Экзаменационный билет № 75

1. Герпесвирусы. Вирус ветряной оспы и опоясывающего герпеса.

ВПГ вызывает герпетическую инфекцию, или простой герпес, характеризующийся везикулезными высыпаниями на коже, слизистых оболочках, поражением ЦНС и внутренних органов, а также пожизненным носительством (персистенцией) и рецидивами болезни.

Таксономия. Семейс¬тво Herpesviridae. Род Simplexvirus.

Структура. Геном ВПГ кодирует около 80 белков, необходимых для репродукции вируса и взаимодействия пос¬леднего с клетками организма и иммунным ответом. ВПГ кодирует 11 гликопротеинов, являющихся прикрепительными белка¬ми (gB, gC, gD, gH), белками слияния (gB), структурными белками, иммунными белками «уклонения» (gC, gE, gl).

Вирус вызывает литические ин¬фекции фибробластов, эпителиальных клеток и латентные инфекции нейронов.

Культивирование. Для культивирования ви¬руса применяют куриный эмбрион (на оболочке образуются мелкие плотные бляшки) и культуру клеток, на которой он вызывает цитопатический эф¬фект в виде появления гигантских многоядер¬ных клеток с внутриядерными включениями.

Антигенная структура. Вирус содержит ряд антигенов, связанных как с внутренними белками, так и с гликопротеидами наружной оболочки. Последние являются основными иммуногенами, индуцирущими выработку антител и клеточный иммунитет. Существует два серотипа: ВПГ 1 типа и ВПГ 2 типа.

Резистентность. Вирус нестоек, чувствителен к солнечным и УФ-лучам.

Эпидемиология. Источник инфекции — больной.

ВПГ-1 и ВПГ-2 передаются преимущес¬твенно контактным путем (с везикулярной жидкостью, со слюной, по¬ловых контактах), через предметы обихода, реже — воз¬душно-капельным путем, через плаценту, при рождении ребенка.

Оба типа вирусов могут вызывать оральный и генитальный герпес. ВПГ-1 чаще поражает слизистые оболочки ротовой полости и глот¬ки, вызывает энцефалиты, а ВПГ-2 — генита¬лии (генитальный герпес).

Патогенез. Различают первичный и реци¬дивирующий простой герпес. Чаще вирус вы¬зывает бессимптомную или латентную ин¬фекцию.

Первичная инфекция. Везикула —проявление простого герпеса с деге¬нерацией эпителиальных клеток. Основу везикулы составляют многоядерные клет¬ки. Пораженные ядра клеток содержат эозинофильные включения. Верхушка везикулы через некоторое время вскрывается, и формируется язвочка, кото¬рая вскоре покрывается струпом с образо¬ванием корочки с последующим заживле¬нием.

Минуя входные ворота эпителия, виру¬сы проходят через чувствительные нервные окончания с дальнейшим передвижением нуклеокапсидов вдоль аксона к телу нейро¬на в чувствительных ганглиях. Репродукция вируса в нейроне заканчивается его гибелью. Некоторые вирусы герпеса, достигая ганглионарных клеток, способны приводить к развитию латентной инфекции, при которой нейроны не гибнут, но содержат в себе вирус¬ный геном. Большинство людей (70-90 %) являются пожизненными носителями виру¬са, который сохраняется в ганглиях, вызы¬вая в нейронах латентную персистирующую инфекцию.

Латентная инфекция чувствительных ней¬ронов является характерной особенностью нейротропных герпесвирусов ВПГ. В латентно инфицированных нейронах около 1 % клеток в пораженном ганглии несет вирусный геном.

Клиника. Инкубационный период 2—12 дней. Болезнь начинается с возникновения на пораженных участках зуда, появления отека и пузырьков, заполненных жидкос¬тью. ВПГ по¬ражает кожу (везикулы, экзема), слизистые оболочки рта, глотки (стоматит) и кишеч¬ника, печень (гепатиты), глаза (кератит) и ЦНС (энцефалит). Рецидивирующий герпес обусловлен реактивацией вируса, сохранившегося в ганглиях. Он характеризуется повторны¬ми высыпаниями и поражением органов и тканей.

Генитальная инфекция является результа¬том аутоинокуляции из других пораженных участков тела; но наиболее часто встречаю¬щийся путь заражения — половой. Поражение про¬является в образовании везикулы, которая довольно быстро изъязвляется.

Вирус простого герпеса проникает во время прохождения но¬ворожденного через родовые пути матери, вызывая неонаталъный герпес. Неонатальный герпес обнару¬живается на 6-й день после родов. Вирус диссеминирует во внутренние органы с развитием генера¬лизованного сепсиса.

Иммунитет. Основной иммунитет— клеточный. Развивается ГЗТ. NK-клетки играют важную роль в ранней противомикробной защите. Организм пора¬женного реагирует на гликопротеины вируса, продуцируя цитотоксические Т-лимфоциты, а также Т-хелперы, активирую¬щие В-лимфоциты с последующей продукци¬ей специфических антител.

Гликопротеины вызывают образование вируснейтрализующих антител. Вирус - нейтрализующие антитела подавляют межкле¬точное распространение вирусов.

