- •Рецензент проф. В.Д. Бовт
- •Зміст лабораторного заняття:
- •Техніка безпеки при роботі у біохімічній лабораторії
- •З метою уникнення травм, опіків, нещасних випадків забороняється:
- •Перша домедична допомога
- •Модуль 1. «Обмін вуглеводів. Обмін білків, амінокислот» Заняття № 1, 2
- •Лабораторна робота №1
- •Хід роботи:
- •Аналіз проводиться у відповідності за схемою, наведеною у таблиці.
- •Заняття № 3, 4
- •Лабораторна робота №2
- •Хід роботи:
- •Лабораторна робота №3
- •Хід роботи:
- •У пробірки відміряють послідовно, відповідно таблиці, біологічну рідину і робочі розчини. Для зменшення похибки аналізу рекомендується до обговореного порядку змішування розчинів.
- •Лабораторна робота №4
- •Хід роботи:
- •Лабораторна робота №5
- •Хід роботи:
- •Заняття № 6
- •Заняття №7
- •Заняття №8
- •Глосарій
- •Тестовий контроль тема: Загальні закономірності обміну речовин. Біологічне окиснення
- •Тема: обмін вуглеводів
- •Тема: обмін білків, амінокислот
- •Тема: обмін ліпідів
- •Тема: Обмін води та мінеральних солей
- •Тема: біохімія крові
- •2. Склад плазми крові:
- •Альбуміни – це:
- •4. Функція альбумінів:
- •5. Після проведення електрофорезу на бумазі в плазмі крові виявляють альбуміни в наступному %-ному співвідношенні:
- •6. Глобуліни − це:
- •7. Фібриноген − це:
- •8. Ендогенними інгібіторами протеолітичних ферментів являються:
- •9. Імуноглобуліни, які здатні активувати систему комплемента:
- •10. Кріоглобуліни − це:
- •15. Інтерферон – це:
- •Тема: Механізм м’язового скорочення
- •9. Актин − це:
- •10. Тропоміозин − це:
- •18. В результаті другої стадії ферментативної реакції м'язового скорочення відбувається:
- •19. В результаті третьої стадії ферментативної реакції м'язового скорочення відбувається:
- •20. В результаті четвертої стадії ферментативної реакції м'язового скорочення відбувається:
- •29. В м'язах-розгиначах є:
- •30. Для будови міосимпластів невірні положення:
- •Тема: Біологічні мембранИ
- •Роль плазматичної мембрани:
- •2. Роль ядерної мембрани:
- •3. Роль ендоплазматичного ретикулуму:
- •4. Роль мембрани аппарату Гольджі:
- •5. Роль мембрани лізосом:
- •15. Ендоцитоз − це:
- •16. Екзоцитоз − це:
- •17. Проста дифузія характеризується:
- •18. Полегшена дифузія характеризується:
- •19. До активного транспорту відносяться:
- •20. Аденілатциклазна система включає:
- •21. Стимулюючий і інгібуючий білок (g-білок) є:
- •22. Фермент аденілатциклаза складається з:
- •23. Субстратом для аденілатциклази є:
- •24. Інозитолфосфатна система включає:
- •Еталони відповідей до тестових питань тема: Загальні закономірності обміну речовин. Біологічне окиснення
- •Тема: обмін вуглеводів
- •Тема: обмін білків, амінокислот
- •Тема: обмін ліпідів
- •Тема: Обмін води та мінеральних солей
- •Тема: біохімія крові
- •Тема: Механізм м’язового скорочення
- •Тема: Біологічні мембранИ
- •Рекомендована література Основна
- •Додаткова
- •Для нотаток
- •Хімічні процеси в живИх організмАх Методичні вказівки
Хід роботи:
Складаємо робочу схему проведення досліду.
У пробірки відміряють послідовно, відповідно таблиці, біологічну рідину і робочі розчини. Для зменшення похибки аналізу рекомендується до обговореного порядку змішування розчинів.
Розрахунок концентрації сечовини за формулою:
С = 16,65 ∙ Е досл. пр. / Е кал. пр.
де: С – концентрація сечовини в пробі, ммоль, ;
16,65 – калібрувальна концентрація сечовини, ммоль/л;
Е досл. пр. − оптична щільність дослідної проби, од. опт. щільності;
Е кал. пр. – оптична щільність калібрувальної проби, од. опт. щільності.
Контроль якості: достовірність одержуваних результатів контролюють за допомогою атестованих контрольних сироваток “Ліонорм” (Чехія) або “Біоконт С”.
Нормальна концентрація сечовини у сироватці крові – 2,5 – 7,5 ммоль/л.
Висновок до лабораторної роботи.
