Полезные материалы за все 6 курсов / Учебники, методички, pdf / Гистология_для_патологанатомов_М_Л_Линдберг_2022_г_
.pdf
|
|
Введение в гистологию |
31 |
|
|
Диффузная |
Рыхлая |
нейроэндокринная система |
соединительная ткань |
(Слева) Диффузная нейроэндокринная система присутствует на всем протяжении пищеварительного и дыхательного трактов. Эти клетки вырабатывают много различных гормонов. Они также известны как апудоциты (предшественники захвата и декарбоксилирования аминов). Эти нейроэндокринные клетки в желудке экспрессируют CD56.
(Справа) Рыхлая соединительная ткань состоит из свободно расположенных волокон среди большого количества основного вещества и внеклеточной жидкости. В ней также присутствуют расположенные диффузно коллаген, ретикулин и эластические волокна
Плотная |
Ретикулярная |
соединительная ткань |
соединительная ткань |
(Слева) Плотная соединительная ткань, представленная на примере дермы, содержит больше волокон, чем рыхлая соединительная ткань. На микрофотографии видны плотные эозинофильные коллагеновые волокна 
. (Справа) Ретикулярная соединительная ткань состоит из коллагена III типа, который образует сеть, служащую каркасом для многих органов и желез. Окрашивание ретикулиновых волокон позволяет рассмотреть ретикулярную сеть в печени, которая создает опору для синусоидов и печеночных балок
Жировая |
Кость |
ткань |
|
(Слева) Жировая ткань — это тип соединительной ткани, в которой накапливается жир. Она также содержит рецепторы для многих веществ, в частности для глюкокортикоидов, гормона роста и инсулина. Эта ткань присутствует в подкожной клетчатке, сальнике и брыжейке.
(Справа) Кость — это особый тип соединительной ткани, который представляет собой основную структурную опору тела (скелет). Ее внеклеточный матрикс кальцинирован и окружает клетки, которые его вырабатывают
|
|
32 |
Раздел 1. Введение в гистологию и основные методы гистологической техники |
|
|
Хрящ |
Скелетная мышца |
(Слева) Хрящ — это специализированная, очень гибкая соединительная ткань. Он выстилает суставные поверхности костей, служит матрицей для формирования эндохондральной кости и присутствует во многих органах, таких как ухо, гортань и межпозвонковые диски.
(Справа) Скелетная мышца — это тип поперечнополосатой мышечной ткани, составляющая большую часть произвольной мускулатуры тела. Клетки ее длинные и цилиндрические (как видно на данном срезе), содержат периферически расположенные ядра 
Сердечная |
Гладкие |
мышца |
мышцы |
(Слева) Сердечная мышца — это непроизвольно сокращающаяся поперечнополосатая мышца, присутствующая только в сердце и проксимальных сегментах легочных вен, в тех местах, где они соединяются с сердцем. Мышечные волокна поперечнополосатые, их ядра расположены в центре. (Справа) Гладкая мышца 
присутствует в стенках внутренних органов. В качестве примера представлен препарат стенки желудка
Периферический |
Ганглии |
нерв |
|
(Слева) Периферические нервы состоят из множества пучков нервных клеток, каждый из которых окружен соединительной тканью, известной как периневрий. Периферическая нервная система включает черепные и спинномозговые нервы (фото P. Burger, MD). (Справа) Ганглии расположены по всему телу. Они представляют собой совокупность нейронов периферической нервной системы, которые содержат тела клеток сенсорных и постганглионарных автономных нейронов
ТрахеяЛегкие
Бронхиальное дерево
Ротовая полость
Слизистая ротовой полостиЯзыкДесны
ЗубыНёбо
Малые слюнные железы
Пищеварительная система: пищеварительный тракт
ПищеводЖелудокТонкая кишкаАппендикс
Толстая кишкаАнус
Пищеварительная система: внутренние органы/железы
Большие слюнные железыПоджелудочная железаПечень
