7.2. Риккетсиозные и вирусные антигенные препараты

– Риккетсиозные корпускулярные антигены – взвесь убитых

риккетсий соответствующих видов, выращенных в желточном мешке

куриного эмбриона и тщательно очищенных от посторонних

тканевых элементов.

– Риккетсиозные антигены растворимые представляют собой

антигенные фракции, полученные путем экстракции и последующей

87

обработки эфиром чистой культуры риккетсий. Готовятся

производственным путем и выпускаются в виде сухих препаратов в

запаянных ампулах. Риккетсиозные антигены используются при

серологической диагностике риккетсиозов: эпидемического и

эндемического сыпного тифа, марсельской лихорадки, волынской

лихорадки и Ку-лихорадки. Эти антигены применяют в РСК и РА.

– Жидкий эритроцитарный сыпнотифозный диагностикум

представляет собой взвесь человеческих или бараньих эритроцитов,

сенсибилизированных специфическим гаптеном из риккетсий

Провачека. Применяют для постановки РПГА с целью

серодиагностики.

– Гриппозные диагностикумы представляют собой очищенную

вируссодержащую аллантоисную жидкость куриных эмбрионов,

высушенную лиофильным методом. Готовятся диагностикумы

раздельно для каждого типа вируса гриппа: А, А1, А2, В, С.

Гриппозные диагностикумы применяются для постановки РТГА при

серологической диагностике гриппа у больных.

– Аденовирусный антиген представляет собой

инактивированную вируссодержащую жидкость, полученную при

культивировании аденовируса в культуре перевиваемых клеток.

Используется в РСК при серологической диагностике аденовирусной

инфекции у людей.

– Парагриппозные гемагглютинирующие диагностикумы – это

обработанные эфиром и твином препараты, полученные из тканевых

культур, инфицированных парагриппозными вирусами I, II, III типов.

Парагриппозные диагностикумы используются в РТГА.

– Диагностикум клещевого энцефалита – это препарат,

приготовленный методом экстрагирования специфического

вирусного компонента из мозговой ткани белых мышей, зараженных

вирусом клещевого энцефалита и обезвреженный формалином.

Препарат применяют в качестве антигена в РСК при серологической

диагностике заболевания у людей.

– Гемагглютинирующий инактивированный диагностикум

клещевого энцефалита выпускается в виде суспензии мозга мышей,

зараженных вирусом. Препарат применяется в качестве антигена в

РТГА для выявления антител в сыворотках переболевших людей, а

также у людей и животных в природных очагах.

88

Глава 8. Диагностические бактериофаги

Препараты диагностических бактериофагов готовят из

индикаторных монофагов и типовых бактериофагов. Применяют для

фагодиагностики, фагоидентификации и фаготипирования.

– Фагодиагностика – осуществляется двумя путями:

• выделение специфических бактериофагов из исследуемого

материала больного при подозрении на ту или иную бактериальную

инфекцию, что косвенно указывает на наличие соответствующего

возбудителя;

• обнаружение в исследуемом материале незначительных

количеств бактерий при помощи реакции нарастания титра фага

(РНТФ) без выделения чистой культуры возбудителя.

Для фагодиагностики выпускают:

– индикаторные бактериофаги: брюшнотифозный,

дизентерийный Флекснера и Зонне, чумный, холерный –

классический и Эль-Тор, бруцеллезный и сибиреязвенный.

Индикаторный бактериофаг – вирулентный фаг,

характеризующийся точно лимитированным спектром действия.

Индикаторный фаг обладает высокой адсорбционной способностью,

коротким инкубационным периодом и высоким урожаем. Эти

свойства обеспечивают значительное увеличение титра фага в

исследуемом материале, содержащем соответствующих

возбудителей, что выявляется в реакции нарастания титра фага

(РНТФ), используемой для обнаружения бактерий в объектах

окружающей среды и исследуемом материале больного.

– Фагоидентификация – определение вида бактерий,

выделенных в чистой культуре по известному бактериофагу.

Для фагоидентификации бактерий в чистой культуре

применяют диагностические препараты вирулентных полифагов и

монофагов, в том числе индикаторных. Используются:

– сальмонеллезный бактериофаг АВСДЕ, брюшнотифозный

монофаг, монофаги паратифа А и В, дизентерийные поли- и

монофаги Зонне, Флекснер и другие, бруцеллезный монофаг, чумной

монофаг, холерные монофаги и др.

Фаготипирование – подразделение бактерий внутри вида или

серовара с помощью типовых бактериофагов, что необходимо для

эпидемиологического анализа инфекционных заболеваний.

Различают два способа фаготипирования: прямой и непрямой.

89

– Прямой метод фаготипирования основан на выделении из

исследуемого штамма бактерий умеренного фага и его

идентификации. Метод трудоемок, поэтому используется ограниченно.

– Непрямой метод фаготипирования основан на определении

чувствительности микроба к узкоспецифическим (типовым)

бактериофагам.

Типовые бактериофаги – это фаги, выделенные из лизогенных

культур. При типировании бактерий используют умеренные фаги,

обладающие литической активностью в критических тест-разведениях,

то есть в максимальных десятикратных разведениях, которые дают

сливной лизис гомологичного штамма бактерий на плотной

питательной среде. Такие фаги позволяют дифференцировать

возбудителей на большое количество фаготипов. Например, у

возбудителей брюшного тифа выявлено более 70 фаготипов, у

плазмокоагулирующих стафилококков – около 40 фаготипов.

Наборы типовых стафилококковых и брюшнотифозных фагов

стандартизированы Международной ассоциацией микробиологов.

– Набор типовых фагов для стафилококка – включает 27 фагов.

Стафилофаги, полученные из лизогенных культур, обозначены

цифрой (например, 29, 53, 80 и т. д.), адаптанты – номером и буквой

(например, 3а, 53б и др.), стафилококки, как правило, лизируются

несколькими типовыми фагами. Фаготип стафилококка обозначается

названиями фагов, например: S. aureus, фаготип 29, 3а.

– Брюшнотифозные Vi-бактериофаги, лизирующие штаммы

брюшнотифозных бактерий, содержащих Vi-антиген. Vi-I-фаг

лизирует все Vi-штаммы брюшнотифозных бактерий. Vi-II-фаг

обладает избирательной активностью, лизируя только те штаммы, на

которых пассировался. Из фагов Vi-II получен набор типовых

бактериофагов для типирования штаммов сальмонеллы тифи.

Типовые Vi-фаги обозначены буквами латинского алфавита и

цифрами: А, В1–B3, Е1–Е10, К1, К2, О, М1–М3 и т. п.

Известны типовые фаги кишечных палочек, дизентерийных

бактерий, протея, синегнойной палочки, холерного вибриона,

сальмонелл, коринебактерий дифтерии, микобактерий.

90