Тема 7: "Энзимодиагностика и энзимотерапия. Клинико-диагностическое значение определения белкового спекра крови."

(Самостоятельная работа в аудиторное время)

1. Продолжительность занятия 180 мин. Место проведения - кафедра биохимии

2. Цель занятия: Научить студентов самостоятельной работе с литературой по предложенной теме посредством решения ситуационных задач.

3. Конкретные задачи:

1. Студент должен знать:

3.1.1. Строение и биологическую роль ферментов.

3.1.2. Значение ферментов и изоферментных спектров в диагностике

заболеваний.

3.1.3. Энзимотерапию.

3.1.4. Механизмы ингибирования ферментов.

3.1.5. Белки крови, их биологическую роль и использование в

диагностике заболеваний.

2. Студент должен уметь :

3.2.1. Анализировать, обобщать и излагать литературный материал.

3.2.2. Оценивать и интерпретировать данные биохимических

лабораторных исследований (активности ферментов и

протеинограммы) с целью использования их в диагностике

различных заболеваний.

4. Мотивация : Знания о ферментном и белковом спектрах крови в норме и их изменения при патологии необходимы врачу для практической работы.

5. Задание для самоподготовки :

Студенты должны повторить следующий материал:

1) Лекции и материалы практических занятий по темам: "Белки",

"Ферменты";

2) Разделы учебника - Березов Т.Т., Коровкин Б.Ф. "Биологическая

химия", М.: Медицина, 1998, с.163-168, 567-574, 577-580.

3) Биохимия. Учебник для ВУЗов. Под редакцией чл.-корр. РАН,

проф. Е.С. Северина. М. Из-во ГЭОТАР-МЕД, 2003, с. 106-135.

4). Дополнительный литературный материал выдается на занятии.

6. Вопросы для самоподготовки :

1. Белки плазмы крови, их роль в организме.

2. Гипер-, гипо- протеинемии. Причины развития.

Белковые фракции крови при электрофорезе. Характеристика

отдельных фракций (альбумины, глобулиновые фракции). Роль в

организме. Причины изменения содержания в крови.

3. Белки острой фазы.

4. Транспортные белки крови (альбумин, церулоплазмин, гаптоглобин,

трансферрин, гемопексин).

5. Характерные изменения протеинограмм при различных заболеваниях.

6. Понятие об индикаторных ферментах, их значение в диагностике

заболеваний.

7. Изоферменты. Использование изоферментных спектров в клинической

практике.

8. Тиоловые ферменты, тиоловые яды.

9. Энзимотерапия.

10. Понятие об иммобилизованных ферментах.

11. Ингибирование ферментов. Виды ингибирования.

12. Приведите примеры использования ингибиторов ферментов в

качестве лекарственных препаратов.

7. Этапы занятия и контроль их усвоения.

№	Этапы проведения занятия	Форма проведения	Время (мин)
7.1. 7.2. 7.3. 7.4. 7.5.	Постановка задачи. Самостоятельная работа с использованием дополнительной литературы. Обсуждение работы студентов. Контроль приобретенных знаний. Подведение итогов занятия.	Излагает преподаватель Подготовка студентами ответов на полученные ситуационные задачи Разбор задач Тестовый контроль Излагает преподаватель. Ответы на вопросы студентов.	10 60 90 10 10

Пример билета проверочного контроля - см. Билеты тестового контроля

Задача №1

Больной А жалуется на резкие опоясывающие боли в подложечной области. При исследовании ферментов крови оказалось, что активность амилазы равна 35 мг/с.л., липазы – 1600 нмоль/с.л.

Больной Б предъявляет те же жалобы, но активность амилазы в крови равна 2,3 мг/с.л., а липазы - 0 нмоль/с.л.

О патологии какого органа можно подумать в этих случаях? Чем объяснить различия в изменении активности амилазы и липазы крови у данных больных?

ЛИТЕРАТУРА: Березов Т.Т., Коровкин Б.Ф. Биологическая химия. М.: Мед. 1998г. – с.238-239, 286-287, 320, 366, 446-447, 579-580.