Микробиологическая диагностика. Используют содержимое гер¬петических везикул, слюну, соскобы с рого¬вой оболочки глаз, кровь, спинномозговую жидкость. В окрашенных мазках наблюдают гигантские многоядерные клетки, клетки с увеличенной цитоплазмой и внутриядер-ными включениями .

Для выделения вируса исследуемым материалом заражают клетки HeLa, Нер-2, человеческие эмбрио¬нальные фибробласты.

Рост в культуре кле¬ток проявляется округлением клеток с последующим про¬грессирующим поражением всей культуры клеток. Заражают также куриные эмбрионы, у которых после внутримозгового заражения развивается энце¬фалит. Выделенный вирус идентифицируют в РИФ и ИФА с использованием моноклональных антител.

Серодиагностику проводят с помощью РСК, РИФ, ИФА и реакции нейтрализации по нарастанию титра антител больного. ИБ также способен выявлять типоспецифические антитела.

При экспресс-диагностике в мазках-от¬печатках из высыпаний, окрашенных по Романовскому-Гимзе, выявляются гига¬нтские многоядерные клетки с внутриядер¬ными включениями. Для идентификации вируса используют также амплификацию ге¬нов вирусной ДНК в реакции ПЦР.

Лечение. Для лечения применяют препа¬раты интерферона, индукторы интерферона и противовирусные химиотерапевтические препараты (ацикловир, видарабин).

Профилактика. Специфическая профи¬лактика рецидивирующего герпеса осущест¬вляется в период ремиссии многократным введением инактивированной культуральной герпетической вакцины

2. Микроскоп, оптические устройства и приспособления, их разрешающая способность, назначение.

микробиологич. исследований использую несколько типов микроскопов (световой, люминесцентный, электронный) и спец. методы микроскопии (фазово-контрастный, темнопольный). Микроскопы предназначены для изучения формы, структуры, размеров и других признаков различных МКО, величина которых не менее 0,2-0,3мкм. Предельная разрешающая способность иммерсионного микроскопа 0,2 мкм. Общее увеличение микроскопа определяется произведением увеличения объектива на увеличение окуляра. Световоймикроскоп -все объекты рассматриваются в проходящем свете сухим и иммерсионным объективом, Разрешающая способность - 0,4-0,2 мкм, Используется для изучения морфологии, структуры, подвижности и тинкториальных свойств микроорганизмов. Темнопольная микроскопия основана на явлении дифракции света при сильном боковом освещении взвешенных в жидкости мельчайших частиц. Фазофо-контастная микроскопия дает возможность увидеть в микроскопе прозрачные объекты, они приобретают высокую контрастность изображения, кот. может быть позотивной(темный объект в светлом поле) или негатиывной(светлое изображение в темном поле). Темнопольная и фазово-контр. микросокпии позволяют проводить широкий круг микроскопических исследований, визуальное наблюдение, фотографирование, применение светлого и тёмного полей в прямом и отражённом свете, прямое и косое освещение, микроскопирование в поляризованном свете, методом фазовых контрастов, в свете люминесценции. Люминесцентный микроскоп – Использование ультрафиолетовых лучей и люминесцирующих красителей, способных светиться(флюоресцировать) под УФ - лучами. Позволяет наблюдать микроорганизмы в излучаемом ими свете и цвете. Различаю первичную(собственную) люминесценцию и вторичную (наведенную) при помощи красителя. Разрешающая способность - 0.1 мкм. Используется не только для изучения морфологии, и тинкториальных свойств, но и для исследования процессов жизнедеятельности микробной клетки. Электронный микроскоп - Принципдействия и устройства подобен таковым у обычного светового микроскопа. Различия - вместо источника света – источник электроволн(вольфрамоваяпроволока,нагреваемаяэлектротоком,вместооптических линз-электромагнитные). Разрешающая - способность 0.001 мкм. Широко используется для изучения вирусов, мельчайших микроорганизмов. В бактериологии используется для изучения деталей тонкого строения. Дополнительные устройства: 1) Бинокулярная насадка АУ – 12. Приближает микроскопию к условиям естественного зрения. Повышение трудоспособности работающего с микроскопом, Разрешающая способность несколько повышена. 2) Микрометр: объект, окуляр. Объект-микрометр и окуляр-микрометр позволяют определить размеры бактерий с помощью расчётных сеток. Разрешающаяспособность несколькоповышается, даёт возможность изучать микроорганизмы в нативном состоянии. 3) Темнопольный конденсор к световому микроскопу. Затемнение центральной части конденсора и, как следствие, боковое освещение объекта позволяет на тёмном фоне препарата видеть микроорганизмы в отражённом от них свете. 4) Фазово-контрастное устройство (объектив). При обычноймикроскопии впроходящем свете повышает контрастность иотражение за счет превращения фазовых смещений световой волны вамплитудные,улавливаемыеглазом. Используется для наблюдения за живыми биообъектами. 5) Столик-термостат. Сохраняетподвижность объекта. При анализепростейших.

3. Гиперчувствительность замедленного типа (Т-зависимая аллергия). Особенности инфекционной аллергии, ее сущность, формы, проявление, диагностика.

