IV. Аналитические, качественные реакции аминокислот и пептидов.
Многие качественные реакции в настоящее время для обнаружения
-аминокислот и пептидов.
1. Способность к образованию комплексных солей с ионами тяжелых металлов:
··
2NH2-CH-C=O+Cu2++2Н+
ROH
··
Комплексная соль Cu2+хорошо растворима в воде и окрашена в ярко-синий цвет, что может быть использовано как качественная реакция на- аминокислоты.
2. Образование оснований Шиффа:
H
-C=O+H2N-CH2-COOHH2C-NH-CH2-COOHH2O+
глицин
HOH
+ CH2=N-CH2-COOH
метилениминокислота
Реакция лежит в основе метода формольного титрования по Зеренсену. Сами аминокислоты вследствие амфотерности не могут быть оттитрованы щелочью. Иминокислота содержит свободную карбоксильную группу и может быть определена количественно титрованием щелочью.
3. Взаимодействие с 2,4-динитрофторбензолом – днфб (реактивом Сенджера):
+H2N-CH-COOH
–HF
R
ДНФБ -аминокислота ДНБ-производное
ДНБ-производное аминокислоты может быть выделено и идентифицировано хроматографически. Метод служит для определения аминокислотной последовательности белка.
4. Нингидриновая реакцияобусловлена наличием- аминогруппы, качественная реакция на- аминокислоты, пептиды и белки:
t°
+NH2-CH-COOH
2
R
- аминокислота
нингидрин
H
+ CO2
+ 3H2O
+ R-CHO
продукт сине-фиолетового цвета
Глоссарий
Амфотерность– способность соединения проявлять и кислотные, и основные свойства.
Первичная структура пептидов и белков– это аминокислотная последовательность, т.е. порядок чередования-аминокислотных остатков в молекуле.
Вторичная структура пептидов и белков– это пространственная ориентация основной полипептидной цепи. Основные виды -- спираль и–структура.
Изоэлектрическое состояние молекулы– состояние молекулы аминокислоты, пептида или белка, при котором суммарный заряд на молекуле равен нулю.
Изоэлектрическая точка– значение рН водного раствора аминокислоты, пептида или белка, при котором молекула достигает изоэлектрического состояния.
Пептидная связь (группа)– это группа атомов -СО–NН - , регулярно повторяющаяся в полимерной цепи молекулы.