Задача №2

О каких заболеваниях может идти речь при наличии следующих ферментных спектров крови:

1) АЛТ > АСТ > ГлДГ> КФК > амилаза

2) КФК > АСТ >АЛТ > амилаза > ГлДГ

3) Амилаза > АЛТ > АСТ > ГлДГ > КФК

Объясните, почему спектры, характеризующие разные заболевания имеют сходный состав, но различную последовательность ферментов в указанных рядах?

ЛИТЕРАТУРА: Березов Т.Т., Коровкин Б.Ф. Биологическая химия. – М.: Мед. – 1998г.- с.320, 435, 439, 579-580.

Задача №3

Охарактеризуйте изоферментные спектры лактатдегидрогеназы (ЛДГ), аспартатаминотрансферазы (АСТ), креатинфосфокиназы (КФК) различных органов и тканей. Какое значение имеет определение изоферментных спектров крови для дифференциальной диагностики заболеваний различных органов?

ЛИТЕРАТУРА: Березов Т.Т., Коровкин Б.Ф. Биологическая химия. – М.: Мед. – 1998г. с.126-129, 439, 579-580, 654.

Задача №4

У рабочего полиграфического производства, имеющего контакт со свинцом, при поступлении на работу были следующие показатели актив-ности ферментов крови: глюкозо-6-фосфатдегидрогеназы – 2850 ед/л эри- троцитов, лактатдегидрогеназы – 3000 ед/л эритроцитов. Через 4 года во время ежегодного медицинского осмотра у него оказались следующие по- казатели активности ферментов крови: глюкозо-6-фосфатдегидрогеназы – 2090 ед/л эритроцитов, лактатдегидрогеназы – 2500 ед/л эритроцитов.

Каковы особенности строения дегидрогеназ? Каковы возможные механизмы интоксикации на данном производстве? Какие вещества явля-ются ингибиторами дегидрогеназ? Оцените состояние рабочего и сделайте вывод о том, может ли он продолжать работу на данном производстве?

ЛИТЕРАТУРА: Березов Т.Т., Коровкин Б.Ф. Биологическая химия. М., Мед. 1998. – с. 354-355. Учебно-методическое пособие к практическим занятиям по биологической химии, под ред. проф. В.А.Дадали, Р.Н.Павловой, СПб 2009, стр. 83

Задача №5

Для диагностики инфаркта миокарда (ИМ) большое значение имеет время появления кардиомаркеров в сыворотке крови и время их выведения. Дайте характеристику маркерам, используемым в диагностике ИМ и нарисуйте график динамики присутствия кардиомаркеров в сыворотке крови при ИМ. Сравните результаты биохимического исследования трех больных, выберите соответствующий диагноз и обоснуйте Ваш выбор : 1) инфаркт миокарда, 2) миозит, 3) стенокардия, 4) вероятность инфаркта исключить нельзя.

Литература: Биохимия. Учебник для ВУЗов. Под редакцией чл.-корр. РАН, проф. Е.С. Северина. М. Из-во ГЭОТАР-МЕД, 2003, с. 119-123.

Пациент	Результаты анализа крови	Время после приступа болей
1	Миоглобин - ­, тропо- нины Т и I – норма, КК – норма, АСТ и ЛДГ - норма	2 часа
2	Миоглобин – норма, тропонины Т и I - ­ , КК – норма, АСТ - ­, ЛДГ - ­­	3 дня
3	Миоглобин - ­, тропонины Т и I - ­, КК - ­, АСТ - ­, ЛДГ – чуть выше нормы	14 часов

Задача №6

В случаях тромбоэмболии легочной и периферических артерий, сосудов мозга, непроходимости центральной артерии сетчатки глаза, остром инфаркте миокарда показаны препараты: стрептазы (стрептокиназы), стрептодеказы, фибринолизина. Какова природа и механизм действия данных лекарственных препаратов. Что такое иммобилизованные ферменты?

