- •Раздел 1. Возбудители бактериальных инфекций.
- •Занятие № 1. Патогенные кокки.
- •1. Основные принципы микробиологической диагностики инфекционных заболеваний.
- •2. Общая характеристика группы патогенных кокков, их таксономическое положение.
- •3. Морфологические, тинкториальные, биологические свойства стафилококков. Дифференциация патогенных и непатогенных стафилококков.
- •4. Стрептококки, их морфологические, тинкториальные и биологические свойства; классификация, токсинообразование и антигенная структура.
- •5. Патогенез стафилококковых и стрептококковых инфекций у человека.
- •6. Методы лабораторной диагностики стафилококковых и стрептококковых инфекций.
- •7. Морфологические, тинкториальные и биологические свойства менингококков, патогенез и микробиологическая диагностика вызываемых ими инфекций.
- •8. Морфологические, тинкториальные и биологические свойства гонококков. Патогенез гонореи. Микробиологическая диагностика острой и хронической гонореи. Гоновакцина.
- •9. Препараты, применяемые для диагностики, лечения и профилактики кокковых заболеваний.
- •Занятие № 2. Возбудители чумы, псевдотуберкулеза, туляремии, бруцеллеза и сибирской язвы.
- •1. Понятие о природно-очаговых, зоонозных и особо опасных инфекциях.
- •2. Режим работы лаборатории при диагностике особо опасных инфекций.
- •3. Возбудитель чумы, таксономическое положение, биологические свойства. Патогенез чумы.
- •4. Методы микробиологической диагностики чумы. Ускоренная диагностика чумы.
- •5. Противоэпидемические мероприятия в очаге чумы. Специфическая профилактика чумы.
- •6. Возбудитель псевдотуберкулеза. Биологические свойства. Патогенез псевдотуберкулеза.
- •7. Микробиологическая диагностика псевдотуберкулеза. Дифференциация возбудителя псевдотуберкулеза и других иерсиниозов.
- •8. Возбудитель туляремии, таксономическое положение, биологические свойства. Патогенез туляремии.
- •9. Методы микробиологической диагностики туляремии.
- •10. Противоэпидемические мероприятия в очаге туляремии.
- •11. Возбудитель бруцеллеза, таксономическое положение, биологические свойства. Классификация бруцелл. Эпидемиология и патогенез.
- •12. Методы микробиологической диагностики бруцеллеза.
- •13. Особенности иммунитета при бруцеллезе.
- •14. Возбудитель сибирской язвы, таксономическое положение, биологические свойства. Эпидемиология и патогенез сибирской язвы.
- •15. Методы микробиологической диагностики сибирской язвы. Дифференциация сибиреязвенных бацилл от антракоидов.
- •Занятие № 3. Возбудитель дифтерии. Патогенные клостридии.
- •1. Токсические инфекции. Особенности их этиологии, патогенеза и диагностики.
- •3. Возбудитель дифтерии, таксономическое положение, биологические свойства.
- •4. Типы возбудителей дифтерии. Отличие возбудителей дифтерии от дифтероидов.
- •5. Эпидемиология и патогенез дифтерии.
- •6. Микробиологическая диагностика дифтерии. Исследование на носительство дифтерийных бактерий.
- •7. Иммунитет при дифтерии. Серотерапия. Специфическая профилактика дифтерии.
- •8. Патогенные анаэробы, их таксономия, морфологические и культуральные свойства.
- •C. Рerfringens
- •C. Novyi
- •C. Septicum
- •C. Histolуticum
- •C. Sordellii
- •C. Sporogenes
- •С. Fallaх
- •C. Difficile
- •Занятие № 4. Возбудители туберкулеза и коклюша.
- •1. Общая характеристика микобактерий.
- •2. Характеристика возбудителей туберкулеза. Биологические типы микобактерий туберкулеза.
- •3. Эпидемиология и патогенез туберкулеза.
- •4. Особенности иммунитета при туберкулезе.
- •5. Методы микробиологической диагностики туберкулеза.
