Осадочные пробы на белок

Поскольку количественное исследование фракционного состава белков плазмы трудоемко и нуждается в сложной аппаратуре, его часто заменяют качественными диспротеинемическими тестами. Они основаны на разной чувствительности отдельных белков плазмы крови к действию осаждающих агентов.Такие тесты позволяют оценить тяжесть патологического состояния и эффективность лечения, проследить динамику заболевания.

Установлено, что положительный результат коллоидно-химических проб чаще вызывается количественными изменениями в глобулиновых фракциях или изменением соотношения альбумины/ глобулины, т.е. он связан с увеличением содержания глобулинов либо уменьшением уровня альбуминов.

К коагуляционным тестам относятся реакции с сульфатом кадмия и цинка, тимоловая проба, реакция Гросса с хлоридом ртути (сулемовая проба), реакция Вельтмана с хлоридом кальция.

Наиболее часто используется тимоловая проба. Она основана на определении степени помутнения с помощью ФЭКа при взаимодействии сыворотки с насыщенным раствором тимола в вероналовом буфере. Причиной помутнения является взаимодействие молекул тимола и некоторых крупнодисперстных белков: g-глобулинов и b - липопротеинов. Эта реакция связана с образованием глобулино-тимол-липидного комплекса. Норма: 0-4 ед. помутнения.

Тимоловая проба положительна в 90-100% случает болезни Боткина, токсического гепатита, а также у больных с постгепатитным и постнекротическим циррозом, коллагеновыми заболеваниями, малярией и вирусными инфекциями. При механической желтухе проба в 75% случаев отрицательна. Она становится положительной лишь в том случае, если процесс осложняется паренхиматозным гепатитом.

Тестовый контроль по теме

«Физико-химические свойства белков»

Тест 1.

Выберите правильный ответ:

Значение рН, при котором проводят электрофоретическое разделение

белков плазмы крови:

а) нейтральное

б) слабокислое

в) сильнокислое

г) слабощелочное

д) сильнощелочное

Тест 2.

Выберите правильный ответ:

Значение рН, при котором будет изоэлектрическая точка для белков крови:

а) нейтральное

б) слабокислое

в) сильнокислое

г) слабощелочное

д) сильнощелочное

Тест 3.

ВЫБЕРИТЕ ПРАВИЛЬНЫЙ ОТВЕТ:

Механизм осаждающего действия температуры 100°С:

а) изменение гидратации молекул белка

б) изменение ионизации групп (NH₂, COOH) при сдвигах рН среды

в) связывание функциональных групп белка (NH₂, NН, ОН, SН)

г) окислительно-восстановительное превращение HS-групп и S‑S связей

д) усиление колебательных движений отдельных фрагментов полипептидной

цепи, разрыв связей гидрофобных, водородных в молекуле белка

Тест 4.

ВЫБЕРИТЕ ПРАВИЛЬНЫЙ ОТВЕТ:

Механизм осаждающего действия раствора хлорида ртути:

а) изменение гидратации молекул белка

б) изменение ионизации групп (NH₂, COOH) при сдвигах рН среды

в) связывание функциональных групп белка (NH₂, NН, ОН, SН),

г) окислительно-восстановительное превращение HS-групп и S‑S связей

д) усиление колебательных движений отдельных фрагментов поли пептидной

цепи, разрыв связей гидрофобных, водородных в молекуле белка

Тест 5.

ВЫБЕРИТЕ ПРАВИЛЬНЫЙ ОТВЕТ:

Механизм осаждающего действия сернокислого аммония:

а) изменение гидратации молекул белка

б) изменение ионизации групп (NH₂, COOH) при сдвигах рН среды

в) связывание функциональных групп белка (NH₂, NН, ОН, SН)

г) окислительно-восстановительное превращение HS-групп и S‑S связей

д) усиление колебательных движений отдельных фрагментов полипептидной

цепи, разрыв связей гидрофобных, водородных в молекуле белка

Тест 6.

