Часть 2. Иммунобиологические препараты

НА ОСНОВЕ СПЕЦИФИЧЕСКИХ АНТИТЕЛ

К иммунобиологическим препаратам на основе антител

относятся:

– иммунные сыворотки;

– иммуноглобулины (цельномолекулярные и доменные);

– моноклональные антитела;

– иммунотоксины, иммуноадгезины;

– абзимы (антитела-ферменты).

Глава 4. Сыворотки и иммуноглобулины

Применяются с целью экстренной профилактики и лечения ряда

инфекционных заболеваний. Профилактические дозы значительно

меньше лечебных. Профилактически их вводят внутримышечно

лицам, имеющим контакт с больным или иным источником инфекции

(ранее не болевшим и не привитым против соответствующей

инфекции). С лечебной целью сывороточные препараты вводят в

больших дозах внутримышечно.

Готовые антитела в составе препаратов иммунных сывороток и

иммуноглобулинов при введении в организм специфично

связываются с возбудителями заболеваний или их токсинами,

образуют иммунные комплексы, которые затем элиминируются из

организма с помощью фагоцитов и активированного по

классическому пути комплемента.

Преимущество сывороток и иммуноглобулинов перед

вакцинными препаратами, используемыми для активной

иммунизации, состоит в быстроте создаваемого иммунитета, что

особенно важно для профилактики заболеваний с коротким

инкубационным периодом и лечения уже развившейся болезни.

Однако, в отличие от вакцин, иммунобиологические препараты

на основе антител формируют кратковременный иммунитет. При

введении сывороточных препаратов иммунитет наступает через

несколько часов и сохраняется 2–3 недели после введения

51

гетерогенных препаратов и в течение 4–5 недель – гомологичных

препаратов.

Иммунные сыворотки и иммуноглобулины по способу

получения подразделяются на:

– гетерогенные – полученные от животных;

– гомологичные – полученные из сыворотки переболевших

людей или специально иммунизированных людей-доноров либо

сыворотки из плацентарной и абортной крови.

Производство гетерогенных иммунных сывороток и

иммуноглобулинов осуществляется в несколько этапов:

– Гипериммунизация животных (лошадей, ослов, крупного

рогатого скота) введением через определенное время возрастающих

доз антигенов. В качестве антигенов используют анатоксины,

токсины, убитые и живые микробные клетки и вирусы.

– Получение нативных сывороток путем кровопускания и

удаления из крови форменных элементов. Иммунные сыворотки,

полученные от животных, называются гетерологичными так как они

содержат чужеродные для человека сывороточные белки.

– Очистка сывороток от балластных компонентов.

– Выделение и концентрирование иммуноглобулинов –

производится различными физико-химическими методами.

Наиболее распространенным является метод «Диаферм-3»,

заключающийся в ферментативном гидролизе (пепсином)

сывороточных белков с последующим осаждением балластных

компонентов (термоденатурацией при 58 °С). Осаждение

иммуноглобулинов производится 34 %-ным раствором сульфата

аммония. Сульфат аммония удаляется путем диализа в фосфатном

буфере против проточной воды. Балластные белки извлекаются

хлороформом (мертиолятом, фенолом) и отделяются с помощью

сепарирования.

– Осветление и стерилизация сывороток производится на

бактерийных фильтрах. После чего осуществляется

концентрирование сывороток.

В процессе производства иммунных сывороток удаляются

альбумины и большая часть альфа-глобулинов. В качестве активной

фракции остаются гамма- и бета-глобулины. В результате глубокого

изменения молекул антител при протеолизе уменьшается токсическое

действие этих белков на организм человека

52

Метод «Диаферм-3» не позволяет достичь расщепления

иммуноглобулинов до F (аЬ)2-фрагментов и глубоко гидролизовать

неиммунные белки, поэтому постоянно усовершенствуется с целью

повышения удельной активности сывороточных препаратов,

уменьшения их токсичности (за счет остаточных концентраций

хлороформа и др.), повышения производительности производства.

С целью уменьшения потерь антитоксинов в сывороточных

препаратах применяется щадящий ферментолиз и осаждение

балластных компонентов при более низких температурах (38 °С) и

РН = 3,6 с заключительным центрифугированием диализата на

сверхцентрифугах СГО-100-750 при 15 000 об/мин. Для очистки и

концентрации гетерологичных сывороток применяют спиртовой

метод фракционирования (осаждение белков 0,4 %-ным раствором

риванола, отстаивание, декантирование, фильтрация раствора,

высаливание риванола).

Более совершенные сывороточные препараты получают путем

совмещения частичного ферментолиза иммуноглобулинов и

иммуносорбции (метод специфического антигенного извлечения и

соответственно максимальной очистки антител). Применение

иммуносорбентов, приготовленных на основе геля гидрата окиси

аллюминия (или полиакриламидного геля, цианбромированной

сефарозы 4В) из соответствующих анатоксинов, повышает в 4–5 раз

удельную активность ферментированных сывороток; содержание

антитоксинов в них составляет до 95–98 %.

Недостатки гетерогенных сывороточных препаратов:

Во-первых, они обеспечивают иммунитет на меньший срок по

сравнению с гомологичными антителами. Уже через 1–2 недели

после первичного введения гетерологичные антитела не

обнаруживают в крови. Быстрое выведение их из организма

обусловлено происходящим естественным распадом белковых

молекул. Повторное применение сокращает время пребывания

антител до 3–5 дней в связи с нейтрализующим действием ранее

образовавшихся антител к сывороточному белку.

Во-вторых, введение гетерогенных сывороточных препаратов

может сопровождаться возникновением побочных реакций

(сывороточной болезни, анафилактического шока). Наибольшую

опасность представляет собой анафилактический шок,

развивающийся обычно у людей, ранее получавших сыворотку, то

есть сенсибилизированных гетерогенным белком.

53

Меры предупреждения развития анафилактического шока и

сывороточной болезни:

– Предварительное выявление индивидуальной

чувствительности к чужеродным сывороточным белкам с помощью

специальной внутрикожной пробы. С этой целью 0,1 мл разведенной