Клиническая_лабораторная_диагностика_2019_А_А_Кишкун_2_е_изд_

Источник KingMed.info

В случае если инфицирование происходит незадолго до рождения ребенка, то внутриутробно начавшаяся первая стадия болезни (стадия генерализации) продолжается и после рождения (характерны разнообразные клинические симптомы со стороны внутренних органов). При более ранних сроках инфицирования плода стадия генерализации может закончиться внутриутробно, тогда ребенок рождается уже с выраженными симптомами поражения ЦНС (в подострой стадии заболевания) - с явлениями энцефалита и менингоэнцефалита. Если 2 первые стадии (генерализации и стадия энцефалита) прошли внутриутробно, ребенок может родиться с хронической формой токсоплазмоза. Для таких детей характерны грубые повреждения ЦНС и глаз. Поздние проявления токсоплазмоза, асимптоматичные при рождении, могут обнаружиться к концу 1-го года жизни (нарастающая гидроцефалия) или позднее (к 4-7 годам - хо-риоретинит, имбецильность - в 10-12 лет).

Для токсоплазмоза характерен ряд особенностей, которые следует учитывать при лабораторной диагностике этого заболевания.

Во-первых, возбудитель токсоплазмоза (Toxoplasma gondii) обладает низкой патогенностью и в большинстве случаев при попадании в организм человека не вызывает у него развития манифестного выраженного процесса, т.е. инфицирование организма, как правило, реализуется в носительстве паразита. Клинические проявления заболевания у человека чаще всего связаны с наличием у последнего первичного или вторичного иммунодефицита.

Во-вторых, широкая пораженность населения токсоплазмой (от 10 до 67% лиц в возрасте старше 50 лет) обусловливает и наличие значительного числа людей, положительно реагирующих на токсоплазмоз в результате адекватного иммунного ответа макроорганизма на внедрившийся (персистирующий) инфект. Такое состояние имеет место как у абсолютно здоровых лиц (носительство), так и у больных другими, обычно ведущими заболеваниями (микст-инфекция), и, конечно, у больных именно этой инфекцией (токсоплазмоз), которая у беременных женщин имеет тенденцию преимущественно к бессимптомному течению (клинически проявляется только у 20%).

При токсоплазмозе следует различать токсоплазмоинфекцию (инфицированность, носительство) и токсоплазменное заболевание (токсоплазмоз), поэтому основным в лабораторной диагностике является не сам факт обнаружения положительного иммунного ответа (антител), а уточнение характера течения процесса - носительство или болезнь. Комплексное определение антител классов IgM и IgG дает возможность быстро подтвердить или опровергнуть диагноз.

В последние годы для подтверждения диагноза токсоплазмоза используют ПЦР. Материалом для исследования служит спинномозговая жидкость, кровь, глазная жидкость. ПЦР применяют в пренатальной диагностике конгениталь-ного токсоплазмоза, для чего исследуют амниотическую жидкость.

12.7.2.1. Антитела IgM и IgG к Toxoplasma gondii

Антитела IgM появляются в острый период инфекции (на первой неделе в титре 1:10), достигают пика в пределах месяца (на 2-3-й неделе после заражения) и исчезают через 2-3 мес (самое раннее - через 1 мес). Их выявляют у 75% врожденно инфицированных новорожденных и у 97% инфицированных взрослых. Отрицательные результаты определения антител IgM позволяют исключить острую инфекцию, длительностью менее 3 нед, но не исключают инфекцию более продолжительного срока. При реинфекции уровень антител IgM вновь повышается (при наличии иммунодефицита не повышаются, в таких случаях для диагностики показана компьютерная или магнитно-резонансная томография головного мозга, которые выявляют множественные плотные

751

Источник KingMed.info

округлые очаги). Наличие в крови пациентов ревматоидного фактора и/или АНА может привести к ложноположительным результатам исследования. У иммуноскомпрометиро-ванных лиц антитела IgM в острый период инфекции обычно отсутствуют.

Ранняя диагностика токсоплазмоза особенно важна у беременных женщин вследствие риска внутриутробного заражения плода, которое может привести к гибели плода (самопроизвольный аборт) или рождению ребенка с серьезными поражениями. Специфическое лечение женщин на ранних стадиях инфекционного процесса снижает риск поражения плода на 60%. Поскольку антитела класса IgM не проникают через плаценту, обнаружение их в крови новорожденного свидетельствует о врожденной инфекции. Алгоритм диагностики токсоплазмоза представлен на рис. 12.22.

