Добавил:
Upload Опубликованный материал нарушает ваши авторские права? Сообщите нам.
Вуз: Предмет: Файл:
ГЕРОПРОТЕКТОРЫ... С.С. КОНОВАЛОВ....doc
Скачиваний:
24
Добавлен:
15.11.2019
Размер:
869.89 Кб
Скачать

2.1. Физико-химические свойства

Анализ результатов исследования компонентного соста­ва нуклеопротеиновых комплексов методом гель-хрома­тографии показал, что они состоят из двух групп молеку­лярных ассоциатов (табл. 1) [Остерман Л. А., 1985; Feinstein J., 1971]. Молекулярная масса компонентов фракций препаратов, выделенных из близких по проис­хождению тканей, находится в близком соответствии. В среднем, высокомолекулярные фракции НПК харак­теризуются молекулярной массой в диапазоне от 180 до 250 кДа, а низкомолекулярные — от 3 до 10 кДа (исклю­чение составляют только препараты, выделенные из ти­муса и эпифиза).

На рис. 2а и 2 б приведены гель-хроматографические кри­вые некоторых НПК. При их анализе было отмечено, что практически все препараты (кроме корамина) содержат достаточно большое количество высокомолекулярных компонентов. Острота выходных пиков свидетельствова­ла о том, что в высокомолекулярной фракции содержит­ся небольшое количество веществ с разной молекулярной массой. Для низкомолекулярных фракций характерно широкое распределение по молекулярным массам. Наличие большого

Таблица 1

Молекулярная масса компонентов нуклеопротеиновых комплексов

Наименование

Средняя молекуляр­ная масса высокомо­лекулярных фракций,

кДа

Средняя молекуляр­ная масса низкомо­лекулярных фракций,

кДа

Просталамин

208

5,0

Тимусамин

250

15,8

Эпифамин

224

16,2

Хондрамин

190

4,1

Вазаламин

180

4,5

Бронхаламин

187

5,0

Корамин

190

3,2

Гепатамин

200

5,0

Вентрамин

224

4,5

Тесталамин

186

4,8

Панкрамин

224

4,6

Церебрамин

220

8,0

Супренамин

198

5,1

Тирамин

179

4,8

количества низкомолекулярных компонен­тов может быть связано с присутствием высокоактивных гидролитических ферментов в перерабатываемой ткани на этапе щелочного гидролиза.

Наличие углеводных компонентов, присутствующих в НПК, оценивали по содержанию сиаловой кислоты в свободном и связанном состоянии. Сиаловая (N-ацетил-нейраминовая) кислота входит в состав гликопротеинов и гликолипидов. В составе гликопротеинов она соединена

Таблица 2

Содержание сиаловых кислот в нуклеопротеиновых комплексах, выделенных из различных тканей

Ткань, из которой выделены НПК

Содержание сиаловых кислот, мг/г

свободной

связанной

Кора головного мозга

4,88±0,15

6,0±0,12

Сосуды

1,8±0,1

2,95±0,08

Тимус

0,46+0,04

0,52+0,05

Печень

0,16±0,03

0,41±0,05

Семенники

0,11±0,01

0,76+0,02

Сердце

0,1±0,02

0

Предстательная железа

1,4±0,06

1,4±0,04

гликозидной связью с боковыми углеводными цепями или непосредственно с гидроксилсодержащими аминокисло­тами — серином и тирозином. В составе гликолипидов она соединена гликозидной связью со звеньями галактозы. Отщепление связанной сиаловой кислоты проводили нейраминидазой в реакции энзиматического гидролиза с по­следующей окраской свободной сиаловой кислоты тиобар-битуровым методом [Чернова И. А. и соавт., 1987].

Результаты анализа, приведенные в табл. 2, показали, что особенно высоким содержанием сиаловых кислот от­личаются НПК, выделенные из коры головного мозга. Это вполне объяснимо: сиалсодержащие ганглиозиды составля­ют значительную часть вещества нейронов. Эта группа гли­колипидов концентрируется на эндоплазматических мем­бранах, преимущественно в области окончаний дендритов. Среди других препаратов обращают на себя внимание НПК, выделенные из тканей сосудов и простаты, содержа­щие значительное количество связанных сиаловых кислот, что обусловлено большим числом эндотелиальных клеток в этих тканях, для мембран которых характерно повышен­ное содержание сиалсодержащих гликолипидов.

Рис. 2а. Гель-хроматография нуклеопротеиновых комплексов

Анализ содержания белка и нуклеиновых кислот в НПК, выделенных из различных органов и тканей, измеренного спектрофотометрическим методом, показал, что препара­ты содержат от (18,8±1,7) до (38,7±1,8) % белка и от (5,9±1,8) до (15,1±2,3) % нуклеиновых кислот (табл. 3).

Таким образом, исследование показало, что в препара­тах НПК содержится три группы веществ: липиды, белки

Рис. 26. Гель-хроматография нуклеопротеиновых комплексов

и нуклеиновые кислоты. Соотношение этих компонентов зависит от ткани, из которой выделен НПК. Изучение пре­паратов методом гель-хроматографии свидетельствует о том, что независимо от типа ткани выделенные НПК со­стоят из высокомолекулярных (180-250 кДа) и низкомо­лекулярных (4-16 кДа) фракций, причем в каждой фрак­ции присутствуют белковые и нуклеиновые компоненты.

Таблица 3