетальных гидроксилов обоих моносахаридов. Поэтому они не проявляют характерных реакций альдегидной группы.