ЛИТЕРАТУРА: Николаев А.Ф. Биол.химия.М.: Высш.шк., 1989.- С.92, 446.

Березов Т.Т., Коровкин А.Ф. Биол.химия. – М.: Мед. – 1998. – С.167-168, 163-164.

Задача №7

Объясните лечебный эффект парааминометилбензойной кислоты (ПАМБА), контрикала и диакарба. Используя материалы занятий по теме «Витамины», «Ферменты» расскажите о механизме действия ряда сульфаниламидных препаратов. Какой тип ингибирования лежит в основе их действия.

ЛИТЕРАТУРА: Березов Т.Т., Коровкин – Биол.химия. – М.: Мед. – 1998. – С.149-150, 607, 614.

Николаев А.Я. Биол.химия.М.:Высш.шк. – 1989. – с.446.

Задача №8

Какую ферментотерапию можно рекомендовать в случаях воспали- тельных заболеваний дыхательных путей (трахеит, бронхит, пневмония и др.) с целью облегчения удаления вязких экссудатов и мокроты. Какие ферменты используются при лечении гнойных ран, ожогов, трофических язв. Чем объясняется действие данных препаратов. Какой еще вариант замести-тельной терапии можно предложить для ряда протеолитических ферментов.

ЛИТЕРАТУРА: Березов Т.Т., Коровкин Б.Ф. Биол.химия. – М.: Мед. – 1998г. – С.167-168, 419-421.

Николаев А.Я. Биол.химия М.: Высш.шк. 1989.- с.92.

Задача №9

При анализе протеинограммы больного с жалобами на недомогание, слабость, боли в области сердца и отдельных суставах, температура 37,8° в течение недели, установлено следующее распределение белковых фракций: альбумины – 43%, a₁-глобулины - 8,3%, a₂-глобулины - 12,5% ,

b-глобулины - 14,2%, g-глобулины - 22%. Общий белок крови - 70 г/л. Сопоставьте с нормой каждую фракцию. О каком типе патологических изменений в организме можно думать? Чем объяснить отклонения в белковых фракциях? Что такое белки острой фазы, их диагностическое значение?

ЛИТЕРАТУРА: Березов Т.Т., Коровкин Б.Ф. Биол.химия. - М.:Мед., – 1998.- С.579-580,615.

Задача №10

При анализе протеинограммы рабочего, длительно контактирующего с четыреххлористым углеродом (СС1₄), установлено следующее распределение белковых фракций: альбумины - 43%, a₁-глобулины - 4,9%, a₂ -глобулины - 10,1%, b-глобулины - 17,3%, g-глобулины - 24,9%. Общий белок крови - 59г/л.

При патологии какого органа наиболее часто встречается такое распределение белковых фракций? Как можно объяснить изменения в содержании белковых фракций? Какие ферменты плазмы крови необходимо исследовать для подтверждения диагноза? Расскажите о транспортных белках плазмы крови. Альбумины, их функции в организме, место синтеза.

ЛИТЕРАТУРА: Березов Т.Т., Коровкин Б.Ф. Биол.химия. - М.:Мед., – 1998.- С.579-580,615.

Задача №11

У больного в крови повышена активность двух изоферментов лактатдегидрогеназы (ЛДГ-1, ЛДГ-2), появилась трансамидиназа. Общий белок крови - 56 г/л. Отношение альбуминов к глобулинам равняется 0,9. Протеинограмма плазмы крови больного: альбумины - 45%, a₁-глобулины - 5%, a₂-глобулины - 25%, b-глобулины - 15%, g-глобулины - 10%. В моче больного также появилась трансамидиназа, выявлена протеинурия. О патологии какого органа следует думать в данном случае? Почему наблюдается такое распределение белковых фракций ?

ЛИТЕРАТУРА: Березов Т.Т., Коровкин Б.Ф. Биол.химия. - М.:Мед., – 1998.- С.579-580,615.

