1. Споры бактерий, их строение, образование, прорастание, способ окраски.

Споры (от греч. sporos, семя) - покоящиеся формы жизненного цикла бактерий, образуются внутри цитоплазмы вегетативных клеток в неблагоприятных условиях существования и обеспечивают сохранения вида.

Методы выявления спор:

• В препаратах, окрашенных простыми способами или по Граму, споры остаются бесцветными (негативная окраска).

• По методу Ожешко спора окрашивается в рубиново-красный цвет карболовым фуксином, а вегетативная клетка после обесцвечивания кислотой докрашивается метиленовым синим.

• Окраска спор методом Пешкова: Споры, окрашенные метиленовым синим Леффлера, имеют голубой цвет, вегетативные тела бактерий — красный.

• Окраска спор методом Дорнера: После окраски вегетативные тела остаются бесцветными, а споры приобретают красный цвет. Микробные тела находятся на черном фоне.

2. Капсула бактерий, их биологическая роль и способы обнаружения.

Капсула – слизистая структура толщиной более 0,2 мкм.

Функции капсулы: защитная, дополнительный осмотический барьер,защита от фагоцитоза, адгезивная (прочное прикрепление к субстрату),антигенная, патогенная.

Микрокапсула - толщина слизистого слоя меньше 0,2 мкм. Выявляется только с помощью электронного микроскопа.

Макрокапсулы - имеет стенки толще 0,2 мкм. Их уже можно рассмотреть в обычный микроскоп.

Капсула: полипептиды, полисахариды, вода 98%.

Методы выявления капсулы:

• Микроскопические методы: метод окрашивания по Бурри – Гинсу (негативное контрастирование тушью и карболовым раствором фуксина).

• Иммунологические методы: реакция Нейфельда (набухание капсулы).

• В тканях и патологических субстратах (мокрота, слизь, гной) капсула выявляется при любом методе окраски в виде неокрашенной зоны между окрашенными телом бактерий и субстратом.

3. Жгутики бактерий, их строение, методы обнаружения. Пили, их физиологическая роль.

Жгутики бактерий определяют подвижность бактериальной клетки. Жгутики - тонкие нити, берущие начало от ЦПМ, имеющие большую длину, чем сама клетка. Толщина жгутиков – 12–20 нм, длина – 3–12 мкм.

Жгутики состоят из флагеллина (от. лат. flagellum – жгутик), обладающего антигенной специфичностью.

Жгутик состоит из трех компонентов – спиральной жгутиковой нити (филамента) постоянной толщины, крючка (колена) и базального тельца. Крючок, к которому присоединена жгутико-

вая нить, имеет длину 30–45 нм.

Нити жгутиков приводит в движение мембранных шарнироподобный базальный крюк. Базальное тельце состоит из центрального стержня, заключенного в систему особых колец. Кольца выполняют роль «приводного диска».

Вся конструкция выполняет функцию хемомеханического преобразователя (флагеллиновый мотор).

Вращение жгутика в клеточной стенке происходит из-за вращательного движения колец S и М относительно друг друга и обеспечивается за счет энергии трансмембранного градиента ионов водорода или натрия. Благодаря такому вращению происходит движение бактерий в наиболее благоприятном для них направлении.

Жгутиковый аппарат обладает особым бинарным переключателем, который позволяет менять направление вращения жгутиков против часовой стрелки на противоположное. Таким образом, бактерии, получив химический сигнал из окружающей среды, изменяют направление движения и

выбирают оптимальные условия обитания.

Число жгутиков:

• Монотрих у холерного вибриона

• Перитрих - десятки и сотни жгутиков у кишечной палочки, протея и др.

Расположение жгутиков:

• Лофотрихи имеют пучок жгутиков на одном конце клетки.

• Амфитрихи имеют по одному жгутику или пучку жгутиков на противоположных концах клетки.

• На всей поверхности.

Выявление:

• При помощи электронной микроскопии препаратов, напыленных тяжелыми металлами

• В световом микроскопе после обработки специальными методами, основанными на протравливании и адсорбции различных веществ, приводящих к увеличению толщины жгутиков (например, после серебрения).

• Метод Леффлера

• Подвижность бактерий определяют при помощи фазово-контрастной или темнопольной микроскопии. Для этого готовят мазки типа «раздавленной» или «висячей» капли.

Пили (ворсинки,фимбрии от англ.fimbria – бахрома) –тонкие полые нити белковой природы (3-10нм х 0,3-10 мкм). Белок – пилин.

Пили 1 (общего) типа: Основные функции:

•адгезивная – Прикрепление бактерий к субстратам;

•участие в процессах метаболизма клетки – увеличение всасывающей поверхности.

Пили 2 типа (Половые F-пили) играют ключевую роль в горизонтальном переносе генетического материала (конъюгации).