Рис. 12.22. Алгоритм обследования пациентов с подозрением на токсоплазмоз (схема)

Антитела IgG появляются в период реконвалесценции и у переболевших сохраняются до 10 лет. Определение антител класса IgG применяется для диагностики периода реконвалесценции токсоплазмоза и для оценки напряженности поствакцинального иммунитета. Ложноположительные результаты исследования можно получить у больных СКВ и ревматоидным артритом.

У лиц с положительными титрами антител на токсоплазмоз рекомендуется повторное проведение серологических исследований через 10-14 сут для установления динамики развития болезни. Отсутствие увеличения титров антител свидетельствует о хроническом токсоплазмозе. Увеличение титров на 3-4 разведения сыворотки свидетельствует об активном течении инвазии.

Показания для назначения серологических исследований на токсоплазмоз:

752

Источник KingMed.info

-беременные женщины по показаниям, с сероконверсией;

-больные токсоплазмозом, получающие специфическое лечение;

-дети, рожденные от матерей с отягощенным анамнезом по токсоплазмозу;

-эпидзначимые контингенты: ветеринарные и другие специалисты, связанные в работе с кошками и собаками;

-больные с клиническими проявлениями, характерными для токсоплазмоза.

12.7.2.2. Определение авиднoсти антител класса IgG к Toxoplasma gondii

Определение авидности антител класса IgG к Toxoplasma gondii используют в клинической практике для подтверждения или исключения факта недавнего первичного

инфицирования Toxoplasma gondii. Проведение этого теста особенно важно при обследовании беременных женщин, поскольку риск патологии развития плода существенно выше при остром первичном инфицировании во время беременности по сравнению с хронической инфекцией и реактивацией латентной инфекции. Определение авидности антител класса IgG к Toxoplasma gondii в настоящее время в ряде стран введено в клиническую практику в качестве дополнительного (в ряде стран обязательного) метода исследования при установлении срока первичного инфицирования при подозрении на токсоплазмоз у беременных женщин.

Выявление в сыворотке крови одновременно IgG- и IgM-антител к Toxoplasma gondii обычно свидетельствует о недавнем первичном инфицировании, поскольку срок исчезновения IgMантител составляет в среднем 2-3 мес от начала инфекционного процесса. Однако период циркуляции антител класса IgM может значительно варьировать в зависимости от индивидуальных особенностей иммунного ответа организма. При инфицировании Toxoplasma gondii следовые количества антител класса IgM в некоторых случаях выявляют в течение 6-12 мес и более. В связи с этим их присутствие в крови беременной женщины не всегда является подтверждением первичного инфицирования в период беременности. Кроме того, специфичность тест-систем для обнаружения антител класса IgM не является абсолютной. У ряда пациенток возможны неспецифические ложноположительные результаты. Выявление в крови высокоавидных антител класса IgG в таких ситуациях позволяет исключить недавнее первичное инфицирование. Низкоавидные IgG-антитела в среднем выявляют в течение 3-5 мес от начала инфекции (зависит от метода определения), но иногда они могут синтезироваться и в течение более длительного срока. Само по себе обнаружение низкоавидных IgG-антител к Toxoplasma gondii не является безусловным подтверждением факта свежего инфицирования, но служит дополнительным подтверждающим тестом наряду с данными анамнеза и клинической картиной. При реактивации инфекции выявляют специфические антитела класса IgG к Toxoplasma

gondii высокой авидности.

В основе тестов на определение авидности лежит метод дифференциации высоко- и низкоавидных антител с помощью обработки комплексов антигенантитело раствором мочевины, вызывающим денатурацию белка. После такой обработки связь низкоавидных антител с антигеном нарушается. Авидность антител класса IgG в пробе оценивают с помощью расчетного показателя - индекса авидности, который представляет собой отношение результата иммуноферментного определения концентрации IgG-антител в пробе, подвергнутой обработке мочевиной, к результату измерения концентрации IgG-антител в пробе, не обработанной денатурирующим агентом.