ВЫБЕРИТЕ ПРАВИЛЬНЫЙ ОТВЕТ:

Механизм осаждающего действия раствора перманганата калия (KMnO₄):

а) изменение гидратации молекул белка

б) изменение ионизации групп (NH₂, COOH) при сдвигах рН среды

в) связывание функциональных групп белка (NH₂, NН, ОН, SН)

г) окислительно-восстановительное превращение HS-групп и S‑S связей

д) усиление колебательных движений отдельных фрагментов полипептидной

цепи, разрыв связей гидрофобных, водородных в молекуле белка

Тест 7.

ВЫБЕРИТЕ ПРАВИЛЬНЫЙ ОТВЕТ:

Механизм осаждающего действия раствора хлористого натрия (NaCl):

а) изменение гидратации молекул белка

б) изменение ионизации групп (NH₂, COOH) при сдвигах рН среды

в) связывание функциональных групп белка (NH₂, NН, ОН, SН)

г) окислительно-восстановительное превращение HS-групп и S‑S связей

д) усиление колебательных движений отдельных фрагментов полипептидной

цепи, разрыв связей гидрофобных, водородных в молекуле белка

Тест 8.

ВЫБЕРИТЕ ПРАВИЛЬНЫЙ ОТВЕТ:

Механизм осаждающего действия ацетона:

а) изменение гидратации молекул белка

б) изменение ионизации групп (NH₂, COOH) при сдвигах рН среды

в) связывание функциональных групп белка (NH₂, NН, ОН, SН)

г) окислительно-восстановительное превращение HS-групп и S‑S связей

д) усиление колебательных движений отдельных фрагментов полипептидной

цепи, разрыв связей гидрофобных, водородных в молекуле белка

Тест 9.

ВЫБЕРИТЕ ПРАВИЛЬНЫЙ ОТВЕТ:

Механизм осаждающего действия сульфосалициловой кислоты:

а) изменение гидратации молекул белка

б) изменение ионизации групп (NH₂, COOH) при сдвигах рН среды

в) связывание функциональных групп белка (NH₂, NН, ОН, SН)

г) окислительно-восстановительное превращение HS-групп и S‑S связей

д) усиление колебательных движений отдельных фрагментов полипептидной

цепи, разрыв связей гидрофобных, водородных в молекуле белка

Тест 10.

ВЫБЕРИТЕ ПРАВИЛЬНЫЙ ОТВЕТ:

Механизм осаждающего действия сернокислого кадмия:

а) изменение гидратации молекул белка

б) изменение ионизации групп (NH₂, COOH) при сдвигах рН среды

в) связывание функциональных групп белка (NH₂, NН, ОН, SН)

г) окислительно-восстановительное превращение HS-групп и S‑S связей

д) усиление колебательных движений отдельных фрагментов полипептидной

цепи, разрыв связей гидрофобных, водородных в молекуле белка

Тест 11.

ВЫБЕРИТЕ ВСЕ ПРАВИЛЬНЫЕ ОТВЕТЫ:

Высаливание белков характеризуется тем, что:

а) разрушается третичная структура

б) белок теряет свои биологические свойства

в) структура белка не нарушается

г) разрушается гидратная оболочка белка

д) при добавлении воды осадок исчезает

Тест 12.

ВЫБЕРИТЕ ВСЕ ПРАВИЛЬНЫЕ ОТВЕТЫ:

Денатурация белков характеризуется тем, что:

а) разрушается третичная структура

б) белок теряет свои биологические свойства

в) структура белка не нарушается

г) разрушается гидратная оболочка белка

д) при добавлении воды осадок исчезает

Тест 13.

ВЫБЕРИТЕ ВСЕ ПРАВИЛЬНЫЕ ОТВЕТЫ:

Свойствами коллоидных растворов, характерными для растворов белка,

являются:

а) высокая вязкость

б) при стоянии выпадают в осадок

в) эффект Тиндаля

г) низкое онкотическое давление

д) способность к диализу

Тест 14.