Таблиця
Відміряти у пробірку, мл |
Аналізує-мий матеріал |
Калібру-вальний розчин |
Фізіоло- гічний розчин |
Розчин тіосеми- карбазиду |
Розчин діацетил-моноок-симу |
Показники оптичної щільності
|
|
Е кал. пр. |
Е досл. пр. |
||||||
1 |
2 |
3 |
4 |
5 |
6 |
7 |
8 |
Холоста проба (контроль) |
– |
– |
0,02 |
2,00 |
2,00 |
|
|
Калібрува-льна проба |
– |
0,02 |
– |
2,00 |
2,00 |
|
|
Дослідна проба 1. |
0,02 |
– |
– |
2,00 |
2,00 |
|
|
2. |
0,02 |
– |
– |
2,00 |
2,00 |
|
|
3. |
0,02 |
– |
– |
2,00 |
2,00 |
|
|
4. |
0,02 |
– |
– |
2,00 |
2,00 |
|
|
5. |
0,02 |
– |
– |
2,00 |
2,00 |
|
|
6. |
0,02 |
– |
– |
2,00 |
2,00 |
|
|
7. |
0,02 |
– |
– |
2,00 |
2,00 |
|
|
8. |
0,02 |
– |
– |
2,00 |
2,00 |
|
|
9. |
0,02 |
– |
– |
2,00 |
2,00 |
|
|
10. |
0,02 |
– |
– |
2,00 |
2,00 |
|
|
Пробірки закривають ковпачком (або накривають алюмінієвою фольгою), перемішують вміст і одночасно поміщають у бурхливо киплячу водяну баню рівно на 10 хв. Потім пробірки швидко охолоджують у проточній воді. Виміряють оптичну щільність дослідної проби (Е досл.) і калібрувальної проби (Е кал.) проти холостої проби. Забарвлення стабільне протягом 15 хв. Якщо після нагрівання розчин у пробірці з дослідною пробою мутний, то його центрифугують протягом 5 хв. або депротеїнують розчином трихлороцтової кислоти.
|
Модуль 2. «Обмін ліпідів. Обмін води та мінеральних солей. Біохімія крові.
Механізм М'язового скорочення.
Біологічні мембрани»
Заняття № 5
Тема: Перетравлення, всмоктування, ресинтез ліпідів. Обмін ліпідів.
Цілі заняття:
− сформувати уявлення про механізм перетравлення ліпідів в шлунку, в кишечнику; роль жовчі; всмоктування ліпідів їжі;
− сформувати уявлення про метаболізм триацигліцеролів;
− сформувати уявлення про α і ω-окиснення жирних кислот;
− сформувати уявлення про β-окиснення жирних кислот;
− сформувати уявлення про ацетил-КоА;
− сформувати уявлення про синтез вищих жирних кислот;
− сформувати уявлення про регуляцію метаболізму ліпідів;
− сформувати уявлення про біосинтез і транспорт холестерину і його регуляцію;
− сформувати уявлення про роль різних органів і тканин в обміні ліпідів;
− засвоїти методику визначення концентрації холестерину у біологічних рідинах (за методом Ілька) і клініко-діагностичне значення даного методу.
Домашнє (письмове) завдання
Завдання 1. Опишіть етапи перетравлення і всмоктування ліпідів (в вигляді схеми).
Завдання 2. Заповніть таблицю «Перетравлення ліпідів»:
|
Панкреатична ліпаза |
Ліпопротеїнліпаза |
ТАГ-ліпаза |
1 |
2 |
3 |
4 |
Локалізація реакції |
|
|
|
Активатори реакції |
|
|
|
Основні продукти реакції |
|
|
|
Доля продуктів реакції |
|
|
|
Завдання 3. Заповніть таблицю «Види окиснення жирних кислот»:
Вид окиснення |
Локалізація |
Види окислювальних жирних кислот |
1 |
2 |
3 |
α-окиснення |
|
|
ω-окиснення |
|
|
β-окиснення |
1) |
|
2) |
|
Контрольні запитання до теми
Перетравлення ліпідів їжі: перетравлення ліпідів в шлунку, в кишечнику; роль жовчі; панкреатична ліпаза.
Всмоктування ліпідів в кишечнику; фактори, які впливають на всмоктування ліпідів.
Метаболізм триацигліцеролів.
α і ω-Окиснення, як вторинний шлях обміну жирних кислот.
β-Окиснення вищих жирних кислот: реакції активації, роль карнітину в транспорті ацильних залишків вищих жирних кислот.
Загальний вихід високоенергетичного фосфату при окисленні вищих жирних кислот (на прикладі пальмітоїл-КоА).
Ацетил-КоА як центральний метаболіт. Шляхи його споживання в клітинах.
Синтез жирних кислот.
Регуляція метаболізму ліпідів: регуляція синтезу і депонування ліпідів.
Біологічне значення холестерину.
Біосинтез і транспорт холестерину і його регуляція.
Роль різних органів і тканин в обміні ліпідів.
Принцип визначення концентрації холестерину у біологічних рідинах (за методом Ілька) і клініко-діагностичне значення даного методу.