- •6. Аллергологическая диагностика туберкулеза. Туберкулин: состав, способ получения и применение. Внутрикожная проба Манту: техника проведения и интерпретация. Понятие «вираж туберкулиновой пробы»
- •7. Профилактика туберкулеза.
- •8. Возбудитель коклюша, таксономическое положение, биологические свойства.
- •9. Патогенез коклюша.
- •10. Микробиологическая диагностика коклюша. Дифференциация коклюшных, паракоклюшных бактерий и возбудителя септического бронхита.
- •11. Специфическая профилактика коклюша.
- •Занятие № 6. Семейство кишечных бактерий: эшерихии, сальмонеллы, шигеллы. Холерные вибрионы. Таксономическое положение
- •1. Общая характеристика бактерий кишечной группы. Общие принципы микробиологической диагностики кишечных инфекций.
- •2. Классификация патогенных кишечных палочек. Патогенез эшерихиозов, вызванных разными группами патогенных эшерихий.
- •Возбудители эшерихиозов – диареегенные Esherichia coli
- •3. Классификация сальмонелл. Антигенная структура сальмонелл. Схема Кауфмана–Уайта. Патогенез тифопаратифозных инфекций и сальмонеллезных пищевых токсикоинфекций.
- •Возбудители брюшного тифа и паратифов Salmonella typhi, Salmonella paratyphi a, Salmonella paratyphi b, Salmonella paratyphi c
- •Сальмонеллы – возбудители сальмонеллезов (пищевых токсикоинфекций) Salmonella typhimurium, Salmonella enteritidis, Salmonella choleraesuis, Salmonella dublin и др.
- •4. Классификация шигелл. Патогенез шигеллеза. Возбудители шигеллезов (дизентерии) Shigella dysenteriae, Shigella flexneri, Shigella boydii, Shigella sonnei
- •Занятие № 7. Патогенные спирохеты.
- •1. Общая характеристика и классификация патогенных спирохет.
- •2. Патогенез сифилиса.
- •3. Врожденный сифилис. Возбудитель сифилиса – Treponema pallidum.
- •4. Методы микробиологической диагностики сифилиса.
- •5. Иммунитет при сифилисе. Оценка результатов серологических исследований.
- •7. Биологические свойства возбудителя лептоспироза. Возбудитель лептоспироза – Leptospira interrhogans
- •8. Патогенез и микробиологическая диагностика лептоспироза.
Сальмонеллы – возбудители сальмонеллезов (пищевых токсикоинфекций) Salmonella typhimurium, Salmonella enteritidis, Salmonella choleraesuis, Salmonella dublin и др.
Морфология – палочки с закругленными концами размером 0,7–1,5 х 2,0–3,0 мкм, за небольшим исключением подвижны, спор и капсул не образуют.
Тинкториальные свойства –
• хорошо окрашиваются анилиновыми красителями,
• Гр«-»
Культуральные свойства.
• Возбудители активно растут и размножаются на обычных питательных средах при температуре от +6 до +46° С (оптимум роста +37°С), и рН 7,2–7,4.
• На простом агаре дают гладкие, круглые, полупрозрачные, выпуклые, влажные (S-форма) и шероховатые, тусклые, сухие, неправильной формы (R-форма) колонии.
• При росте, на бульоне гладкие формы колоний вызывают равномерное помутнение среды, шероховатые формы дают осадок, надосадочная жидкость прозрачна.
Ферментативные свойства.
• Биохимически активны, ферментируют до кислоты и газа глюкозу, мальтозу и маннит, выделяют сероводород, не продуцируют индол, не разжижают желатин (табл. 8).
Токсинообразование.
Возбудители сальмонеллёзов обладают факторами, способствующими развитию заболевания:
1. Фактор адгезии (прилипания сальмонелл к поверхности энтероцита, Ads F);
2. Фактор сцепления (сальмонелл с поверхностью энтероцита, Adr F);
3. Фактор колонизации (CF);
4. Фактор инвазии (IF, интерналин), обеспечивающий проникновение сальмонелл в эпителий кишки..