Оценка результатов проводится в соответствии с приведенными ниже данными:

753

Источник KingMed.info

-индекс авидности антител класса IgG к Toxoplasma gondii меньше 0,2 означает присутствие низкоавидных антител IgG и не позволяет в этом случае исключить первичное инфицирование Toxoplasma gondii в течение последних 4 мес;

-индекс авидности антител класса IgG к Toxoplasma gondii >0,3 указывает на присутствие высокоавидных антител класса IgG и позволяет исключить первичное

инфицирование Toxoplasma gondii в последние 4 мес;

-значения индекса авидности антител класса IgG к Toxoplasma gondii от 0,2 до 0,3 соответствуют пограничной авидности антител IgG в пробе и требуют повторного исследования через 1-2 мес.

Вместе с тем клиницист должен понимать всю сложность и ответственность оценки результатов определения авидности антител класса IgG к Toxoplasma gondii для принятия решения о сроках инфицирования беременных женщин. Поэтому данные первого теста необходимо подтвердить при повторном тестировании.

12.8. МЕНИНГОКОККОВАЯ ИНФЕКЦИЯ

Возбудителем менингококковой инфекции является грамотрицательный диплококк Neisseria meningitis. Выделяют 5 серологических типов менингококка - A, B, C, D, E. В период эпидемий преобладает тип А, во внеэпидемиче-ский период - тип В. В диагностике менингококковой инфекции главное место занимает бактериологический метод исследования. Для диагностики менингококковой инфекции используют и серологические методы - выявление

антигенов Neisseria meningitis в СМЖ или антител в сыворотке крови. Для обнаружения антител применяют ряд методов; наиболее чувствительны и информативны из них - РПГА и иммуноферментный метод, в которых в качестве антигенов используют группоспецифические полисахариды.

12.8.1. Антитела к менингококку

Исследуется сыворотка крови больного на 1-3-й день от начала заболевания и на 7-10-й день. Диагностическим считается нарастание титра антител через 7-10 сут не менее чем в 4 раза или для РПГА - 1:40 (1:20 у детей до 1 года) и выше при однократном исследовании. Обычно с 5-6-го дня заболевания титры антител, выявляемых в РПГА, достигают 1:200 и выше.

12.8.2. Обнаружение антигенов Neisseria meningitis

Важное значение для ранней диагностики менингококковой инфекции имеет исследование СМЖ у пациентов с менингеальной симптоматикой для выявления антигенов Neisseria meningitis. Для этих целей в настоящее время выпускается множество диагностических тест-систем. В основе тест-систем лежит метод латекс-агглютинации. При наличии антигенов менингококков в СМЖ латекс-тест становится положительным, результат можно получить в течение 15-30 мин (чувствительность и специфичность около 90%).

Диагностические тесты, в основе которых лежит метод ИФА для выявления антигенов менингококков в СМЖ, обладают большей чувствительностью (более 80%) и специфичностью (более 95%), чем латекс-тесты.

12.9. ИНФЕКЦИЯ HELICOBACTER PYLORI

Возбудитель хеликобактериоза (Helicobacterpylori) - грамотрицательная палочка, чаще всего имеющая S-образную форму. Helicobacter pylori встречается в среднем у 87% больных язвенной болезнью и 75% больных острыми гастритами. После проникновения бактерий в желудок происходит их адгезия к клеткам желудочного эпителия в области межклеточных промежутков.

754

Источник KingMed.info

Последнее обусловлено хемотаксисом бактерий к местам выхода мочевины и гемина, которые используются для жизнедеятельности бактерий. Расщепляемая уреазой бактерий мочевина превращается в аммиак и углекислый газ, которые создают вокруг колоний бактерий защитный слой, предохраняющий их от неблагоприятного рН желудочного сока.

Одновременно Helicobacter pylori оказывает и токсическое действие на слизистую оболочку желудка.

Во-первых, аммиак, получаемый в результате разложения мочевины уреазой, вырабатываемой бактериями, обладает способностью прямо или косвенно разрушать эпителиальный барьер.

Во-вторых, бактерии Helicobacter pylori обладают способностью продуцировать цитопатические токсины.

В-третьих, они способны продуцировать протеиназу и ферменты, разрушающие слизистую оболочку желудка.

В-четвертых, снижают гидрофобную емкость эпителиального слоя, что связано с действием липаз, продуцируемых бактериями.

