- •Рецензент проф. В.Д. Бовт
- •Зміст лабораторного заняття:
- •Техніка безпеки при роботі у біохімічній лабораторії
- •З метою уникнення травм, опіків, нещасних випадків забороняється:
- •Перша домедична допомога
- •Модуль 1. «Обмін вуглеводів. Обмін білків, амінокислот» Заняття № 1, 2
- •Лабораторна робота №1
- •Хід роботи:
- •Аналіз проводиться у відповідності за схемою, наведеною у таблиці.
- •Заняття № 3, 4
- •Лабораторна робота №2
- •Хід роботи:
- •Лабораторна робота №3
- •Хід роботи:
- •У пробірки відміряють послідовно, відповідно таблиці, біологічну рідину і робочі розчини. Для зменшення похибки аналізу рекомендується до обговореного порядку змішування розчинів.
- •Лабораторна робота №4
- •Хід роботи:
- •Лабораторна робота №5
- •Хід роботи:
- •Заняття № 6
- •Заняття №7
- •Заняття №8
- •Глосарій
- •Тестовий контроль тема: Загальні закономірності обміну речовин. Біологічне окиснення
- •Тема: обмін вуглеводів
- •Тема: обмін білків, амінокислот
- •Тема: обмін ліпідів
- •Тема: Обмін води та мінеральних солей
- •Тема: біохімія крові
- •2. Склад плазми крові:
- •Альбуміни – це:
- •4. Функція альбумінів:
- •5. Після проведення електрофорезу на бумазі в плазмі крові виявляють альбуміни в наступному %-ному співвідношенні:
- •6. Глобуліни − це:
- •7. Фібриноген − це:
- •8. Ендогенними інгібіторами протеолітичних ферментів являються:
- •9. Імуноглобуліни, які здатні активувати систему комплемента:
- •10. Кріоглобуліни − це:
- •15. Інтерферон – це:
- •Тема: Механізм м’язового скорочення
- •9. Актин − це:
- •10. Тропоміозин − це:
- •18. В результаті другої стадії ферментативної реакції м'язового скорочення відбувається:
- •19. В результаті третьої стадії ферментативної реакції м'язового скорочення відбувається:
- •20. В результаті четвертої стадії ферментативної реакції м'язового скорочення відбувається:
- •29. В м'язах-розгиначах є:
- •30. Для будови міосимпластів невірні положення:
- •Тема: Біологічні мембранИ
- •Роль плазматичної мембрани:
- •2. Роль ядерної мембрани:
- •3. Роль ендоплазматичного ретикулуму:
- •4. Роль мембрани аппарату Гольджі:
- •5. Роль мембрани лізосом:
- •15. Ендоцитоз − це:
- •16. Екзоцитоз − це:
- •17. Проста дифузія характеризується:
- •18. Полегшена дифузія характеризується:
- •19. До активного транспорту відносяться:
- •20. Аденілатциклазна система включає:
- •21. Стимулюючий і інгібуючий білок (g-білок) є:
- •22. Фермент аденілатциклаза складається з:
- •23. Субстратом для аденілатциклази є:
- •24. Інозитолфосфатна система включає:
- •Еталони відповідей до тестових питань тема: Загальні закономірності обміну речовин. Біологічне окиснення
- •Тема: обмін вуглеводів
- •Тема: обмін білків, амінокислот
- •Тема: обмін ліпідів
- •Тема: Обмін води та мінеральних солей
- •Тема: біохімія крові
- •Тема: Механізм м’язового скорочення
- •Тема: Біологічні мембранИ
- •Рекомендована література Основна
- •Додаткова
- •Для нотаток
- •Хімічні процеси в живИх організмАх Методичні вказівки
Хід роботи:
Складаємо робочу схему проведення досліду.
Аналіз проводять у відповідності зі схемою, наведеною в таблиці.
Розрахунок концентрації холестерину здійснюють за формулою:
С = 4,665 ∙ Е досл. пр. / Е кал. пр.
де: С – концентрація холестерину у дослідній пробі, ммоль;
4,665 – концентрація холестерину у калібрувальній пробі, ммоль/л;
Е досл. пр. − оптична щільність дослідної проби, од. опт. щільності;
Е кал. пр. – оптична щільність калібрувальної проби, од. опт. щільності.
Контроль якості: достовірність одержуваних результатів контролюють за допомогою атестованих контрольних сироваток “Ліонорм” (Чехія) або “Біоконт С”.
Нормальна концентрація холестерину у сироватці крові – 1,7 – 8,3 ммоль/л, (10 – 50) мг/дкл.
Таблиця
Відміряти у пробірку, мл |
Робочий розчин |
Аналізуємий розчин |
Фізіологічний розчин |
Калібрува-льний розчин холестерину |
Показники оптичної щільності
|
|
Е кал. пр. |
Е досл. пр. |
|||||
1 |
2 |
3 |
4 |
5 |
6 |
7 |
Холоста проба (контроль) |
4,30 |
– |
0,1 |
– |
|
|
Калібрувальна проба |
4,30 |
– |
– |
0,1 |
|
|
Дослідна проба 1. |
4,30 |
0,1 |
– |
– |
|
|
2. |
4,30 |
0,1 |
– |
– |
|
|
3. |
4,30 |
0,1 |
– |
– |
|
|
4. |
4,30 |
0,1 |
– |
– |
|
|
5. |
4,30 |
0,1 |
– |
– |
|
|
6. |
4,30 |
0,1 |
– |
– |
|
|
7. |
4,30 |
0,1 |
– |
– |
|
|
8. |
4,30 |
0,1 |
– |
– |
|
|
9. |
4,30 |
0,1 |
– |
– |
|
|
10. |
4,30 |
0,1 |
– |
– |
|
|
До робочого розчину повільно, по стінці пробірки, додають не гемолізовану сироватку або калібрувальний розчин. Пробірку струшують 10-12 разів та витримують у термостаті при плюс 37 0С протягом 20 хв. Вимірюють оптичну щільність дослідної Е досл. пр. проти холостої проби (контроль). Забарвлення стійке протягом 20 хв. |
Висновок до лабораторної роботи.