ВЫБЕРИТЕ ПРАВИЛЬНЫЙ ОТВЕТ:

Методы очистки белковых растворов от низкомолекулярных примесей:

а) диализ

б) фракционное высаливание

в) электрофорез

г) гель-фильтрация

д) ультрацентрифугирование

Тест 15.

ВЫБЕРИТЕ ПРАВИЛЬНЫЙ ОТВЕТ:

Белки, находящиеся в изоэлектрической точке:

а) подвижны в электрическом поле

б) обладают наименьшей растворимостью

в) не перемещаются в электрическом поле

г) имеют наибольший заряд

д) имеют заряд равный нулю

Тест 16.

ВЫБЕРИТЕ ВСЕ ПРАВИЛЬНЫЕ ОТВЕТЫ:

Гель-фильтрация основана на различие белков в:

а) молекулярном весе

б) заряде

в) размере частиц

г) изоэлектрической точке

д) размере гидратной оболочки

Тест 17.

ВЫБЕРИТЕ ВСЕ ПРАВИЛЬНЫЕ ОТВЕТЫ:

Заряд белка зависит от:

а) температуры среды

б) рН среды

в) наличия и величины гидратной оболочки

г) соотношения NH₂- и COOH-групп

д) вида третичной структуры

Тест 18.

ВЫБЕРИТЕ ВСЕ ПРАВИЛЬНЫЕ ОТВЕТЫ:

Методами разделения белков, основанными на различии в заряде,

являются:

а) ультрацентрифугирование

б) электрофорез

в) гель-фильтрация

г) аффинная хроматография

д) ионообменная хроматография

Тест 19.

ВЫБЕРИТЕ ВСЕ ПРАВИЛЬНЫЕ ОТВЕТЫ:

Факторы, вызывающие денатурацию белков:

а) ацетон

б) соляная кислота

в) хлорид натрия

г) ацетат свинца

д) хлорид кальция

Тест 20.

ДОПОЛНИТЕ:

При денатурации разрушаются ________ , _________ , _________ структуры

белка.

Тест 21.

ДОПОЛНИТЕ:

Способность веществ проходить через полупроницаемую мембрану

называется ________ .

Тест 22.

ДОПОЛНИТЕ:

Необратимое выпадение белка в осадок называется ____________ .

Тест 23.

ДОПОЛНИТЕ:

Первыми из альбуминов и глобулинов крови при фракционном высаливании выпадают в осадок _______ .

Тест 24.

ДОПОЛНИТЕ:

Значение рН, при котором суммарный заряд белка равен нулю, называется

_________ ________ .

Тест 25.

ДОПОЛНИТЕ:

Белки по соотношению функциональных групп делятся на _________ ,

_________ , _________ .

Тест 26.

ДОПОЛНИТЕ:

Альбумины по соотношению амино- и карбоксильных групп относятся к

_______________ белкам.

Тест 27.

ДОПОЛНИТЕ:

Метод разделения белков, основанный на избирательном взаимодействии

их с лигандами, называется __________ __________ .

Тест 28.

ДОПОЛНИТЕ:

Нейтральный белок при электрофорезе при рН ниже изоэлектрической

точки будет двигаться к ________________ электроду.

Тест 29.

ДОПОЛНИТЕ:

Кислый белок при электрофорезе при рН=8,6 будет двигаться к

_____________ электроду.

Тест 30.

ДОПОЛНИТЕ:

Основной белок при электрофорезе при рН=7,0 будет двигаться к

_____________ электроду.

ОТВЕТЫ по теме: "ФИЗИКО‑ХИМИЧЕСКИЕ СВОЙСТВА БЕЛКА"

1 – г 2 – б 3 – д 4 – в 5 – а 6 – г 7 – а 8 – а 9 – б 10 – в 11. в, г, д 12. а, б 13. а, в 14. а 15. б, в, д

16. а. в 17. б, г 18. б, д 19. б, г 20. вторичная, третичная, четвертичная 21. диализ 22. денатурация 23. глобулины 24. изоэлектрическая точка 25кислые, основные, нейтральные 26. кислым 27. аффинная хроматография 28. отрицательному 29. положительному 30. отрицательному