Жизнедеятельность хеликобактеров связана исключительно лишь с эпителием желудочного типа, поэтому патология двенадцатиперстной кишки (или других отделов кишечника и пищевода), обусловленная Helicobacter pylori, возможна лишь при желудочной дисплазии в двенадцатиперстной кишке (или других отделах желудочно-кишечного тракта).

В настоящее время имеются однозначные научные доказательства связи инфекции Helicobacter pylori с хроническим гастритом, язвенной болезнью желудка и двенадцатиперстной кишки, злокачественными опухолями желудка - аденокарциномой и экстранодальной В-клеточной лимфомой.

Для диагностики Helicobacter pylori используются определенные методы диагностики. 1. Бактериологические:

а) обнаружение бактерий в мазках отпечатках;

б) выделение культуры Helicobacter pylori (чувствительность метода - 3397%, специфичность - 100%).

2.Серологические: РСК, РПГА, ИФА, иммуноблоттинг.

3.Морфологические:

а) гистологический: выявление хеликобактеров в биоптате при окраске по Романовскому-Гимзе, по Граму и др. (чувствительность метода - 8699%, специфичность - 86-95%);

б) цитологический: исследование мазков-отпечатков (1-2 и более), полученных при эндоскопии из биоптатов антрального отдела слизистой оболочки желудка (чувствительность метода - 8090%, специфичность - 100%).

4. Биохимические:

а) уреазный тест с биоптатами (тесты промышленного производства: «CLO-тест», «Де-Нол тест» «PyloriTek», «CUT-тест», «Хелпил-тест», «Campy-test» и др.); чувствительность метода составляет 65-95%, специфичность - 75-100%); уреазный тест основан на способности бактерий Helicobacter pylori выделять большое количество уреазы; полученный при фиброгастроскопии биоптат погружают в полужидкую среду желтого цвета, где содержится мочевина и вещество-индикатор

755

Источник KingMed.info

рН, которое в щелочной среде, возникающей при расщеплении мочевины уреазой бактерий (при их наличии в биоптате), дает красное окрашивание;

б) анализ выдыхаемого воздуха (аэротест, при котором в выдыхаемом воздухе определяется содержание аммиака, или проводится более сложный анализ содержания в выдыхаемом воздухе количества 13С и 14С после принятия пациентом внутрь мочевины, предварительно меченной указанными изотопами); чувствительность метода составляет до 99% и специфичность - 98%.

5. ИФА:

а) обнаружение Helicobacter pylori в кале;

б) обнаружение Helicobacter pylori в слюне и транссудате десен (чувствительность - 66%, специфичность - 66,7%).

6. ПЦР.

12.9.1. Антитела к Helicobacter pylori

Самым широко распространенным серологическим методом диагностики Helicobacter

pylori является метод ИФА. Метод неинвазивный и косвенный - в крови больного определяют антитела к Helicobacter pylori, относящиеся к иммуноглобулинам A, M и чаще всего G. При использовании этого метода в общем титре антител наиболее ценным является определение уровня IgG и IgA антител к Helicobacter pylori. Чувствительность метода колеблется от 87 до 98%, специфичность - 75-100%. ИФА - самый подходящий метод для эпидемиологических обследований и скрининга. Его применение в клинической практике определяется индивидуально в конкретной ситуации. Пациенту, предъявляющему гастроэнтерологические жалобы, как правило, необходимо проведение эндоскопии, чтобы оценить состояние гастродуоденальной слизистой оболочки, целесообразно одновременно взять биоптаты для уреазного теста и/или гистологического исследования, в таком случае ИФА не понадобится. Простое качественное определение антител к Helicobacter pylori методом ИФА используют главным образом для диагностики инфекции. В норме антитела IgG к Helicobacter pylori при их качественном определении в сыворотке отсутствуют; при количественном исследовании - титр антител IgG меньше 8 Е/мл, 8-12 Е/мл - пограничная зона.

Ряд диагностических тест-систем на основе ИФА, которые обладают высокой чувствительностью, позволяют количественно определять антитела к Helicobacter pylori различных классов. Такие тест-системы можно применять как для диагностики инфекции, так и оценки эрадикации. Если через 3040 дней после лечения значения титра антител IgG уменьшились на 20% или более, можно считать, что в результате лечения наступила эрадикация Helicobacter pylori; если значение титра повышается, не изменяется или его уменьшение составляет менее 20%, то это необходимо расценивать как отсутствие эрадикации.