Задача №12

При анализе протеинограммы больного с жалобами на кашель с обильным отделением мокроты, некоторые признаки одышки, периодически повторяющиеся пневмонии в течение последних 5 лет, установлено следующее распределение белковых фракций: альбумины – 41%, a₁-глобулины - 5,5%, a₂-глобулины - 15,4%, b-глобулины - 8,9%, g-глобулины - 29,2%. Общий белок крови в норме. Для какого типа пато- логического состояния характерна данная протеинограмма? Чем можно объяснить изменения в составе белковых фракций? Расскажите о g-гло- булиновой фракции. Какие белки входят в ее состав, их роль в организме. Что такое парапротеины?

ЛИТЕРАТУРА: Березов Т.Т., Коровкин Б.Ф. Биол.химия. – М.: Мед. – 1998. – с.571-572.

Тестовый контроль по теме: “"Энзимодиагностика и энзимотерапия. Клинико-диагностическое значение определения белкового спекра крови."

Тест 1.

УСТАНОВИТЕ СТРОГОЕ СООТВЕТСТВИЕ

Функции Белки крови

1) белок, транспортирующий билирубин а) С-реактивный белок

2) белок, транспортирующий медь б) церулоплазмин

3) белок, транспортирующий железо в) гаптоглобин

4) белок, переносящий гемоглобин при г) трансферрин

гемолизе эритроцитов д) альбумин

Тест 2.

ВЫБЕРИТЕ ПРАВИЛЬНЫЙ ОТВЕТ.

Действие фосфорорганических соединений, входящих в состав гербицидов, пестицидов и т.п. приводит к:

а) ингибированию тиоловых ферментов

б) обратимому ингибированию холинэстеразы, ацетилхолинэстеразы

в) необратимому ингибированию холинэстеразы, ацетилхолинэстеразы

г) активации тиоловых ферментов

д) активации холинэстеразы, ацетилхолинэстеразы

Тест 3.

ВЫБЕРИТЕ ПРАВИЛЬНЫЙ ОТВЕТ

Диагностически значимым при инфаркте миокарда является изменение изоферментного спектра крови:

а) ЛДГ₃, КФК - МВ

б) ЛДГ_4,5, КФК – МВ

в) ЛДГ_1,2, КФК – ВВ

г) ЛДГ₅, КФК – МВ

д) ЛДГ_1,2, КФК – МВ

Тест 4.

ВЫБЕРИТЕ ВСЕ ПРАВИЛЬНЫЕ ОТВЕТЫ.

Тиоловые ферменты:

а) содержат SH группы в активном центре

б) снижают активность при действии Hg²⁺

в) активируются Hg²⁺

г) активируются Н₂О₂

д) это дегидрогеназы

Тест 5.

ВЫБЕРИТЕ ПРАВИЛЬНЫЙ ОТВЕТ

Острый панкреатит сопровождается ростом активности амилазы в крови в результате:

а) перехода неактивной формы фермента в активную

б) усиленного синтеза фермента клетками поджелудочной железы

в) образования мультиферментных комплексов

г) изменения проницаемости клеточных мембран и выхода фермента в кровь

д) компенсаторной выработки фермента другими органами

Тест 6.

ВЫБЕРИТЕ ВСЕ ПРАВИЛЬНЫЕ ОТВЕТЫ

Снижение активности холинэстеразы сыворотки крови наблюдается при:

а) обратимом ингибировании фермента карбофосом

б) необратимом ингибировании фермента карбофосом

в) действии ионов Са²⁺

г) нарушении белково-синтетической функции печени

д) распаде гепатоцитов в ходе цитолиза

Тест 7.

ВЫБЕРИТЕ ВСЕ ПРАВИЛЬНЫЕ ОТВЕТЫ

Гипопротеинемия имеет место при:

а) заболевании почек

б) беременности

в) голодании

г) хронических поражениях печени

д) обезвоживании организма

Тест 8.

ВЫБЕРИТЕ ВСЕ ПРАВИЛЬНЫЕ ОТВЕТЫ

Гиперпротеинемия имеет место при:

а) заболеваниях почек

б) острых инфекционных заболеваниях

в) голодании

г) хронических поражениях печени

д) обезвоживании организма

Тест 9.