|
|
Введение в гистологию |
33 |
|
|
Желчный пузырьСистема желчных протоков
Мочеполовая система
ПочкиМочевой пузырьМочеточникиУретраПростатаЯичникиМаточные трубыМаткаШейка маткиВлагалищеВульва
Наружные половые органыПростатаЯичкиПоловой член
Половые протоки и железы
Специальные органы чувств
ГлазНосУхо
Язык/вкусовые рецепторы
|
|
34 |
Раздел 1. Введение в гистологию и основные методы гистологической техники |
|
|
Основные гистологические артефакты
Matthew R. Lindberg, Laura W. Lamps
ТЕРМИНОЛОГИЯ
Гистологические артефакты
Вещества, структуры или повреждения, возникшие искусственно и отсутствующие в данной ткани в естественных условиях
Могут возникать на любом этапе работы с образцом ткани — от момента забора материала у пациента до изучения патологоанатомомВзятие материалаФиксация
Промывка в воде, обезвоживание и уплотнениеОбработкаПриготовление срезов микротомомОкрашиваниеПокрытие
Вызывают трудностиМогут затруднять гистологическую диагностику
Могут быть ошибочно приняты за значимое изменение
ОСНОВНЫЕ АРТЕФАКТЫ
Термокоагуляция (бликование)
Происходит во время получения образцаЭлектрокоагуляция приводит к деформации тканей
Удлинение ядер и псевдостратификацияСоединительная, жировая и мышечная ткань становят-
ся плотными и бесструктурнымиОтделение эпителия от базальной мембраны
Сдавление (артефакты растяжения, краш-синдром)
Происходит во время получения образцаИзбыточное давление на биопсийные щипцы приводит
к деформации тканиРазрушение и сдавление ядер
Выдавливание цитоплазматического содержимогоМожет также привести к телескопическому эффекту
(железа в железе)
Кристаллы льда
Образуются во время заморозки образцовВыраженные щели и отверстия в ткани от образования
кристаллов
Пузыри воздуха
Появляются во время заключения срезовЗанесение небольших пузырьков воздуха между покров-
ным и предметным стеклами
Надрезы, разрывы и фрагментация
Возникает во время резки микротомомПриводит к появлению отверстий в ткани и/или линей-
ных полосМожет привести к появлению тонких параллельных ли-
ний (зазубренности)
Пигменты и преципитаты
Появляются во время обработки или окрашиванияФормалин, ртуть, хроматыПоявляются в виде темно-коричневых, желто-коричневых
или черных гранул/скоплений
Складки |
Пузырьки |
ткани |
воздуха |
(Слева) Артефакт в виде складок 
и завитков тканей очень распространен в гистологии. Образование крупных складок исключается при аккуратном обращении со срезами, но образование отдельных небольших складок неизбежно, особенно при изготовлении препаратов из тканей с твердыми включениями (например, костью) или отеком/миксоидными изменениями.
(Справа) Во время обработки между предметным и покровным стеклами может попасть воздух. Этот артефакт гистологически выглядит как резко очерченные стекловидные зоны 
и препятствует четкой визуализации подлежащей ткани
|
|
Основные гистологические артефакты |
35 |
|
|
Надрезы и надрывы |
Фрагментация |
тканей |
тканей |
(Слева) Линейные разломы 
или надрывы могут быть обнаружены в срезах тканей и являются результатом повреждения лезвием во время рассечения парафинового блока микротомом. Иногда эти надрывы имеют повторяющийся, параллельный вид и описываются как «дребезжание». (Справа) Фрагментация ткани во время ее рассечения и обработки препятствует адекватной гистологической оценке, особенно в небольших образцах
Аутолиз |
Загрязнения |
(Слева) Свежая ткань, удаленная из тела, начнет разрушаться (аутолизироваться), если ее не поместить в фиксатор. Аутолизированная ткань характеризуется лизисом цитоплазмы и ядер, усадкой клеток и бледным окрашиванием в целом. Находки такого рода могут быть неверно истолкованы как некроз.
