7. Биологические свойства возбудителя лептоспироза. Возбудитель лептоспироза – Leptospira interrhogans

Морфология.

• Нежные, спирально извитые микроорганизмы с 12-18 мелкими первичными завитками.

• Концы лептоспир утолщены и загнуты в виде крючков (вторичные завитки) и придают им S- или С-образную форму.

• Длина лептоспир – 6- 20 мкм, толщина – 0,1 мкм.

• Спор, капсул и жгутиков не образуют.

• Имеют ультраструктуру, типичную для прокариотической клетки.

• Имеют локомоторный аппарат – осевые нити (аксостиля), представлены 1-2 фибриллами, состоят из белка флагеллина и обеспечивает движение лептоспир.

Тинкториальные свойства.

• Плохо воспринимают анилиновые красители,

• По Романовскому-Гимзе окрашиваются в бледно-розовый цвет.

• Их изучают в живом состоянии темнопольным и фазовоконтрастным методом микроскопии.

Культуральные свойства.

• Хемоорганотрофы, основными источниками энергии и углерода служат липиды,

• Являются микроаэрофилами.

• Культивируются на питательных средах, содержащих сыворотку или сывороточный альбумин.

• Рост медленный, при оптимальной температуре 28-30 ̊С появляется на 5-7 сут культивирования.

• Не вызывают помутнения питательной среды и выявляются в темном поле зрения.

Ферментативные свойства. Синтезируют ферменты оксидазу и каталазу.

Токсинообразование.

• Содержат эндотоксин,

• Вырабатывают факторы агрессии: гиалуронидазу, фибринолизин, гемолизин, лецитиназу, липазу.

Антигенная структура.

• 39 серогрупп и свыше 200 сероваров.

• Ссодержат общеродовой антиген белковой природы и вариантоспецифический поверхностный антиген липополисахаридной природы.

• Представители одних серогрупп ( L. icterohaemorragiae) вызывают желтушный лептоспироз, других (L. pomona, L. grippotyphosa) – безжелтушную форму заболевания.

Патогенность для животных.

• В естественных условиях резервуары — грызуны (полевки, хомяки, мыши, крысы и др.), домашние животные (крупный и мелкий рогатый скот, свиньи, собаки), промысловые животные (лисицы, песцы, нутрии).

• Среди животных наблюдаются эпизоотии, во время которых отмечаются заболевания лептоспирозом в острой и хронической форме.

• В организме животных концентрируются в почках (в извитых канальцах) и выделяются наружу с мочой, загрязняя внешнюю среду, где сохраняют жизнеспособность в течение нескольких недель.

• Из лабораторных животных — золотистые хомяки, морские свинки и кролики-сосунки.

8. Патогенез и микробиологическая диагностика лептоспироза.

Микробиологическая диагностика.

Материал для исследования – кровь, моча, спинномозговая жидкость, сыворотка крови больного, секционный материал, пробы воды.

В первые 5 дней заболевания проводят бактериоскопическое, бактериологическое и биологическое исследование крови и ликвора.

С 10 сут – бактериоскопию мочи, а с конца первой недели – серологический анализ.

Микроскопический метод.

• Из исследуемого материала готовят препарат «раздавленной капли» и микроскопируют его в темном поле зрения.

• В положительном случае видны серебристо-белые лептоспиры с активным и разнообразным движением (поступательным, вращательным и сгибательным).

• Для обнаружения в исследуемом материале можно использовать окраску мазков методами негативного контрастирования (с конго красным) и иммунофлюоресценции.

Бактериологический метод.

1. Кровь, ликвор, мочу засевают в жидкие питательные среды (Ферворта-Вольфа и ее модификации, Терских и др.). Основной компонент сред — инактивированная кроличья сыворотка.

2. Посевы ставят в термостат при температуре 28-30 ̊С.

3. Для определения роста каждые 7- 10 дней в течение 2 мес микроскопируют в темном поле.

4. При отсутствии роста в течение 3 мес результаты считают отрицательными.

5. Серогруппу и серовар выделенной культуры устанавливают в РА с набором диагностических сывороток.

Биологический метод.

1. Внутрибрюшинного или подкожно заражают исследуемым материалом морских свинок, крольчат, и золотистых хомяков 2-3 недельного возраста. —>В положительном случае, примерно, через неделю животные заболевают.

2. Препараты из крови мочи и органов микроскопируют в темном поле и делают посевы для выделения чистой культуры лептоспир.

Серологический метод.

• В крови больного к концу 1 нед появляются антитела.

1. Ставят реакцию агглютинации – лизиса с сывороткой больного и эталонными культурами лептоспир разных серогрупп и сероваров.

2. Учет результатов реакции проводят в препаратах «раздавленная капля» в темном поле. —> В положительном случае в первых разведениях сыворотки наблюдается полное растворение лептоспир, в последующих разведениях – агглютинация лептоспир и появление аггломератов в виде «паучков».—> Положительными считаются титры 1:100 и выше.

3. Реакцию рекомендуется ставить повторно для установления нарастания титра антител.