5. Возбудители сальмонеллёзов способны продуцировать экзотоксины (цитотонины) LT (labile toxin) и ST(stable toxin), обеспечивающие избыточное образование ц-АМФ и ц-ГМФ, что приводит к появлению у больных диареи.
6. Цитотоксин SLT, нарушающий белоксинтезирующие процессы в клетках слизистой оболочки кишечника.
7. Эндотоксины — липополисахариды (ЛПС), освобождающиеся при распаде сальмонелл, являются одним из главных факторов их патогенности.
Антигенная структура.
Сальмонеллы, являющиеся возбудителями пищевых токсикоинфекций (сальмонеллёзов), имеют 2 основных антигенных комплекса:
• О-антиген — соматический, термостабильный, связанный с телом микробной клетки.
• Н- антигены – термолабильный, связанный со жгутиками.
Антигенная структура (формула) наиболее часто вызывающих сальмонеллёз бактерий представлена:
Патогенность для животных.
• Сальмонеллы вызывают энтериты у крупного рогатого скота, поросят, мышей и крыс.
• Ими инфицированы морские птицы (чайки, бакланы) и водоплавающие (утки, гуси), передающие возбудителя трансовариально.
• Сальмонеллы длительно сохраняются во внешней среде: в воде стоячих водоёмов до 5 мес., в мясе и колбасных изделиях от 2 до 4 мес., в замороженном мясе животных – около 6 мес., в замороженных тушках птиц – более года, в сливочном масле – до 4 мес., в сырах – до 1 года, в яичном порошке – от 3 до 9 мес., в пиве – до 2 мес., в почве – до 18 мес.
Патогенез. Источник инфицирования людей — животные, птицы, рыбы, реже больной человек или бактерионоситель.
Механизм передачи —алиментарный, фекально-оральный.
Пути передачи – пищевой (продукты питания), контактно-бытовой (предметы обихода, руки).
Входные ворота инфекции.
1. Сальмонеллы проникают в тонкий кишечник с пищей.
2. Дальнейшие процессы их взаимодействия с эпителиальными клетками слизистой происходят также, как и при взаимодействии с сальмонеллами тифопаратифозной группы.
3. Адгезия на поверхности энтероцитов происходит за счет расположенных на их поверхности рецепторов к моносахарам.
4. После адгезии и колонизации энтероцитов сальмонеллы за счет продуцируемого ими фактора инвазии (интерналин) проникают внутрь эпителиальных клеток слизистой.
5. Процесс проникновения эндоцитозом — сальмонеллы быстро покидают территорию эндосомы с помощью продуцируемого ими фактора F и выходят в цитозоль энтероцитов.
6. Затем, не размножаясь в энтероцитах и не разрушая их, переносятся сквозь эпителиальные клетки с последующим выходом в собственной пластинке слизистой (фаза инфицирования, инкубационный период).
Динамика распространения возбудителя. — Возможны два варианта дальнейшего распространения возбудителей: локальный и генерализованный.
1. Преодолев эпителиальный барьер, проникают в толщу ткани тонкой кишки, где захватываются макрофагами.
2. Внутри макрофагов они размножаются и частично погибают с освобождением эндотоксина, поражающего нервно-сосудистый аппарат кишечника и повышающего проницаемость клеточных мембран => распространение сальмонелл по лимфатическим путям в мезентериальные ЛУ.
3. На соматический, термостабильный, связанный с телом микробной клетки. стадии инфекционный процесс приобретает локализованную (гастритическую, гастроэнтеритическую, гастроэнтероколитическую) форму и может завершиться (локальный вариант).
4. При глубоком нарушении барьерной функции лимфатического аппарата кишечника происходит генерализация процесса, развивается длительная бактериемия, сальмонеллы попадают в различные внутренние органы, вызывая в них дистрофические изменения или формирование вторичных гнойных очагов (тифоподобная и септикопиемическая формы).
