Полезные материалы за все 6 курсов / Учебники, методички, pdf / Гистология_для_патологанатомов_М_Л_Линдберг_2022_г_

Легкие

В норме в базальных мембранах отсутствует значимое содержание иммуноглобулинов или компонентов системы комплементаВыраженное накопление легких κ- и λ-цепей, проявля-

ющееся линейным окрашиванием базальных мембран, наблюдается при поражении легких и почек антителами к коллагену IV типа базальных мембран при синдроме Гудпасчера

ДОПОЛНИТЕЛЬНАЯ ЛИТЕРАТУРА

1.Haas M. Alport syndrome and thin glomerular basement membrane nephropathy: a practical approach to diagnosis. Arch Pathol Lab Med. 2009; 133(2): 224–32.

2.Wagrowska-Danilewicz M. et al. Immunofluorescence on paraffinembedded sections in evaluation of immune complex deposits in renal biopsy specimens. Pol J Pathol. 2009; 60(1): 3–9.

3.van der Ven K. et al. Immunofluorescence on proteinase XXIVdigested paraffin sections. Kidney Int. 2007; 72(7): 896.

4.Nasr S.H. et al. Immunofluorescence on pronase-digested paraffin sections: a valuable salvage technique for renal biopsies. Kidney Int. 2006; 70(12): 2148–51.

Аллотрансплантат

Отложения C4d в капиллярах указывает на антителоопосредованное отторжение трансплантата

Обычно содержание C4d исследуют в аллотрансплантатах сердца и почек

Интерстициальное накопление C4d в аллотрансплантатах сердца неспецифична

C4d в базальной мембране атрофированных почечных канальцев неспецифична и может имитировать перитубулярные капилляры

5.Zhou W. et al. Intrarenal synthesis of complement. Kidney Int. 2001; 59(4): 1227–35.

6.Fogazzi G.B. et al. Comparison of immunofluorescent findings in kidney after snap-freezing and formalin fixation. Pathol Res Pract. 1989; 185(2): 225–30.

7.Miura M. et al. Evaluation of the staining findings of immunofluorescence in unfixed or fixed renal biopsy specimens from patients with IgA nephropathy and membranous nephropathy. Acta Pathol Jpn. 1985; 35(2): 315–21.

8.Qualman S.J. et al. Immunofluorescence of deparaffinized, trypsintreated renal tissues. Preservation of antigens as an adjunct to diagnosis of disease. Lab Invest. 1979; 41(6): 483–9.

Электронная микроскопия

Anthony Chang, Peter Pytel, Jerome B. Taxy

ТЕРМИНОЛОГИЯ

Аббревиатуры

Электронная микроскопия (ЭМ)

Определение

Трансмиссивная ЭМРазрешающая способность — 0,2 нм (для сравнения

светооптическая микроскопия — 200 нм)

Имеет клиническое значение в определенных условияхСканирующая ЭМ

Электронный луч сканирует поверхность исследуемого образца, не проникая сквозь него

Обеспечивает 3D-изображение поверхностей и топографии

ОБРАБОТКА МАТЕРИАЛА

Обработка биологической ткани

Незамедлительная фиксация ткани

Фиксаторы

Карновского2,0% формальдегида и 2,5% глутарового альдегида

Фиксация ткани в течение не менее 2 чГлутаровый альдегид

Предохраняет белки от деградации, в том числе за счет образования межмолекулярных перекрестных связей

10 % забуференный формалинТкань не всегда изначально направляют на ЭМ после

макроскопического исследования

Ткань, фиксированную в формалине, впоследствии можно поместить в глутаровый альдегид или среду Карновского для последующей ЭМ

Фиксация ткани формалином и заливка парафином не обеспечивают должного сохранения тонких клеточных структур

Постфиксация

Тетраоксид осмияТяжелый металл, который реагирует с фосфолипида-

ми, увеличивая их электронную плотность, что необходимо для ЭМ-визуализации

Микроволновые методы

Существенно сокращают время обработки

ОБРАБОТКА ОБРАЗЦОВ

Среда для заливки

Метакрилат/акрилатЭпоксидная смола/ЭПОН

Нарезка блоков и окрашивание срезов

Срезы толщиной 1 мкм (или в половину этой толщины) изготавливаются из ткани, залитой пластикомСветовое микроскопическое исследование с последу-