• Применяют также РПГА, в которой используют диагностикум из эритроцитами с адсорбированными на них лептоспирами.

• Разрабатываются реакция иммунодиффузии, ПЦР.

Аллергологический метод не применяется.

Патогенез.

• Основной источник в природных очагах — дикие грызуны.

• Из сельскохозяйственных животных – свиньи и крупный рогатый скот.

• Больные животные выделяют лептоспиры во внешнюю среду с мочой и инфицируют воду, корма, пастбища, почву и другие объекты внешней среды, через которые заражаются здоровые животные и люди.

• Механизмы передачи возбудителя – алиментарный, контактный.

• Пути передачи: водный, пищевой, контактно-бытовой, прямой и непрямой контакт.

• Заражение человека происходит при употреблении воды и пищевых продуктов, инфицированных мочой больных животных, а также при купании в зараженных водоемах.

• Человек как источник инфекции существенной роли не играет.

• Заболевание носит сезонный характер (пик – июль-август).

• Входные ворота инфекции – слизистые оболочки пищеварительного тракта, глаз, носа, поврежденные кожные покровы.

• Основной фактор патогенности — эндотоксин, выделяющийся при разрушении возбудителя и вызывающий общую интоксикацию, кровоизлияния за счет повышения проницаемости сосудов.

• Некоторые серовары продуцируют плазмокоагулазу, фибринолизин, цитотоксины.

Ход заболевания.

• Инкубационный период при лептоспирозе равен 5-10 сут.

• Лептоспироз — циклически развивающийся инфекционный процесс и в его патогенезе можно выделить несколько фаз:

• 1 фаза — заражение — первичный аффект на месте внедрения отсутствует.

• 2 фаза — лептоспиры по лимфатическим путям проникают в кровь, вызывая кратковременную бактериемию, а затем в макрофаги печени, селезенки, почек, легких, где размножаются, особенно интенсивно в печени.

* Первая и вторая фаза соответствуют инкубационному периоду.

• 3 фаза (совпадает с началом болезни) — повторная бактериемия и токсинемиия – лептоспиры, размножившиеся в паренхиматозных органах, повторно проникают в кровь => распад с освобождением токсических субстанций и продуктов метаболизма, за счет которых наступает резкая интоксикация организма, генерализованное поражение кровеносных капилляров с развитием отека и множественных геморрагий на кожных покровах и внутренних органах. Может развиваться желтуха за счет гемолиза эритроцитов.

• 4 фаза — лептоспиры, неразрушенные в кровеносном русле, проникают повторно во внутренние органы => дегенеративные и некротические изменения печеночной паренхимы, повреждение эпителия почечных канальцев с возможным развитием острой почечной недостаточности. Реже развиваются менингоэнцефалит, поражение легких и других органов.

• 5 фаза — формируется гуморальный и клеточный иммунитет, организм очищается от возбудителя и наступает выздоровление. Лептоспиры выделяются из организма больного с мочой.

Профилактика и лечение.

• Охрана источников водоснабжения от загрязнения, обеззараживание воды, запрещение купания в водоемах, расположенных в эндемической местности и употребление воды из открытых водоемов.

• Борьба с грызунами.

• Ношение спецодежды при уходе за больными животными

• Вакцинация сельскохозяйственных животных.

• Лица высокого риска заражения подлежат иммунизации убитой корпускулярной вакциной.

• Вакцина — вводится подкожно, двукратно с интервалом в 7 дней. Через год проводится ревакцинация.

• Специфическое лечение — иммуноглобулин из крови гипериммунизированных волов, содержащий Ат к различным сероварам лептоспир.

• Эффективны также антибиотики (пенициллин, тетрациклины).

ЗАНЯТИЕ № 8

Патогенные риккетсии, хламидии

Вопросы для самоподготовки к занятию

1. Общая характеристика риккетсий. Классификация патогенных риккетсий и риккетсиозов.

2. Патогенез, микробиологическая диагностика и специфическая профилактика сыпного тифа (эпидемического и эндемического).

3. Болезнь Брилла. Дифференциальная диагностика острого сыпного тифа и болезни Брилла.

4. Общая характеристика хламидий. Роль хламидий в патологии человека.

5. Врожденный хламидиоз.

6. Диагностика хламидийных инфекций.

ЗАНЯТИЕ № 9

Возбудители внутрибольничных инфекций.

Вопросы для самоподготовки к занятию

1. Предмет и задачи клинической микробиологии. Понятие о внутрибольничных (ятрогенных, госпитальных, нозокомиальных) и оппортунистических инфекциях, условия их возникновения и этиология.

2. Понятие об условно-патогенных микроорганизмах, их роль в патологии человека. Основные возбудители внутрибольничных инфекций: стафилококк, стрептококк, клебсиелла, протей, синегнойная палочка и кишечная палочка. Таксономическое положение, основные биологические свойства.

3. Патогенез и микробиологическая диагностика внутрибольничных инфекций.

4. Особенности лечения и профилактики инфекций, вызванных условно- патогенными микроорганизмами.

112