Наиболее поражаемые органы. Могут затронуть преимущественно ЖКТ или распространиться на другие внутренние органы – печень, селезенку (холецистит, холангит, абсцессы печени и селезенки).
Механизмы саногенеза.
В преимунную фазу уничтожение сальмонелл наступает вследствие активации комплемента по лектиновому и альтернативному путям. В иммунную фазу заболевания появляющиеся IgM за счёт иммунного лизиса препятствуют проникновению сальмонелл в ткани внутренних органов. У пациентов с дефицитом образования IgM в патологический
процесс вовлекаются внутренние органы. IgG к белкам наружной мембраны сальмонелл образуются в невысоких титрах. Кратковременный иммунитет является типоспецифическим.
Микробиологическая диагностика.
Материал для исследования — кровь больного, испражнения, рвотные массы, моча, промывные воды желудка, желчь и дуоденальное содержимое, гной или экссудат из воспалительных очагов, остатки пищи, смывы с посуды. В случае смерти для исследования берут кусочки паренхиматозных органов (печень, селезенка, почки), кровь из сердца, желчь, мезентериальные лимфатические узлы, костный мозг, отрезки тонкой и толстой кишок с содержимым.
Микроскопический метод. При групповых заболеваниях сальмонеллезом используется метод флюоресцирующих антител (прямой и непрямой) без выделения чистой культуры возбудителя.
Бактериологический метод.
1. Для выделения чистой культуры сальмонелл (гемокультура) производят посев крови в желчный бульон.
2. Рвотные массы, испражнения, секционный материал, гной, спинномозговую жидкость, продукты, смывы сеют на чашки со средой Плоскирева или в среды накопления (желчный бульон, магниевая среда, селенитовая среда), из которой через 6–10 часов делают пересев на среду Плоскирева.
3. Посевы инкубируют.
4. На следующий день их изучают, отбирают бесцветные лактозоотрицательные колонии и пересевают на трехсахарную среду Олькеницкого или скошенный агар для накопления чистой культуры.
5. На 3–4-й день исследования выделенные чистые культуры идентифицируют на средах «пестрого» ряда (Гисса, Рессела), проводят реакцию агглютинации (РА) с адсорбированными групповыми сыворотками (А, В, С, Д, Е).
6. В случае положительного ответа с одной из групп сывороток, проводят РА с адсорбированными О-сыворотками, характерными для данной группы, а затем с монорецепторными Н-сыворотками (неспецифической и специфической фазами) для определения вида и серовара бактерий.
7. Нa 4-й день учитывают изменение сред «пестрого» ряда.
Биологический метод.
1. В первый день исследования производится пероральное заражение белых мышей.
2. Через 1 – 2 суток мыши погибают от септицемии.
3. При вскрытии обнаруживают резко увеличенную селезенку, иногда и печень, из крови и материала внутренних органов (печень, селезенка, лимфоузлы) можно выделить культуры сальмонелл.
Серологический метод. Применяют РНГА с эритроцитарными диагностикумами (О-, Н-) и с цистеиновой или унитиоловой пробой для определения титра IgM и IgG в сыворотках крови людей с хроническим течением заболевания.
Аллергологический метод не применяется.
Профилактика.
Для лечения больных сальмонеллёзами детей и взрослых, санации реконвалесцентов, носителей сальмонелл и с профилактической целью по эпидпоказаниям используется бактериофаг сальмонеллёзный групп А В С Д Е. Он представляет собой смесь фаголизатов сальмонелл паратифа А и В, тифимуриум, гейдельберг, холерасуис, ораниенбург, ньюпорт, дублин, анатум, ньюландс активную в отношении сальмонелл, имеющих наибольшее распространение и относящихся к группам А, В, С, Д, Е.
Специфическая профилактика не разработана из-за обилия серотипов сальмонелл. На основе мутантных штаммов Salmonella typhimurium (G30D и аrоА) созданы вакцины для животных, которые предполагается апробировать и в отношении людей.