ющим специальным окрашиваниемТолуидиновый синийМетиленовый синий

Тонкие срезы (толщиной ≈ 100 нм) помещаются на специальные сетки для окончательного электронно-микро- скопического исследованияБолее толстые срезы (> 100 нм) могут быть визу-

ализированы с помощью недавно разработанных методик ЭМ

Сетки окрашены уранилацетатом и цитратом свинца

Окрашивание антителами

Первичные или вторичные антитела, меченные электронноплотными частицами (например, золота) одинакового размера, позволяют выявлять интересующие исследователя антигены

ЭЛЕКТРОННО-МИКРОСКОПИЧЕСКАЯ ОЦЕНКА ОБРАЗЦОВ КЛИНИЧЕСКОГО МАТЕРИАЛА

Почки

Базальная мембрана почечных клубочков

Состоит из наружной пластинки (lamina rara externa — область между подоцитом и плотной пластинкой, lamina densa), собственно lamina densa и внутренней пластинки (lamina rara interna — область между lamina densa и эндотелиальной клеткой)

Нормальные значения для возраста 9 лет и старше: 264– 460 нмтолщина < 264 нм, согласно критериям ВОЗ, счита-

ется признаком болезни тонких базальных мембранПластинчатый или «плетеный» вид характерен для син-

дрома Альпорта (наследственный нефрит)Подоциты (висцеральные эпителиальные клетки)

Расположены на внешней стороне базальной мембраны клубочков

Интактные «ножки» подоцитовпотеря «ножек» подоцитов коррелирует с протеину-

риейОтсутствие включений или кристаллов

Кристаллы присутствуют при тубулопатии легких цепей (синдром Фанкони)

При болезни Фабри выявляются миелиновые тельцаЭндотелиальные клетки (фенестрированные)

Набухание цитоплазмы (эндотелиоз) при преэклампсииТубулоретикулярные включения

Наблюдаются при патологических состояниях, характеризующихся высоким уровнем интерферона, в частности, при системной красной волчанке и ВИЧ-инфекции

Матрикс мезангияУвеличение при диабетической нефропатии

Мезангиальные клеткиЭпителиальные клетки проксимальных канальцев

Щеточная кайма или микроворсинки на апикальной поверхностиУтрата или притупление концов при остром повреж-

дении канальцевБазолатеральные переплетения

Потеря при остром повреждении канальцевПеритубулярные капилляры

Многослойность базальной мембраны при хроническом антитело-опосредованном отторжении аллотрансплантата

Мышцы

Синцитиальные многоядерные мышечные волокна развиваются путем слияния одноядерных миобластов

Клеточная мембрана (сарколемма) окружена непрерывной базальной мембраной

Нейромышечное соединениеУльтраструктурные изменения при миастении и других

миастенических синдромахТ-трубочки

Трубчатые инвагинации сарколеммы, обеспечивающие равномерное распространение деполяризации по всем миофибриллам

Расположены между двумя слоями эндоплазматического ретикулума (саркоплазматического ретикулума) в виде «триады»

Триада обеспечивает электромеханическое соединениеРавномерное высвобождение кальция в ответ на де-

поляризацию вызывает сокращениеСаркомеры

Сократительные нити организованы в миофибриллыПоследовательно расположенные саркомеры; каж-

дый ≈1 мкм в диаметре и 2–3 мкм в длинуZ-диски закрепляют тонкие актиновые филаментыM-линия соответствует закреплению толстых миози-

новых филаментовДезорганизация саркомерных элементов возникает, на-

пример, при миопатии критических состояний или при немалиновой миопатии

ОрганеллыПериферические ядра под сарколеммой

Митохондрии, гликоген и другие органеллы между миофибрилламиУвеличение количества морфологически изменен-

ных митохондрий при митохондриальных заболеваниях

Патологические накопления гликогена или липидов при некоторых болезнях накопления

Включения эндотелиальных клеток в кровеносных сосудах между миофибриллами (тубулоретикулярные включения) при аутоиммунных заболеваниях, например, при дерматомиозите

Нервы

Аксоны, сгруппированные в пучкиПучки, окруженные периневральными клетками (длин-

ные тонкие отростки, непрерывная базальная мембрана и заметные пиноцитозные пузырьки)

Миелинизированные аксоны1 шванновская клетка миелинизирует одно междоузлие

(участок нервного волокна между соседними перехватами Ранвье) одного аксона

Толщина миелина пропорциональна диаметру аксонаНемиелинизированные аксоны1 шванновская клетка окружает сегменты нескольких