(Справа) В гистологических срезах могут быть идентифицированы различные экзогенные загрязнители, включая пыльцу, мелкие волокна и другие материалы 
. Иногда можно обнаружить и кусочки ткани из других образцов («поплавки»)
Электрокоагуляция |
Недостаточная |
|
декальцинация |
(Слева) В ткани, удаленной с помощью электрокоагуляции или аналогичных методов, обнаруживают характерные артифициальные изменения, например, вытянутые ядра и псевдостратификацию
. Пораженная соединительная ткань 
часто выглядит более плотной и аморфной.
(Справа) Ткань с макроскопически выраженной костью перед обработкой необходимо декальцинировать, чтобы можно было изготовить срезы микротомом. Недостаточно декальцинированная кость минерализована и выглядит зернистой и фиолетовой
. В подобной ситуации также возникают и другие артефакты, например, складки и надрывы
|
|
36 |
Раздел 1. Введение в гистологию и основные методы гистологической техники |
|
|
Загрязняющие вещества
Могут возникнуть во время сбора, обработки, окрашивания или накрытия покровным стеклом
Пятна и фрагменты экзогенного материалаКлетки плоского эпителия (вследствие прикосновения
пальцами к препарату)Зерна пыльцыМелкие волокнаТкань из других образцов
Недостаточная декальцинация
Происходит в ходе макроскопического исследования или обработки
Большие куски ткани, содержащие кость, должны быть в достаточной степени деминерализованы (размягчены), чтобы их можно было разрезать лезвием микротома
Недостаточно декальцинированная кость выглядит темнофиолетовой и зернистой
Неправильная фиксация
Происходит во время взятия образцовСвежую ткань необходимо поместить в формалин, иначе
она будет подвергаться аутолизу (разрушаться)Резецированные полые органы (например, кишечник,
желчный пузырь) должны быть вскрыты, чтобы обеспечить фиксацию их внутренней поверхности
Использование спирта в качестве фиксатора вместо формалина может деформировать ткани или вызвать уменьшение их в размерах
|
|
Гистохимия (специальные окраски) |
37 |
|
|
Гистохимия (специальные окраски)
Matthew R. Lindberg, Laura W. Lamps
ТЕРМИНОЛОГИЯ
Фиксация
Воздействие на белки ткани таким образом, чтобы сделать ткань устойчивой к дальнейшим изменениям
Обработка
Процесс подготовки ткани для изготовления микроскопических срезовОбезвоживание, очистка, пропитывание ткани парафи-
ном, заливка, приготовление срезов ткани для микропрепаратов
Гистохимическое окрашивание
Использование химических реакций для выделения или дифференцировки различных компонентов в препарате
ОКРАШИВАНИЕ ЯДЕР И ЦИТОПЛАЗМЫ
Гематоксилин и эозин
Рутинное окрашивание, наиболее часто используемое при исследовании тканейОкрашивает ядра в синий/фиолетовый цвет
Окрашивает цитоплазму в розовый цвет
Окраска по Фельгену
Окрашивает ядерную ДНК в красновато-фиолетовый цвет
Метиловый зеленый — пиронин Y
Позволяет дифференцировать ДНК и РНК
Окрашивает ядерную ДНК в цвета от синего до зеленого
Окрашивает цитоплазматическую РНК в цвета от розового до розово-красного
Используется для обнаружения плазматических клеток и иммунобластов
По Романовскому
Включает в себя несколько различных модификаций окрашиванияПо РайтуПо ГимзеДругие
Позволяет дифференцировать гемопоэтические клетки по особенностям их окрашивания
ОКРАШИВАНИЕ УГЛЕВОДОВ
Реактив Шиффа (ШИК-реакция или PAS-реакция)
Идентифицирует полисахариды, нейтральные муцины, базальные мембраныЯрко-розовое окрашивание
ШИК-реакция с диастазой
Может использоваться для демонстрации гликогенаЯрко-розовое окрашивание
Диастаза ферментирует гликоген, обусловливая исчезновение окрашивания
Гематоксилин |
Муцикармин |
и эозин |
|
(Слева) Окрашивание гематоксилином и эозином — стандартное окрашивание, используемое в повседневной практике. Гематоксилин окрашивает ядра в темно-синий/фиолетовый цвет, а эозин окрашивает цитоплазму в розовый цвет.