ВЫБЕРИТЕ ВСЕ ПРАВИЛЬНЫЕ ОТВЕТЫ

Снижение содержания альбуминов в плазме крови возможно при:

а) заболевании печени

б) потере жидкости

в) заболевании почек

г) голодании

д) интоксикации

Тест 10.

ВЫБЕРИТЕ ПРАВИЛЬНЫЙ ОТВЕТ.

Диспротеинемия : альбумины - снижены; глобулины - α₁- повышены, a₂ – повышены незначительно, b и g- в норме - соответствует:

а) хроническому гепатиту

б) нарушению почечной фильтрации

в) острому воспалительному процессу

г) хроническому воспалительному процессу

д) хроническому гастриту

Тест 11.

ВЫБЕРИТЕ ПРАВИЛЬНЫЙ ОТВЕТ

Хроническому воспалительному процессу соответствует следующее изменение распределения белковых фракций крови на протеинограмме:

а) a₁-глобулины значительно повышены

б) альбумины снижены, все фракции глобулинов в норме

в) a₁-глобулины резко снижены

г) a₂ – и g-глобулиновые фракции повышены

д) альбумины и глобулины снижены

Тест 12.

ВЫБЕРИТЕ ПРАВИЛЬНЫЙ ОТВЕТ

Острый воспалительный процесс характеризуется следующим распределением белковых фракций крови при электрофорезе:

а) альбумины и глобулины снижены

б) a₁-глобулины значительно повышены

в) b-глобулины значительно повышены

г) значительно снижены альбумины, глобулины в норме

д) a₁-глобулины снижены

Тест 13.

ВЫБЕРИТЕ ПРАВИЛЬНЫЙ ОТВЕТ.

Амилаза является индикаторным ферментом:

а) печени

б) почек

в) поджелудочной железы

г) тонкого кишечника

д) слизистой желудка

Тест 14.

УСТАНОВИТЕ СТРОГОЕ СООТВЕТСТВИЕ

Ферментный спектр крови при Орган

патологии:

1) КФК > АСТ > АЛТ>амилаза а) поджелудочная железа

2) АЛТ > АСТ > амилаза>КФК б) печень

3) амилаза>АЛТ > АСТ > КФК в) миокард

4) трансамидиназа>ЛДГ₂ > АСТ г) почки

д) легкие

Тест 15.

УСТАНОВИТЕ СТРОГОЕ СООТВЕТСТВИЕ

Высокая активность ферментов крови: Орган

1) КФК – МВ; ЛДГ_1,2; АСТ а) печень

2) КФК – ММ; ЛДГ₅ б) сердце

3) ЛДГ₅, АЛТ, АСТ в) почки

4) ЛДГ_1,2, трансамидиназа г) мышцы

д) тонкий кишечник

Тест 16.

ВЫБЕРИТЕ ВСЕ ПРАВИЛЬНЫЕ ОТВЕТЫ.

Кардиомаркерами являются:

а) ХЭ (холинэстераза)

б) КФК (креатинфосфокиназа)

в) трансамидиназа

г) тропонины Т и I

д) миозин

Тест 17.

ДОПОЛНИТЕ ОТВЕТ.

Ранним, но неспецифическим маркером острого инфаркта миокарда является белок ______________.

Тест 18.

УСТАНОВИТЕ СООТВЕТСТВИЕ

(для каждого вопроса – один или несколько правильных ответов, каждый ответ может быть использован один раз).

Время появления /увеличения показателя в крови при остром инфаркте миокарда:	Показатели:
1) 2 час 2) 4-6 час 3) 8-12 час	а) тропонины Т и I б) миоглобин в) ЛДГ г) КФК (креатинфосфокиназа)

Тест 19.

УСТАНОВИТЕ СООТВЕТСТВИЕ (для каждого вопроса – один или несколько правильных ответов, ответ может быть использован один раз).