К аллергическим реак¬циям относят два типа реагирования на чужеродное вещество: гиперчувствительность немедленного типа (ГНТ) и гиперчувствительность замедленного типа (ГЗТ). К ГНТ относятся аллергические реакции, проявляющиеся уже че¬рез 20—30 мин после повторной встречи с антигеном, а к ГЗТ — реакции, возникающие не ранее чем через 24—48 ч. Механизм и кли¬нические проявления ГНТ и ГЗТ различны. ГНТ связана с вы¬работкой антител, а ГЗТ — с клеточными реакциями.

ГЗТ впервые описана Р. Кохом (1890). Эта форма проявления не связана с антителами, опосредована клеточными механизма¬ми с участием Т-лимфоцитов. К ГЗТ относятся следующие фор-мы проявления: туберкулиновая реакция, замедленная аллергия к белкам, контактная аллергия.

В отличие от реакций I, II и III типов реакции IV типа не свя¬заны с антителами, а обусловлены клеточными реакциями, прежде всего Т-лимфоцитами. Реакции замедленного типа могут возникать при сенсибилизации организма:

1. Микроорганизмами и микробными антигенами (бактериальны¬ми, грибковыми, протозойными, вирусными); 2. Гельминтами; 3. Природными и искусственно синтезированными гаптенами (лекарственные препараты, красители); 4. Некоторыми белками.

Следовательно, реакция замедленного типа может вызывать¬ся практически всеми антигенами. Но наиболее ярко она про¬является на введение полисахаридов, низкомолекулярных пеп¬тидов, т. е. малоиммуногенных антигенов. При этом реакцию вызывают малые дозы антигенов и лучше всего при внутрикожном введении.

Механизм аллергической реакции этого типа состоит в сен¬сибилизации Т-лимфоцитов-хелперов антигеном. Сенсибилизация лимфоцитов вызывает выделение медиаторов, в частности интерлейкина-2, которые активируют макрофаги и тем самым вов¬лекают их в процесс разрушения антигена, вызвавшего сенсибилизацию лимфоцитов. Цитотоксичность проявляют также и сами Т-лимфоциты. О роли лимфоцитов в возникновении аллер¬гий клеточного типа свидетельствуют возможность передачи ал¬лергии от сенсибилизированного животного несенсибилизированному с помощью введения лимфоцитов, а также подавление реакции при помощи антилимфоцитарной сыворотки.

Морфологическая картина при аллергиях клеточного типа но¬сит воспалительный характер, обусловленный реакцией лимфо¬цитов и макрофагов на образующийся комплекс антигена с сен-сибилизированными лимфоцитами.

Аллергические реакции клеточного типа проявляются в виде туберкулиновой реакции, замедленной аллергии к белкам, кон¬тактной аллергии.

Туберкулиновая реакция возникает через 5—6 ч после внутрикожного введения сенсибилизированным туберкулезной палоч¬кой животным или человеку туберкулина, т. е. антигенов тубер¬кулезной палочки. Выражается реакция в виде покраснения, при¬пухлости, уплотнения на месте введения туберкулина. Сопровож¬дается иногда повышением температуры тела, лимфопенией. Раз¬витие реакции достигает максимума через 24—48 ч. Туберкули¬новая реакция используется с диагностической целью для вы¬явления заболеваний туберкулезом или контактов организма с туберкулезной палочкой.

Замедленная аллергия возникает при сенсибилизации малы¬ми дозами белковых антигенов с адъювантом, а также конъю-гатами белков с гаптенами. В этих случаях аллергическая реак¬ция возникает не раньше чем через 5 дней и длится 2—3 нед. Видимо, здесь играют роль замедленное действие конъюгированных белков на лимфоидную ткань и сенсибилизация Т-лимфо-цитов.

Контактная аллергия возникает, если антигенами являются низкомолекулярные органические и неорганические вещества, которые в организме соединяются с белками, образуя конъюга-ты. Конъюгированные соединения, выполняя роль гаптенов, вы¬зывают сенсибилизацию. Контактная аллергия может возникать при длительном контакте с химическими веществами, в том числе фармацевтическими препаратами, красками, косметичес¬кими препаратами (губная помада, краска для ресниц). Прояв¬ляется контактная аллергия в виде всевозможных дерматитов, т. е. поражений поверхностных слоев кожи.

Значение. Все реакции гиперчувствительности, в том числе и ГЗТ имеют большое значение. Их механизмы лежат в основе воспаления, которое способствует локализации инфекционного агента или иного антигена в пределах определённых тканей и формированию полноценной иммунной реакции защитного характера.

4. У больного гриппом выявлена пневмония, вызванная стафилококком. Как называется такая форма инфекции? Объясните причины ее возникновения. Приведите другие примеры такого сочетания.

Вторичная инфекция ( к развивающейся первичной, присоединилась другая инфекция, вызванная новым видом возбудителя). Вторичная инфекция присоединилась на фоне ослабления иммунной системы организма вирусом гриппа. Например, при заболевании брюшным тифом может возникнуть пневмония.