(Справа) Окраска муцикармином (иногда называемая окраской на муцин) выявляет кислые муцины, которые окрашиваются в ярко-розовый цвет 
, как, например, в бокаловидных клетках эпителия тонкой кишки. Другие муцины и фоновые ткани окрашиваются в желтый цвет
|
|
38 |
Раздел 1. Введение в гистологию и основные методы гистологической техники |
|
|
Муцикармин
Идентифицирует кислые муцины (обычно в эпителии)Ярко-розовое окрашивание
Обычно добавляется желтое контрастирующее окрашивание
Альциановый синий (рН 2,5)
Идентифицирует кислые мукополисахариды, включая сульфатированные и карбоксилированные кислые мукополисахариды, а также сульфатированные и карбоксилированные сиаломуциныОкрашивание от ярко-синего до сине-зеленого
Альциановый синий (рН 1,0)
Идентифицирует сульфатированные муциныОкрашивание от ярко-синего до сине-зеленого
Альциановый синий с гиалуронидазой
Дифференцирует муцины эпителия и соединительной тканиСоединительная ткань богата гиалуроновой кислотой
Кислые мукополисахариды и сиаломуцины окрашиваются втемно-синий цвет
Вещества, содержащие гиалуроновую кислоту и хондроитинсульфаты А и С, теряют окрашивание при обработке гиалуронидазой
Альциановый синий с реактивом Шиффа
Позволяет различать нейтральные и кислые муциныКислые слизистые субстанции окрашиваются в синий
цветНейтральные полисахариды окрашиваются в пурпур-
ный цвет
Коллоидное железо
Идентифицирует карбоксилированные и сульфатированные мукополисахариды и гликопротеиныОкрашивает их в темно-синий цвет
МЕТОДЫ ОКРАШИВАНИЯ СОЕДИНИТЕЛЬНОЙ ТКАНИ
Трихромовый метод по Массону
Позволяет дифференцировать коллаген/соединительную ткань и мышцыКоллаген и соединительная ткань окрашиваются в цвета
от синего до сине-зеленогоМышцы окрашиваются в красный цвет
Также окрашивает ядра клеток в черный цвет
Окрашивание на эластин
Выявляет эластические волокнаОкрашивает их в черный или темно-фиолетовый цвет
в зависимости от способа окрашиванияСодержатся в соединительных тканях, коже, легких/
плевре, артериях, венах, эластических хрящах
Пентахромная окраска по Мовату
Выявляет 5 типов тканейКоллаген окрашивается в желтый цвет
Мышцы окрашиваются в красный цветЭластические волокна окрашиваются в черный цветМуцины окрашиваются в синий цветФибрин окрашивается в интенсивно красный цвет
Обычно используется при окраске соединительных тканей, сердца, кровеносных сосудов
Окрашивание ретикулиновых волокон
Выявляет ретикулиновые волокнаОкрашивает их в черный цвет
Выявляются в соединительных тканях печени, костного мозга, лимфоретикулярных органах
МЕТОДЫ ОКРАШИВАНИЯ МЫШЦ
Фосфорно-вольфрамовая кислота и гематоксилин
Выявляет поперечную исчерченность мышц, фибрин и глиальные волокнаГолубое окрашивание
Также окрашивает эластические волокна в фиолетовый цвет, а соединительную ткань — в цвет от оранжеворозового до коричнево-красного
МЕТОДЫ ОКРАШИВАНИЯ ЖИРОВОЙ ТКАНИ
Масляный красный О [Oil Red O в значительной степени заменил Sudan III и Sudan IV, поскольку он обеспечивает более глубокий красный цвет. — Прим. ред.]