аксонов

Плотность аксонов снижается при аксональных болезняхИстончение миелиновой оболочки при демиелинизирую-

щем заболевании или регенерации аксонов

Слизистая носовых ходов и пазух

РесничкиНормальная структура микротрубочек 9 + 2

Отсутствие динеиновых ручек при синдроме Картагенера или первичной цилиарной дискинезии

Сердце

Токсическое действие адриамицина (доксорубицина)Набухание саркоплазматического ретикулума миоци-

товНарушение или потеря миофибрилл

Возможное очаговое поражение

Слизистая оболочка тонкой кишки

Неповрежденные микроворсинкиБолезнь цитоплазматических включений микроворсинок

ДОПОЛНИТЕЛЬНАЯ ЛИТЕРАТУРА

1.Haas M. Alport syndrome and thin glomerular basement membrane nephropathy: a practical approach to diagnosis. Arch Pathol Lab Med. 2009; 133(2): 224–232.

2.Sterling C. et al. Pathology of Skeletal Muscle. 2nd edition. Oxford University Press, 2001.

3.Haas M. A reevaluation of routine electron microscopy in the examination of native renal biopsies. J Am Soc Nephrol. 1997; 8(1):70–6.

Отсутствие апикальных микроворсинокНакопление секреторных гранул

Тафтинг-энтеропатия («пучковая» энтеропатия)Увеличение длины и количества десмосом между

эпителиальными клетками тонкой кишки

Опухоль

ЭМ позволяет выявить ультраструктурные особенности различных типов клеток, например:

Премеланосомы и меланосомы в меланоцитахТельца Вайбеля—Паладе в эндотелиальных клеткахГранулы Бирбека в клетках ЛангергансаНейроэндокринные гранулы в нейроэндокринных опу-

холяхФибриллярный фон при нейробластоме

Мышечные филаменты и вещество Z-дисков при рабдомиосаркоме

Для решения задач характеристики клеток электронная микроскопия в настоящее время в значительной степени вытеснена иммуногистохимией

4.Erlandson R.A. Diagnostic Transmission Electron Microscopy of Tumors Philadelphia: Lippincott, 1994.

5.Hayat M.A. Principles and Techniques of Electron Microscopy: Biological Applications. Vol 1. New York: Van Norstrand Rheinhold, 1975.

David Cassarino, Aaron Auerbach

ЭПИДЕРМИС

Макроскопическая характеристика

Тонкий, самый поверхностный слой кожиОбычно бело-серого или коричневого цвета

Цвет зависит от количества пигмента меланина в эпидермисе (этнические различия)

Толщина эпидермиса зависит от анатомической областиСамый тонкий эпидермис на веках, а самый толстый —

на ладонях и подошвах

Микроскопическое строение

Состоит из многослойного плоского эпителияРазличают несколько микроскопических уровней (начи-

ная от поверхности к глубине)Роговой слой

Наружный (поверхностный) слойСостоит из нескольких слоев безъядерных керати-

ноцитов, которые часто переплетаются (вид плетеной корзины)

Зернистый слой1–3 слоя уплощенных клеток, ориентированных па-

раллельно поверхности кожиЦитоплазматические гранулы базофильного кера-

тогиалинаШиповидный слой

5–10 слоев кератиноцитов с десмосомамиБазальный слой

Самый глубокий слой

Пролиферирующие кератиноциты и меланоциты, прикрепленные к базальной мембране гемидесмосомами

Базальная мембрана отделяет эпидермис от дермыСостоит из коллагенов и ламининов

Типы клетокКератиноциты

Основная клетка многослойного плоского эпителияЯдра округлой или овальной формыМежклеточные мостики (десмосомы)

ИГХ: CK5/6(+), p63(+)Меланоциты

Меланинпродуцирующие клетки с оптически пустой цитоплазмой

Ядра гиперхромные, округло-овальной формыИГХ: S100(+), HMB-45(+), Melan-A(+), тирозиназа

(+), MITF(+)Клетки Лангерганса

Внутриэпидермальные дендритические клетки с бобовидными ядрами

Обычно находятся в шиповидном слоеИГХ: CD1a(+), S100(+), лангерин (+)

Клетки МеркеляКлетки яйцевидной формы с нечеткими контурами,

находятся в базальном слоеСвязаны с нижележащими сенсорными нервными

окончаниями

ИГХ: CK20(+) (этот маркер необходим для гистологической визуализации)