Существуют качественные тесты для определения антител к Helicobacter pylori, которые можно выполнить у постели больного. Они основаны на латекс-агглютинации или твердофазном ИФА и выявляют антитела IgG к Helicobacter pylori. Для проведения исследования нужна капля крови, взятой из пальца, результат считывается буквально через несколько минут, никаких дополнительных реактивов не требуется.

Диагностическая чувствительность таких тестов составляет 94%, а специфичность - 98%. Эти тесты незаменимы в небольших больницах или амбулаториях, где потребность в диагностике определяется единичными анализами, или в кабинете семейного врача.

756

Источник KingMed.info

Применяются и тест-системы для количественного определения антигена Helicobacter pylori в фекалиях больных методом ИФА. Диагностическая чувствительность таких методов в отношении выявления НР составляет 88,9%, специфичность - 94,6%.

12.9.2. Иммуноблоттинг для определения антител к белкам Helicobacter pylori

Исследования последних лет показали, что развитие гастрита и язвы желудка связано в первую очередь с колонизацией слизистой токсигенными штаммами Helicobacter pylori, в то время как колонизация нетоксигенными штаммами только в небольшом проценте случаев приводит к развитию этих заболеваний. Токсигенность штаммов обусловлена продукцией вакуолярного цитотоксина, синтез которого связан с продукцией белка с молекулярной массой 120 000-128 000, кодируемого геном CagА (cytoxin-associated gene A), а также токсинов, кодируемых геном VacА. Простое определение антител в сыворотке крови пациента свидетельствует о наличии инфекции Helicobacter pylori, но не дает информации о том, вызвана ли она наличием токсигенных штаммов бактерий. При получении положительного результата для подтверждения наличия токсигенных штаммов бактерий используется метод иммуно-блоттинга Western-blot - встречная преципитация в геле антител в сыворотке крови больного с различными

белками Helicobacter pylori, подвергнутыми разделению по молекулярной массе с помощью электрофореза и нанесенными на нитроцеллюлозу. Иммуноблоттинг позволяет выявить наличие антител в крови пациента к токсигенным белкам Helicobacter pylori, таким как CagА и VacА, уреазным субъединицам, а также белкам с молекулярной массой 19 500, 26 500, 30 000, 36 000, 89 000, которые специфичны для этой инфекции. Данный метод позволяет исключить неспецифическое увеличение уровня антител при простом серологическом исследовании (чувствительность - 98%, специфичность - 97%).

12.10. ХЛАМИДИЙНАЯ ИНФЕКЦИЯ

Хламидии представляют большую группу облигатных внутриклеточных паразитов, очень близких к грамотрицательным бактериям. Их можно рассматривать как грамотрицательные бактерии, которые утратили способность синтезировать АТФ, гуанозинтрифосфат и ряд других ферментных систем, иными словами, утратили способность выработки метаболической энергии. Этот дефект обусловливает их внутриклеточный рост, благодаря которому они имеют доступ к богатым энергией промежуточным продуктам метаболизма клеток хозяина. В семействе Chlamydiaceae в настоящее время выделено два рода - Chlamydia и Chlamydophila, причем они отличаются между собой и по фенотипическим признакам.

Представители рода Chlamydia обладают сходными по структуре экстрахромосомными элементами, способны накапливать гликоген во включениях, элементарные тельца, попав в клетку хозяина, стремятся слиться в одно общее большое включение, биологический смысл которого - в обмене генетической информацией, что обусловливает большую генетическую вариабельность возбудителя. Представители рода Chlamydophila не способны продуцировать гликоген; каждое элементарное тельце образует собственное включение, которых может быть много, и они более мелкие.

Род Chlamydia включает три вида: Chlamydia trachomatis, Chlamydia muridarum и Chlamydia suis.

Chlamydia trachomatis является исключительно паразитом человека, вызывает трахому, урогенитальные заболевания, некоторые формы артрита, конъюнктивит и пневмонию новорожденных. C. trachomatis имеет два биовара: trachoma (14 сероваров) и LGV (4 серовара). Другие виды Chlamydia заболеваний у человека не вызывают.

