6.2. Антиглобулиновая сыворотка для пробы Кумбса

АГС для реакции Кумбса содержит бивалентные антитела

(полные, с двумя активными центрами) против так называемых

неполных антител, неполные антитела являются моновалентными,

то есть содержат один активный центр. При соединении с эпитопами

антигена не образуются крупные комплексы, способные выпадать в

осадок, то есть давать определенный визуальный эффект.

АГС, получаемая путем иммунизации кролика

гаммаглобулинами сыворотки человека, содержит бивалентные

антитела, способные связывать моновалентные антитела. Таким

образом, будет визуально наблюдаться реакция агглютинации или

гемагглютинации. Например, АГС используется для выявления в

сыворотке неполных антител к резус-фактору.

6.3. Преципитирующие сыворотки для постановки

реакции преципитации (РП)

Преципитирующие сыворотки содержат антитела (преципитины)

к мелкодисперсным антигенам и широко используются для

идентификации антигена при диагностике инфекционных

заболеваний (сибирской язвы, чумы), при определении типовой

принадлежности стрептококковый инфекций, эпидемического

цереброспинального менингита, в судебно-медицинской практике для

определения видовой принадлежности белка крови, в санитарной

практике для обнаружения соответствующих белковых веществ,

фальсификации пищевых продуктов.

Преципитирующие сыворотки получают иммунизацией

кроликов мелкодисперсными молекулярными антигенами

(очищенные белковые антигенные фракции, токсины и т. д.).

75

Титром преципитирующей сыворотки называется то

максимальное разведение антигена, которое преципитируется

цельной сывороткой. Выпускают диагностические преципитирующие

сыворотки с титром не меньше 1 : 100 000. Это связано с тем, что

антиген, определяемый в реакции преципитации, имеет

молекулярную дисперсность и из-за этого громадную суммарную

поверхность, для покрытия которой нужно очень много антител.

Реакция преципитации может быть поставлена в виде кольце-

или термопреципитации, преципитации в геле, реакции флоккуляции,

иммуноэлектрофореза.

6.4. Гемолитическая сыворотка и комплемент для постановки

реакции гемолиза и реакции связывания комплемента (РСК)

Гемолитическая сыворотка содержит антитела (гемолизины),

которые, соединяясь с антигеном (эритроцитом), активируют

комплемент по классическому пути, что приводит к лизису

эритроцитов. Эта сыворотка является составной частью

гемолитической (индикаторной) системы, применяемой в РСК.

Гемолитическую сыворотку получают путем 3–4-кратной

иммунизации кроликов взвесью эритроцитов барана с интервалом в

2–3 дня.

Титром гемолитической сыворотки называется то ее

максимальное разведение, которое в объеме 0,5 мл в присутствии

комплемента вызывает гемолиз 0,5 мл 3 %-ной взвеси эритроцитов

барана в течение часа при 37 °С. Титр должен быть не ниже 1 : 1200 –

1 : 1500.

Комплемент – это совокупность нескольких нормальных

компонентов свежей сыворотки с различными физико-химическими

свойствами. Он содержится в большинстве сывороток теплокровных

и холоднокровных животных. Комплементарная функция выражена

наиболее интенсивно в сыворотке морских свинок, поэтому они и

служат донорами комплемента в лабораториях.

Основным свойством комплемента является его способность

вызывать лизис сенсибилизированных соответствующими

иммунными сыворотками клеток, а также адсорбироваться системами

антиген + антитело.

Комплемент широко применяется для серологической

диагностики ряда инфекционных заболеваний в реакции связывания

76

комплемента (сифилис, гонорея, бруцеллез, туляремия, риккетсиозы,

грипп, клещевой энцефалит и др.).

Учитывая чрезвычайную лабильность некоторых компонентов

комплемента, для постановки РСК выбирают оптимальную дозу

комплемента. Для этого производят его титрование в присутствии

гемолитической системы. Титр комплемента – минимальная его

концентрация, обеспечивающая полный лизис 3 %-ной взвеси

бараньих эритроцитов в присутствии гемолитической сыворотки.

Рабочая доза комплемента увеличивается по сравнению с титром на

25–30 %. Избыток или недостаток комплемента могут значительно

исказить результаты РСК.

В настоящее время производят сухой консервированный

комплемент.