- •Введение
- •Тема 1: Строение и свойства аминокислот. Методы исследования аминокислот.
- •7. Этапы занятия и контроль их усвоения
- •Тема 2: Структурная организация белковых молекул. Методы количественного определения белка.
- •7. Этапы занятия и контроль их усвоения
- •Количественные методы определения белков
- •Лабораторная работа №2
- •Основные понятия фотоколориметрии
- •Устройство и принцип работы фотоэлектроколориметра
- •Тестовый контроль по теме « Строение белковой молекулы»
- •Тема 3 Физико-химические свойства растворов белков. Диализ. Осадочные реакции. Разделение смеси белков методом электрофореза.
- •2. Цель занятия:
- •3. Конкретные задачи:
- •5. Задание для самоподготовки:
- •Практическое применение осадочных реакций
- •Лабораторная работа № 3
- •Реактивы и оборудование
- •II.Диализ
- •III. Фракционное высаливание белков. Разделение альбуминов и глобулинов
- •Iy.Электрофорез
- •Осадочные пробы на белок
- •Тема 4: "Изучение свойств и биологической роли витаминов водорастворимой группы. Методы исследования свойств витаминов и количественного определения витамина с.
- •6. Вопросы для самоподготовки:
- •Лабораторная работа № 4 Количественное определение витамина с (аскорбиновой кислоты) в пищевых продуктах и в моче по методу Тильманса
- •Определение содержания витамина «с» в хвое и свежей капусте.
- •Определение содержания витамина «с» в сыром и вареном картофеле и в квашеной капусте.
- •Содержание витамина «с» в различных продуктах и моче
- •Тестовый контроль по теме « Витамины»
- •Установите строгое соответствие
- •3. Конкретные задачи.
- •4. Мотивация.
- •6. Вопросы для самоподготовки:
- •Специфичность действия ферментов
- •Тема 6: "Активация и ингибирование ферментов.
- •3. Конкретные задачи.
- •Лабораторная работа №6 Количественное определение активности сывороточной холинэстеразы. Изучение ингибирующего действия карбофоса и активирующего действия ионов кальция.
- •Клиническое значение определения активности сывороточной хэ.
- •Количественное определение активности тканевых дегидрогеназ и изучение действия их ингибиторов
- •Применение метода в санитарно-гигиенических исследованиях
- •Количественное определение активности дегидрогеназы янтарной кислоты (сукцинатдегидрогеназы, к. Ф. 1.3.99.1) тетразолиевым методом
- •Определение общей активности лактатдегидрогеназы (к.Ф. 1.1.1.27) и ее изоферментов.
- •Клиническое значение определения активности лактатдегидрогеназы.
- •Методы определения активности ферментов
- •Тест 12
- •Тест 13
- •Тест 14
- •Тест 15
- •Тема 7: "Энзимодиагностика и энзимотерапия. Клинико-диагностическое значение определения белкового спекра крови."
- •Тема 8 Программа контрольной работы по теме «Химия белков и ферментов. Витамины».
- •195067, Санкт-Петербург, Пискаревский пр.,д. 47
- •394019, Г. Воронеж, ул. Еремеева, 22ж
Практическое применение осадочных реакций
Характер Осаждения |
Факторы |
Применение в гигиенической и лечебной практике |
Денатура ция |
Температура 70-80 град. |
Пастеризация пищевых продуктов, бактериологических питательных сред, лекарственных препаратов. |
|
Температура 100 град. |
Кулинария, термическая обработка воды и пищи. Дезинфекция и дезинсекция одежды и белья. |
|
Соли тяжелых металлов (Hg, Ag, Cd, Pb, Cu) |
Дератизация. Удаление доброкачественных кожных новообразований |
|
Окислители (например Н2О2 KMnO4, спиртовый раствор йода) |
Антисептика, обработка инструментов и кожи |
|
Сильные минеральные и органические кислоты |
Осаждение белка из биологических жидкостей при биохимических анализах. Качественные пробы на белок и количественное определение белка ( в моче) |
|
УФ-радиация |
Дезинфекция воздуха в операционных и палатах |
Высали вание |
Соли аммония и щелочных металлов |
Приготовление кристаллических белковых препаратов. Разделение белковых фракций. |
Лабораторная работа № 3
Обратимое и необратимое осаждение белка. Фракционное разделение белков. Диализ. Электрофорез.
Реактивы и оборудование
1. Штативы для пробирок. 2. Водяная баня.3. Диализатор стеклянный с целлофановой мембраной. 4. Химические пробирки.5. Стеклянные воронки. 6. Раствор яичного белка.7.Раствор сульфата меди-II- 5%. 8. Раствор гидроксида натрия – 10%. 9. Раствор ацетата свинца-II – 5%. 10. Раствор сульфосалициловой кислоты - 20%. 11. Азотная кислота концентрированная. 12. Раствор сульфата аммония -5 0% 13. Сульфат аммония кристаллический. 14. Раствор нитрата серебра 1%.
Обратимое и необратимое осаждение белков (высаливание и денатурация)
Ход работы : берут штатив с 5 пробирками и в каждую отмеривают по 5 капель раствора яичного белка. Первую пробирку помещают на 2-3 мин. в кипящую водяную баню. Во вторую пробирку добавляют по каплям (5-6 капель) соль тяжелого металла (ацетата свинца). В третью пробирку раствор азотной кислоты. В четвертую – раствор сульфасалициловой кислоты. В пятую пробирку – раствор сульфата аммония. Наблюдают появление осадков во всех пробирках. Затем во все пробирки добавляют дистиллированную воду, в объеме, равном содержимому пробирок, встряхивают и наблюдают растворились ли осадки и делают выводы о типе осаждения белка в каждой пробирке ( денатурации или высаливании). Резу4льтаты работы оформляют в виде таблицы.
№ пробирки |
Осаждающий фактор |
Результат появление или отсутствие осадка |
Растворим осадок или нет |
Вывод указать характер осаждения |
1 |
|
|
|
|
2 |
|
|
|
|
3 |
|
|
|
|
4 |
|
|
|
|
5 |
|
|
|
|