757

Источник KingMed.info

Все хламидии сходны по морфологическим признакам, имеют общий групповой антиген и размножаются в цитоплазме организма-хозяина, проходя определенные стадии развития (рис. 12.23). Инфекционным началом является так называемое элементарное тельце - маленькая клетка диаметром около 0,3 мкм. Эта частица проникает в клетку хозяина при фагоцитозе. Из поверхностных мембран клетки хозяина вокруг этой маленькой частицы образуется вакуоль. Элементарное тельце делится, превращаясь в «ретикулярное тельце» диаметром около 0,5-1,0 мкм. Внутри образованной вакуоли крупная частица увеличивается в размерах и многократно делится путем образования поперечной перегородки. В конечном счете вся вакуоль заполняется элементарными частицами (из одного элементарного тельца получается от 200 до 1000 инфекционных единиц) и превращается во «включение» в цитоплазме клетки хозяина. Новообразованные элементарные тельца выходят из клетки, которая в конечном счете разрывается, и могут инфицировать новые клетки. Весь цикл развития занимает 48-72 ч.

Рис. 12.23. Жизненный цикл хламидий

Род Chlamydophila составляют 6 видов: C. psittaci, C. pneumoniae, C. pecorum, C. abortus, C. caviae и C. felis.

Chlamydophila pecorum является исключительно возбудителем заболеваний животных. Несколько штаммов C. pecorum выделены у сумчатых (коала), жвачных млекопитающих и свиней.

Chlamydophila pneumoniae является возбудителем респираторных инфекций. Этот вид имеет три биовара: TWAR (Taiwan acute respiratory), Koala и Equine, названия которых связаны с источником выделения штаммов. Все штаммы C. pneumoniae, паразитирующие у животных и человека, имеют сходные генетические и антигенные характеристики, что позволяет рассматривать их как представителей одного вида. Штаммы TWAR в основном являются возбудителями заболеваний респираторного тракта у человека, вызывая преимущественно острые и хронические бронхиты и пневмонии. В последнее время накапливается все больше данных, свидетельствующих о возможной взаимосвязи C. pneumoniae с развитием атеросклероза и бронхиальной астмы.

Chlamydophila psittaci включает штаммы, для которых основными хозяевами являются птицы. Все эти штаммы могут передаваться человеку, вызывая пситтакоз. C. psittaci включает 8 сероваров, многие из которых могут паразитировать у нескольких видов птиц.

Chlamydophila abortus названа по основному состоянию, вызываемому этим возбудителем. Этот вид распространен среди жвачных животных и в основном колонизирует плаценту.

758

Источник KingMed.info

Спорадические аборты, которые были вызваны C. abortus, наблюдались у женщин, работавших с овцами, и получили название гестационный пситтакоз.

Chlamydophila felis вызывает риниты и конъюнктивиты у домашних кошек (Felis catus). Отмечены зоонозные инфекции, вызванные C. felis, у людей и проявлявшиеся в виде конъюнктивита. Chlamydophila caviae впервые выделена из конъюнктивы морской свинки (Cavia cobaya) и впоследствии описана у нескольких животных данного вида. В лабораторных условиях было показано, что C. caviae способна вызывать инфекции половых органов, сходных по проявлениям с аналогичными заболеваниями у человека.

12.10.1. Заболевания, вызываемые Chlamidia pneumoniae

Chlamidia pneumoniae вызывает у человека поражение респираторного тракта. В большинстве случаев (у 70% инфицированных) инфекция протекает бессимптомно, в других случаях по варианту назофарингеальной и пневмонической форм поражений. Продолжительность инкубационного периода довольно длительна (точно не установлена). Бессимптомное носительство может продолжаться до 1 года и более, что в ряде случаев приводит к появлению рецидивов и обострений хронического астматического бронхита, бронхиальной астмы, хронической обструктивной болезни легких. После исчезновения клинических признаков острого заболевания Chlamidia pneumoniae может быть выделена куль-туральным методом из носоглоточных смывов спустя даже 12 мес. Пневмонии, обусловленные Chlamidia pneumoniae, не имеют патогномоничных симптомов. Нередко наблюдаются случаи с тяжелым и упорным течением. Пневмония при первичном инфицировании более характерна для молодых лиц, а пнемония при реинфицировании чаще встречается среди пожилых людей.