Выявляет нейтральные липидыКрасное окрашивание
Используется на криостатных срезах
Судан черный В
Выявляет нейтральные липидыЧерное окрашивание
Используется на срезах замороженных тканей
МЕТОДЫ ОКРАШИВАНИЯ НЕРВОВ
Нитрат серебра
Выявляет нервные волокна и нейрофибриллыОкрашивает в черный цвет
Фосфорно-вольфрамовая кислота и гематоксилин по Мэллори
Выявляет глиальные нити, нейроны и миелинГлиальные нити окрашиваются в синий цветНейроны окрашиваются в оранжево-розовый цветМиелин окрашивается в синий цвет
По Кахалю
Выявляет астроцитыЧерное окрашивание
|
|
Гистохимия (специальные окраски) |
39 |
|
|
Окраска реактивом Шиффа |
Окраска реактивом Шиффа |
(ШИК-реакция) |
с обработкой диастазой |
(Слева) Окрашивание реактивом Шиффа используют для выявления различных веществ — отнейтральных муцинов до нейтральных полисахаридов (гликогена). На этом изображении продемонстрировано окрашивание внутрицитоплазматического гликогена (ярко-розовый цвет) в нормальной ткани печени.
(Справа) Предварительная обработка срезов ткани диастазой вызывает переваривание гликогена, устраняя ярко-розовое окрашивание, создаваемое реактивом Шиффа в тканях, которые в норме содержат этот полисахарид
Окраска эпителия слизистых оболочек |
Окраска |
реактивом Шиффа |
альциановым синим |
(Слева) Окрашивание реактивом Шиффа выявляет нейтральные муцины, например, в фовеолярном эпителии желудка (изображено на микрофотографии). Окрашивание ярко-розовое. (Справа) Альциановый синий выявляет кислые мукополисахариды и сульфатированные муцины, окрашивая их в синий/зеленый цвета, что продемонстрировано на срезе нормальной кишки
Окраска альциановым синим |
Окраска трихромом |
и реактивом Шиффа |
по методу Массона |
(Слева) Комбинированное окрашивание альциановым синим и реактивом Шиффа может быть использовано для отличия кислых муцинов (синий/зеленый цвет) 
от нейтральных (ярко-розовый цвет).
(Справа) Окрашивание трихромовым методом позволяет отличить соединительную ткань и коллаген от мышечной ткани. Соединительная ткань окрашивается в цвета от синего до си- не-зеленого, в то время как мышечная ткань
(равно как и паренхима 
) окрашивается в красный либо розовый цвета
|
|
40 |
Раздел 1. Введение в гистологию и основные методы гистологической техники |
|
|
Окрашивание |
Окрашивание плевры |
на эластин |
на эластин |
(Слева) Как следует из названия, окрашивание на эластин выявляет эластические волокна, которые кажутся черными или темно-фиолетовыми, в зависимости от использованного метода гистохимического окрашивания. Эти волокна часто встречаются всоединительной ткани.
(Справа) Окрашивание на эластин может быть использовано для идентификации эластических пластинок 
, которые отделяют висцеральную плевру от периферических отделов паренхимы легких. Нарушение целостности этой структуры возможно при некоторых опухолях легких
Окрашивание |
Окрашивание |
ретикулиновых волокон |
берлинской лазурью |
(Слева) Представлен пример окрашивания ретикулиновых волокон нормальной печени. Волокна окрашены в черный цвет. Ретикулиновые волокна также могут быть выявлены в костном мозге и органах лимфоретикулярной системы.
(Справа) Окрашивание берлинской лазурью выявляет трехвалентное железо (на представленной микрофотографии — гемосидерин в ткани печени). Гранулы гемосидерина, содержащие железо, имеют вид маленьких синих гранул. В зависимости от ткани содержание железа может быть обильным либо скудным
Окрашивание роданином |
Окрашивание |
(на медь) |
по Джонсу |
(Слева) Окрашивание роданином (часто называемое окрашиванием на медь) выделяет накопление меди в цитоплазме. Эти отложения имеют характерный ржаво-коричневый цвет 
. (Справа) Окрашивание метенамином серебра по Джонсу выделяет базальную мембрану клубочков, которая приобретает черный цвет 