Заняття № 6
Тема: Обмін вуглеводів. Обмін білків, амінокислот. Обмін ліпідів. (Семінар).
Мета заняття: засвоїти всі процеси обміну вуглеводів, білків, амінокислот, ліпідів; навчитися проводити взаємозв’язок між обмінами цих речовин.
Домашнє (письмове) завдання
Завдання 1. Скласти схему метаболізму вуглеводів на окремому аркуші. Схема включає: перетравлення вуглеводів у шлунково-кишковому тракті; синтез глікогену; розщеплення глікогену (глікогеноліз); гліколіз; цикл Кребса; гліконеогенез; пентозофосфатний цикл; дихотомічний шлях розкладу глюкозо-6-фосфату; дихальний ланцюг.
Завдання 2. Скласти схему метаболізму білків на окремому аркуші. Схема включає: Ферментативний гідроліз білків в органах травлення; загальні шляхи розпаду амінокислот в організмі; утворення аміаку; орнітиновий цикл; взаємодія амінокислот, глюкогенні і кетогенні амінокислоти.
Завдання 3. Скласти схему метаболізму ліпідів на окремому аркуші. Схема включає: перетравлення ліпідів у шлунково-кишковому тракті; β-окиснення вищих жирних кислот; окиснення гліцерину; синтез холестерину.
Контрольні запитання до семінару
Загальні закономірності обміну речовин. Біологічне окиснення.
Перетравлення вуглеводів їжі: перетравлення полісахаридів за участю слини; панкреатична амілаза; полісахариди, які перетравлюються та не перетравлюються; перетравлення олігосахаридів.
Всмоктування вуглеводів в кишечник. Потрапляння глюкози в клітини.
Гліколіз (субклітинна локалізація, етапи: неокислювальний, гліколітичної оксидоредукції, реакції, ферменти, енергетичний вихід і механізм утворення АТФ, біологічна роль).
Гліколіз і окиснення пірувату: окислювальне декарбоксилювання піровіноградної кислоти (субклітинна локалізація, реакції, ферменти, коферменти, біологічна роль); вихід АТФ.
Глюконеогенез − шлях утворення глюкози із молочної кислоти.
Регуляція гліколізу під дією гормонів (інсулін, адреналін, глюкагон, глюкокортикоїди) і глюконеогенезу.
Пентозофосфатний шлях (субклітинна локалізація, етапи, реакції, ключові ферменти, метаболіти, біологічна роль).
Тканинне дихання: комплекси дихального ланцюга. Уміти включати субстрати циклу Кребса (ізоцитрат, α-кетоглутарат, малат, сукцинат) в дихальний ланцюг. Роль НАДФ+ в клітині.
Глікоген тканин, м’язів, печінки.
Метаболізм глікогену в печінці.
Глікогеноліз. Фосфороліз глікогену.
Синтез глікогену в скелетних м’язах.
Принцип визначення концентрації глюкози у біологічних рідинах глюкозооксидазним методом і клініко-діагностичне значення даного методу.
Перетравлення білків: шлункове перетравлення, протеоліз в кишечнику.
Всмоктування амінокислот із кишечнику. Незамінні амінокислоти для людини.
Метаболізм амінокислот в печінці: переамінування, дезамінування, відновне амінування, декарбоксилювання.
Метаболізм амоніаку. Фіксація амоніаку. Шляхи знешкодження амоніаку в організмі.
Синтез сечовини (орнітиновий цикл).
Виведення амінного азоту з організму. Класифікація живих організмів по виведенню амінного азоту.
Метаболізм пуринових і піримідинових нуклеопротеїдів, хромопротеїдів.
Принцип визначення концентрації сечовини у біологічних рідинах і клініко-діагностичне значення даного методу.
Перетравлення ліпідів їжі: перетравлення ліпідів в шлунку, в кишечнику; роль жовчі; панкреатична ліпаза.
Всмоктування ліпідів в кишечнику; фактори, які впливають на всмоктування ліпідів.
Метаболізм триацигліцеролів.
α і ω-Окиснення, як вторинний шлях обміну жирних кислот.
β-Окиснення жирних кислот: реакції активації, роль карні тину в транспорті ацильних залишків жирних кислот.
Загальний вихід високоенергетичного фосфату при окисленні жирних кислот (на прикладі пальмітоїл-КоА).
Ацетил-КоА як центральний метаболіт. Шляхи його споживання в клітинах.
Синтез жирних кислот.
Регуляція метаболізму ліпідів: регуляція синтезу і депонування ліпідів.
Біологічне значення холестерину.
Біосинтез і транспорт холестерину і його регуляція.
Роль різних органів і тканин в обміні ліпідів.
Принцип визначення концентрації холестерину у біологічних рідинах (за методом Ілька) і клініко-діагностичне значення даного методу.
Взаємозв’язок між обмінами вуглеводів, білків, ліпідів.