Эпидемиологические исследования показали высокую распространенность инфекции Chlamidia pneumoniae. С этим возбудителем связывают 10-20% пневмоний и до 50% респираторных инфекций в целом. Эпидемии в организованных коллективах регистрируются каждые 3-6 лет.

Отдельные патогенетические механизмы пневмонии, вызванной Chlamidia pneumoniae, до настоящего времени еще не изучены. Известно, что Chlamidia pneumoniae размножается в альвеолярных макрофагах, гладкомышечных и эпителиальных клетках человека, что часто приводит к параличу ресничек эпителиальных клеток.

Диагностика инфекций, обусловленных Chlamidia pneumoniae, вызывает определенные трудности, которые в первую очередь связаны с отсутствием простых и надежных лабораторных методов обнаружения внутриклеточных паразитов и особенностями иммунного ответа организма больного на патоген.

Для этиологического подтверждения инфекции используется целый ряд методов, имеющих свои недостатки. РСК позволяет выявить специфические для Chlamidia pneumoniae антитела в сыворотке крови. Однако РСК высокоинформативна только для диагностики первичного инфицирования у молодых лиц, а при реинфицировании оценка результата исследования вызывает значительные трудности. Это обусловлено тем, что в силу распространенности инфекции антитела к Chlamidia pneumoniae в сыворотке крови могут присутствовать у 20-30% здоровых лиц в возрасте до 15 лет и у 50-70% людей более старшего возраста. Кроме того, несмотря на то что титры антител имеют тенденцию к снижению после перенесенной инфекции, тем не менее на протяжении жизни могут скачкообразно увеличиваться. Результаты РСК бывают отрицательными в 90% случаев реинфекции независимо от тяжести заболевания. Возможно, это обусловлено тем, что при реинфекции увеличивается количество антител класса IgG и IgА, которые не взаимодействуют с комплементом в РСК.

759

Источник KingMed.info

Любая инфекция, вызванная паразитами рода Chlamidia, сопровождается быстрым образованием антител к родоспецифическому для всех паразитов липополисахаридному антигену, которые могут быть выявлены методами иммунофлюоресценции и ИФА.

Антитела класса IgМ к Chlamidia pneumoniae, которые образуются при первичном инфицировании и подтверждают этиологический диагноз заболевания даже при однократном исследовании, можно обнаружить в реакции непрямой иммунофолюресценции или ИФА (чувствительность 97%, специфичность 90%). Однако рациональная антибактериальная терапия может препятствовать образованию антител и приводить к отрицательным результатам анализа. При реинфекции титр антител класса IgМ к Chlamidia pneumoniae увеличивается незначительно, поэтому оценка результатов исследования спорна. Антитела класса IgG и IgА при использовании ИФА выявляют позже антител IgМ при первичном инфицировании. Их совместное обнаружение в крови больного указывает на острую и/или манифестную хроническую инфекцию. Антитела класса IgА служат маркерами реинфицирования, так как присутствуют в крови на протяжении короткого периода времени. Антитела класса IgG имеют диагностическую ценность только при исследовании парных сывороток. Нарастание титра антител дает возможность предполагать наличие острой или манифестной инфекции. Диагностическая чувствительность обнаружения антител IgG для установления этиологии заболевания составляет 99%, специфичность - 95%, для антител IgА 95 и 93% соответственно. Динамика уровня антител к Chlamidia

pneumoniae различных классов приведена на рис. 12.24.

Рис. 12.24. Динамика уровня антител к Chlamidia pneumoniae

Для выявления антигенов Chlamidia pneumoniae в смывах из ротоглотки или бронхиальном смыве используют метод ИФА, непрямой иммунофлюоресцен-ции и ПЦР. Оптимальный культуральный метод выделения Chlamidia pneumo-niae еще не разработан.

Любое серологическое исследование, проводимое без одновременного использования ПЦР, а также при отсутствии парных сывороток, носит ретроспективный, а не диагностический характер.

12.10.2. Заболевания, вызываемые Chlamidia trachomatis

Трахома. Хронический кератоконъюнктивит, который начинается с острых воспалительных изменений конъюнктивы и роговицы и приводит к образованию рубцов и слепоте.

В соскобах с конъюнктивы методом флюоресценции определяют хлами-дийные антигены в эпителиальных клетках. Чаще их обнаруживают на ранних стадиях заболевания в верхней части конъюнктивы.

760