
- •Кожина Ольга Владимировна
- •Раздел 1. Белки
- •Тема 1 аминокислотный состав белка. Классификация и свойства аминокислот. Качественные реакции на белки и аминокислоты
- •Лабораторная работа №1 цветные реакции на белки и аминокислоты
- •1.4 Реакция на серусодержащие аминокислоты (реакция Фоля).
- •Контрольные вопросы:
- •Тема 2 физико-химические свойства белков. Методы осаждения белков. Высаливание и денатурация
- •Лабораторная работа №2 диализ растворов белков
- •Лабораторная работа №3 осаждение белков высаливанием
- •Лабораторная работа №4 осаждение белков при кипячении
- •Лабораторная работа №5 осаждение белков солями тяжелых металлов
- •Лабораторная работа №6 осаждение белков концентрированными минеральными кислотами
- •Лабораторная работа №7 осаждение белков органическими веществами
- •Контрольные вопросы:
- •Тема 3 количественное определение белка. Оценка на основании фотометрии продуктов цветной реакции. Построение калибровочных графиков
- •Лабораторная работа №8 количественное определение белка
- •Контрольные вопросы:
- •Тема 4 гидролиз белка. Характеристика пептидной связи
- •Лабораторная работа №9 кислотный гидролиз простого белка
- •Лабораторная работа №10 формоловое титрование (по Серенсену)
- •Контрольные вопросы:
- •Тема 5 хроматографическое разделение аминокислот
- •Лабораторная работа №11 хроматографическое разделение аминокислот на бумаге
- •Контрольные вопросы:
- •Раздел 2. Ферменты
- •Тема 6 ферменты как биологические катализаторы. Свойства ферментов
- •Лабораторная работа №12 специфичность действия ферментов
- •Лабораторная работа №13 термолабильность ферментов
- •Лабораторная работа №14 влияние реакции среды на действие ферментов слюны
- •Определение оптимума рН действия амилазы слюны
- •Лабораторная работа №15 влияние активаторов и ингибиторов на действие ферментов
- •Контрольные вопросы:
- •Тема 7 действие ферментов отдельных классов
- •Лабораторная работа №16 определение активности пепсина
- •Лабораторная работа №17 действие пепсина на белок фибрин
- •Лабораторная работа №18 обнаружение каталазы в крови
- •Лабораторная работа №19 действие липазы на жиры
- •Лабораторная работа №20 действие пероксидазы крови
- •Контрольные вопросы:
- •Тема 8 витамины, как структурные компоненты ферментов
- •Лабораторная работа №21 качественные реакции на жирорастворимые витамины
- •Лабораторная работа №22 качественные реакции на витамины группы в
- •Лабораторная работа №23 качественные реакции на витамин с
- •Лабораторная работа №24 количественное определение витамина с
- •Контрольные вопросы:
- •Раздел 3. Нуклеиновые кислоты и их обмен
- •Тема 9 структура и функции нуклеиновых кислот. Нуклеопротеиды
- •Лабораторная работа №25 выделение дезоксирибонуклеопротеидов (днп) из тканей
- •1. Экстракция и выделение днп из тканей.
- •Лабораторная работа №26 гидролиз нуклеопротеидов
- •2. Качественные реакции на составные части нуклеопротеидов.
- •Контрольные вопросы:
- •Раздел 4. Углеводы и их обмен
- •Тема 10 углеводы. Восстанавливающая способность углеводов
- •Лабораторная работа №27 качественное определение глюкозы
- •Лабораторная работа №28 качественное определение фруктозы
- •Лабораторная работа №29 обнаружение восстанавливающей способности углеводов
- •Контрольные вопросы:
- •Лабораторная работа №31 обнаружение молочной кислоты в мышечной ткани
- •Лабораторная работа №32 количественное определение пировиноградной кислоты
- •Контрольные вопросы:
- •Раздел 5. Липиды и их обмен
- •Тема 12 структура и функции липидов
- •Лабораторная работа № 33 качественное определение липидов сыворотки крови
- •Лабораторная работа №34 сравнение ненасыщенности жиров
- •Лабораторная работа №35 обнаружение стеролов
- •Лабораторная работа №36 качественные реакции на холестерин
- •1. Реакция Либермана-Бурхарда.
- •2. Реакция Сальковского.
- •Контрольные вопросы:
- •Лабораторная работа №38 качественные реакции на желчные кислоты
- •Контрольные вопросы:
- •Раздел 6. Гормоны
- •Тема 14 регуляция обмена веществ. Гормоны
- •Лабораторная работа №39 качественные реакции на инсулин
- •Лабораторная работа №39 качественное определение адреналина
- •Контрольные вопросы:
- •Раздел 7. Энергетический обмен
- •Лабораторная работа №42 обнаружение над в дрожжах
- •Контрольные вопросы:
- •Список литературы
- •Содержание
Лабораторная работа №36 качественные реакции на холестерин
Холестерин относится к стеринам, представляет собой вторичный циклический спирт. Большая часть холестерина в крови содержится в виде эфиров холестерина – холестеридов – сложных эфиров с кислотами, чаще всего с высшими жирными кислотами – пальмитиновой, стеариновой или олеиновой. Холестерин и его эфиры нерастворимы в воде, хорошо растворяются в органических растворителях: хлороформе, эфире, горячем спирте и др.
