VIII. Определение групп крови по системе аbo

Определение групп крови системы АВО включает выявление антигенов А и В в эритроцитах стандартными антителами и выявление агглютининов a и b в сыворотке или плазме исследуемой крови стандартными эритроцитами. Антигены А и В определяют с помощью Цоликлонов анти–А и анти–В.

Цоликлоны не являются продуктами клеток человека и поэтому исключена контаминация препаратов вирусами гепатита и СПИД. Моноклональные анти–А и анти–В реагенты проверены всеми широко используемыми методами определения групп крови. Результаты показали надежность определения группы крови системы АВО с помощью моноклональных реагентов. Авидность (время наступления реакции агглютинации и ее выраженность) у Цоликлонов анти–А и анти–В выше чем у изогемагглютинирующих АВО сывороток, особенно в случае слабо выраженных антигенов эритроцитов.

Определение группы крови АВО производится в нативной крови, стабилизированной с помощью применяемых консервантов (глюгицир, цитроглюкофосфат, гепарин), и крови взятой из пальца. Определение группы крови производится в помещении с хорошим освещением при температуре от +15 до +25С. Реагенты не должны храниться открытыми, не следует пользоваться реагентами, если в них имеются нерастворимые хлопья или помутнение. Для каждого реагента используют свою маркированную («анти–А», «анти–В») пипетку. На планшет или пластинку Цоликлоны анти–А и анти–В наносят по одной большой капле (0,1 мл) под соответствующими надписями. Рядом с каплями антител наносят исследуемую кровь по одной маленькой капле (0,01 мл). Антитела и кровь смешивают тщательно вымытым сухим шариком или стеклянной палочкой, которую промывают и досуха вытирают перед размешиванием каждой капли. Наблюдение за ходом реакции проводят при легком покачивании пластинки или планшета в течение не более 2,5 минут. Результат реакции может быть положительным или отрицательным. Положительный результат выражается в агглютинации (склеивании) эритроцитов. Агглютинаты видны невооруженным глазом в виде мелких красных агрегатов, быстро сливающихся и образующих крупные хлопья вплоть до одного большого агглютината. При отрицательной реакции капля остается равномерно окрашенной в красный цвет, агглютинаты в ней не обнаруживаются. Агглютинация с Цоликлонами анти–А и анти–В обычно наступает в первые 3–5 сек., наблюдения следует вести 2,5 мин. ввиду возможности более позднего наступления агглютинации с эритроцитами, содержащими слабые разновидности антигенов А и В.

Таблица 5

Оценка результатов реакции агглютинации с цоликлонами анти–а и анти–в

Реакция исследуемых эритроцитов с Цоликлоном анти–А анти–В	Реакции исследуемой сыворотки со стандартными эритроцитами группы А(II) В(III)	Исследуемая кровь принадлежит к группе
1. – –	+ +	О (I)
2. + –	– +	А (II)
3. – +	+ –	В (III)
4. + +	– –	АВ (IV)

Цоликлоны анти–А и анти–В в жидкой форме выпускаются во флаконах или ампулах, в которых кроме реагента содержатся также консервант (0,1 % азида натрия) и соответствующий краситель. Цоликлоны анти–А (розового цвета) и анти–В (синего цвета) выпускаются во флаконах или ампулах по 20, 50, 100 и 200 доз. Срок хранения – 2 года в холодильнике при температуре от +2 до +8С. Могут храниться в течение одного месяца в темном помещении при температуре от +10 до +25С и относительной влажности 65±15%.