Группы ферментов сыворотки крови:	Ферменты:
1) индикаторные 2) секреторные 3) экскреторные	а) КФК (креатинфосфокиназа) б) АСТ в) холинэстераза г) α-амилаза (панкреатическая) д) ЛДГ

Тест 20.

ДОПОЛНИТЕ ОТВЕТ.

Наибольшая активность креатинфосфокиназы (КФК) представлена в клетках: 1.____________, 2. _____________, 3.______________.

Тест 21.

УСТАНОВИТЕ СООТВЕТСТВИЕ (для каждого вопроса - несколько правильных ответов).

Внутриклеточная локализация:	Ферменты:
1) митохондрии 2) цитоплазма	а) АлТ б) глутаматдегидрогеназа в) ЛДГ г) АсТ

Тест 22.

ДОПОЛНИТЕ ОТВЕТ.

Синтезируемые клетками ферменты, которые поступают в кровь, где выполняют специфические функции называются __________________. Примером является ______________, синтезируемая клетками печени.

Тест 23.

ДОПОЛНИТЕ ОТВЕТ.

Повреждение органа (цитолиз клеток) сопровождается повышением в крови активности ____________ ферментов.

Тест 24.

ВЫБЕРИТЕ ВСЕ ПРАВИЛЬНЫЕ ОТВЕТЫ.

Белками «острой фазы» сыворотки крови являются:

а) С-реактивный белок

б) α₁- антитрипсин

в) гаптоглобин

г) кератин

д) церулоплазмин

Тест 25.

ДОПОЛНИТЕ ОТВЕТ.

Альбумины синтезируются клетками _______________.

Тест 26.

ВЫБЕРИТЕ ВСЕ ПРАВИЛЬНЫЕ ОТВЕТЫ.

Транспортными белками сыворотки крови являются:

а) α₁-антитрипсин

б) трансферрин

в) иммуноглобулин М

г) церулоплазмин

д) альбумины

Тест 27.

ДОПОЛНИТЕ ОТВЕТ.

Иммуноглобулины делят на 5 классов Ig : __, __, ___, ___, ___.

Тест 28.

ВЫБЕРИТЕ ПРАВИЛЬНЫЙ ОТВЕТ.

Норма общего белка сыворотки крови:

а) 45 – 65 г/л

б) 65 – 85 г/л

в) 85 - 95 г/л

г) 50 – 70 г/л

д) 55 – 75 г/л

Тест 29.

ДОПОЛНИТЕ ОТВЕТ.

Транспорт Fe⁺³ в крови осуществляет белок __________________________.

Тест 30.

УСТАНОВИТЕ СТРОГОЕ СООТВЕТСТВИЕ.

Кардиомаркер:	Период возвращения кардиомаркера к норме при остром инфаркте миокарда:
1) креатинкиназа 2) миоглобин 3) тропонин I 4) тропонин T	а) 16 час б) 30 – 34 час в) 3 - 4 дня г) 5 – 7 дней д) 5 – 14 дней

ОТВЕТЫ ПО ТЕМЕ: «"Энзимодиагностика и энзимотерапия. Клинико-диагностическое значение определения белкового спекра крови."

Тест 1 – 1д, 2б, 3г, 4в. Тест 2 – в Тест 3 – д Тест 4 – а,б,д Тест 5 – г Тест 6 – б, г Тест 7 – а, б, в, г Тест 8 – д (б,д) Тест 9 – а, в, г, д Тест 10 – в Тест 11 – г Тест 12 – б Тест 13 – в Тест 14 – 1в, 2б, 3а, 4 г Тест 15 – 1б, 2г, 3а, 4в Тест 16. б, г

Тест 17. миоглобин Тест 18. 1б, 2аг, 3в Тест 19. 1абд, 2в, 3г Тест 20. мышц, сердца, нервной ткани Тест 21. 1бг, 2авг Тест 22. секреторными, холинэстераза Тест 23. индикаторных Тест 24. а, б, в, д Тест 25. печени Тест 26. б, г, д Тест 27. A, D, E, M, G Тест 28. б Тест 29. трансферрин Тест 30. 1в, 2б, 3г, 4д