В крови холестерин образует комплексные соединения с белками. В мозге холестерин в норме содержится почти исключительно в свободном виде, а не в виде эфиров. В головном мозге происходит синтез холестерина.
Из холестерина в организме человека образуются соединения, обладающие высокой физиологической активностью: желчные кислоты и гормоны.
1. Реакция Либермана-Бурхарда.
ПРИНЦИП РАБОТЫ:
Раствор холестерина в хлороформе дает с уксусным ангидридом и концентрированной серной кислотой красное окрашивание, переходящее затем в синие и зеленые тона.
РЕАКТИВЫ и ОБОРУДОВАНИЕ:
1) холестерин, 1 % хлороформный раствор; 2) уксусный ангидрид; 3) серная кислота, концентрированная; 4) сухое часовое стекло или чашка Петри; 5) пипетки.
ХОД РАБОТЫ:
На сухое стекло наносят 1 каплю хлороформного раствора холестерина, 1 каплю уксусного ангидрида и 1 каплю концентрированной серной кислоты. Образуется красная, затем красно-фиолетовая окраска, которая со временем принимает другие оттенки – синий, зеленый.
РЕЗУЛЬТАТЫ и ВЫВОД:
2. Реакция Сальковского.
ПРИНЦИП РАБОТЫ:
Под действием концентрированной серной кислоты происходит дегидратация холестерина, конденсация образовавшихся продуктов в виде непредельных углеводородов, соединяющихся с серной кислотой с образованием окрашенных продуктов.
РЕАКТИВЫ и ОБОРУДОВАНИЕ:
1) холестерин, 1 % хлороформный раствор; 2) серная кислота концентрированная; 3) сухое часовое стекло или чашка Петри; 4) пипетки.
ХОД РАБОТЫ:
На сухое стекло наносят 1 каплю хлороформного раствора холестерина и 1 каплю серной кислоты (концентрированной). Развивается окрашивание.
РЕЗУЛЬТАТЫ и ВЫВОД:
Контрольные вопросы:
Липиды: химическая структура, физико-химические свойства, значение.
Жирные кислоты, классификация, свойства и биологическое значение.
Классификация фосфолипидов. Химическая структура. Физико-химические свойства.
Классификация гликолипидов. Химическая структура. Физико-химические свойства.
Липопротеиды. Классификация. Свойства. Значение.
Холестерин. Химическая структура, биологическое значение.
Какие вещества образуются из холестерина в организме человека?
Тема 13
ОБМЕН ЛИПИДОВ
Лабораторная работа №37
ЭМУЛЬГИРОВАНИЕ ЖИРА
Жиры, чтобы подвергнуться действию липаз, должны быть предварительно эмульгированы. Желчные кислоты – поверхностно активные вещества, являющиеся основными эмульгаторами жира в пищеварительном тракте. Желчные кислоты поступают с желчью в двеннадцатиперстную кишку, обволакивают капельки жира и препятствуют их слиянию. Желчные кислоты – холевая, дезоксихолевая, кенодезоксихолевая и литохолевая – являются производными холановой кислоты.
Белки, мыла, соли угольной кислоты, содержащиеся в некотором количестве в двеннадцатиперстной кишке, также эмульгируют жиры.
ПРИНЦИП РАБОТЫ:
Взбалтывая жир с водой, можно наблюдать образование расслаивающейся, нестойкой эмульсии. Добавляя поверхностно активные вещества, можно получить стойкую эмульсию. Эмульгаторы легко адсорбируются на поверхности раздела двух фаз, образуя тончайшую пленку, которая препятствует слиянию капелек эмульсии.
РЕАКТИВЫ и ОБОРУДОВАНИЕ:
1) растительное масло; 2) NaOH, 1 %; 3) мыло, 1 %; 4) Na2CO3, 1 %; 5) раствор яичного белка; 6) желчь; 7) пробирки.
ХОД РАБОТЫ:
В 5 пробирок наливают по 3 капли растительного масла. Добавляют в 1-ю пробирку 20 капель дистиллированной воды, во 2-ю – 20 капель желчи, в 3-ю – 20 капель 1 % раствора яичного белка, в 4-ю – 20 капель 1 % раствора мыла, в 5-ю – 20 капель 1 % раствора углекислого натрия. Все пробирки тщательно взбалтывают. Через 5 минут наблюдают сохранение эмульсии.
Результаты занести в таблицу 28, отметить сохранилась ли образовавшаяся эмульсия; если сохранилась, указать степень ее дисперсности.
Таблица 28
Мыло |
Вода |
Желчь |
Белок |
Сода | |
Сохранение эмульсии Степень ее дисперсности |
|
|
|
|
|
ВЫВОД: