6. Микробиологическая диагностика дифтерии. Исследование на носительство дифтерийных бактерий.

Материал для исследования — слизь и пленки из очага воспаления.

Микроскопический метод.

1. Делают мазки материала и окрашивают их метиленовым синим Леффлера или краской Нейссера.

2. Выявляют наличие палочек дифтерии по морфологическим признакам и наличию телец Бабеша-Эрнста — дифференциальный признак для коринебактерий дифтерии.

3. Можно определить в люминесцентном микроскопе — окраска р-ром корифосфина.

*В связи с полиморфизмом возбудителя как самостоятельный диагностический метод не применяется.

Бактериологический метод.

1. Выделение чистой культуры — Посева исследуемого материала на элективные питательные среды для коринебактерий:

• среду с теллуритом (Клауберга II, Германа),

• хинозольную среду Бучина,

• 5% кровяной агар.

2. После появления колоний:

• часть — на среду для определения токсигенности,

• часть — в столбик среды для определения цистиназы.

3. Для идентификации возбудителя исследуют морфологические, культуральные и биохимические свойства культуры и ставят пробу на токсигенность методом преципитации в агаре. Используют метод фаготипирования.

* Для ускоренного обнаружения токсина применяют РНГА с антительным эритроцитарным диагностикумом, РИА и ИФА. Из молекулярно-генетических методов диагностики используют ПЦР.

Идентификация:

- уреаза -

- цистиназа +

- токсин +

Не применяют: Серологический, биологический и аллергологический методы

7. Иммунитет при дифтерии. Серотерапия. Специфическая профилактика дифтерии.

Саногенез.

• Иммунитет — длительный, прочный антитоксический.

• АТ — антитоксины

• АТ к В-ферменту — не позволяют дифтерийному токсину прикрепиться к рецепторам клетки.

• Гуморальный антитоксический иммунитет — не препятствует бактерионосительство.

• Антибактериальный иммунитет — клеточно-опосредованный, серовароспецифичный и малоэффективный.

• Санация бактерионосителей – антибиотики

Серотерапия — введение антитоксической противодифтерийной сыворотки по методу Безредки;

• Должна начинаться немедленно, даже при подозрении на дифтерию.

• Доза и кратность введения зависят от степени тяжести Д.;

• Критерий прекращения введения: уменьшение или исчезновение налетов.

Серотерапия больных дифтерией в зависимости от формы заболевания

Форма	Дозы ПДС и кратность их введения
Легкая	10-40 тыс. МЕ однократно, в/м
Средней тяжести	50-90 тыс. МЕ, в/м, при отсутствии эффекта – через 12 часов еще 20-30 тыс. МЕ в/м
Тяжелая	1-е введение: 90-120 тыс МЕ (½ дозы в/м, ½ дозы в/в капельно на физ.р-ре). Затем через 12 часов введение можно повторить. На курс лечения до 360 тыс. МЕ
Гипертоксическая	1-е введение: 120-150 тыс МЕ (1/3 дозы в/м, 2/3 дозы в/в капельно на физ.р-ре). Затем введение повторяют дважды с интервалом в 8-12 часов. На курс лечения до 450 тыс. МЕ

Профилактика.

• Главная роль — иммунизации.

• Используют дифтерийный анатоксин, входящий в:

• АКДС-вакцину (адсорбированная коклюшно-дифтерийно-стобнячная вакцина),

• АДС (адсорбированный дифтерийно-столбнячный анатоксин),

• АДС-М препарат (адсорбированный дифтерийно-столбнячный анатоксин с уменьшенным содержанием АГ),

• АД-М (адсорбированный дифтерийный анатоксин с уменьшенным содержанием АГ).

• В России также зарегистрированы следующие вакцины:

• Тетракок, предназначенная для профилактики коклюша, дифтерии, столбняка и полиомиелита (Пастер-Мерье, Франция);

• Д.Т.Вакс, содержит дифтерийный и столбнячный анатоксины. Применяется у детей до 6 лет;

• ДТ-адюльт, включает дифтерийный и столбнячный анатоксины (Пастер-Мерье, Франция). Используется у подростков и взрослых.

• Есть вакцины для одновременной иммунизации против дифтерии, столбняка, коклюша и гепатита В: АКДС-В-гепатитная вакцина («Бубо-Кок») и АДС-М-В-гепатитная вакцина («Бубо-М»).

• Вакцинация: 3 мес.; 4,5 мес.; 6 мес.; 18 мес.; 7 лет (АДС-М), 14 лет (АДС-М) и далее каждые 10 лет (АДС-М)

Лечение.

• Раннее лечение (до 3х дней, тк после токсин связан с тканями)— специфической противодифтерийной лошадиной сывороткой.

• Разработан противодифтерийный иммуноглобулин человека для внутривенного применения.

• Назначают антибиотики, оказывающие влияние на дифтерийные бактерии.