- •Часть 3
- •Isbn 5-7243-0283-7 Коллектив авторов, 2009 химия и обмен липидов
- •1. Тема 17. Строение и классификация липидов. Переваривание липидов в желудочно - кишечном тракте
- •Место проведения - кафедра биохимии Продолжительность занятия - 180 минут
- •3. Конкретные задачи:
- •6. Вопросы для самоподготовки:
- •7. Этапы занятия и контроль их усвоения.
- •Номенклатура жирных кислот
- •Критерии пригодности жира в пищу
- •Лабораторная работа № 11 Определение кислотного числа солевым методом
- •Определение перекисных соединений в составе жира
- •Акролеиновая проба
- •Определение концентрации триацилглицеридов (таг) в сыворотке крови энзиматическим колориметрическим методом
- •Клинико-диагностическое значение определения тг в сыворотке крови
- •Тестовый контроль по теме «Строение, классификация липидов. Переваривание липидов в желудочно-кишечном тракте».
- •1. Тема 18. Тканевой обмен липидов
- •3. Конкретные задачи:
- •6. Вопросы для самоподготовки:
- •Этапы занятия и контроль их усвоения.
- •Синтаза жирных кислот
- •Синтаза жк
- •Функциональная единица синтазного комплекса
- •Тестовый контроль по теме «Тканевой обмен липидов».
- •Конечные продукты липолиза:
- •Установите правильную последовательность. Этапы биосинтеза таг связаны с образованием метаболитов:
- •Этапы -окисления жирных кислот:
- •Ответы:
- •1. Тема 19. Холестерин. Строение, свойства, биологическая роль. Липопротеины крови. Определение холестерина в сыворотке крови.
- •3. Конкретные задачи:
- •6. Вопросы для самоподготовки:
- •7. Техническое оснащение занятия.
- •8.Этапы занятия и контроль их усвоения.
- •Методы количественного определения холестерина в сыворотке крови. Клинико-диагностическое значение*
- •Лабораторная работа №12 Количественное определение холестерина в сыворотке крови ферментативным методом
- •Количественное определение холестерина в сыворотке крови по модифицированному методу Златкис-Зака*
- •Тестовый контроль по теме «Обмен холестерина. Липопротеины»
- •Тест 5
- •Тест 15
- •Статины снижают активность гмг-КоА-редуктазы по механизму ______________ ____________ ингибирования.
- •1. Тема 20. Нарушения липидного обмена
- •3. Конкретные задачи:
- •6. Вопросы для самоподготовки:
- •Тестовый контроль по теме: «Нарушение обмена липидов»
- •(Для каждого вопроса – несколько правильных ответов, каждый ответ может быть использован один раз)
- •(Для каждого вопроса – несколько правильных ответов, каждый ответ может быть использован один раз, несколько раз или не использован совсем)
- •Дополните ответ.
- •Дополните ответ.
- •Дополните ответ.
- •Установите соответствие (для каждого вопроса – несколько правильных ответов, каждый ответ может быть использован один раз)
- •Ответы по теме: «нарушения обмена липидов»
- •Тестовый контроль по теме «Биологические мембраны»
- •Тема 21. Программа контрольной работы по разделу «химия и обмен липидов»
- •Обмен белков
- •1. Тема 22. Переваривание белков в желудочно-кишечном тракте. Качественный и количественный анализ желудочного сока. Промежуточный обмен аминокислот
- •3. Конкретные задачи
- •6. Вопросы для самоподготовки
- •7. Этапы занятия и контроль их усвоения
- •Методы исследования секреторной функции желудка
- •Название реакции: Фермент:
- •Тест 30.
- •Ответы по теме: «переваривание белков в жкт. Качественный и количественный анализ желудочного сока. Тканевой обмен аминокислот»
- •1. Тема 23. Обезвреживание аммиака в организме. Остаточный азот крови. Диагностическое значение определения мочевины в крови и в моче
- •3. Конкретные задачи:
- •6. Вопросы для самоподготовки:
- •7. Этапы занятия и контроль их усвоения.
- •Количественное определение мочевины в крови и моче, клинико-диагностическое значение
- •Лабораторная работа №13 Количественное определение мочевины в сыворотке крови уреазным методом
- •Количественное определение мочевины в моче цветной реакцией с парадиметиламинобензальдегидом
- •Количественное определение креатинина в крови и моче
- •Тестовый контроль по теме «Обезвреживание аммиака. Остаточный азот крови»
- •1. Тема 24. Возможные нарушения белкового обмена при действии факторов внешней среды и различных патологических состояниях
- •3. Конкретные задачи:
- •6. Вопросы для самоподготовки:
- •7. Этапы занятия и контроль их усвоения.
- •Задача 14
- •Нормальные величины азотсодержащих компонентов крови и мочи
- •Тестовый контроль по теме «Нарушения белкового обмена»
- •Изониазид вызывает нарушение:
- •Продукционная азотемия возникает в результате:
- •Ретенционная азотемия возникает в результате:
- •Ответы по теме: “нарушение обмена белков”
- •1. Тема 25: Строение нуклеиновых кислот. Биосинтез белка. Обмен нуклеопротеинов.
- •3. Конкретные задачи:
- •6. Вопросы для самоподготовки:
- •Молекулярные механизмы мутаций
- •Виды мутаций
- •Тесты по теме «Молекулярные механизмы передачи генетической информации»
- •Ответы по теме: “молекулярные механизмы передачи генетической информации”
- •Тема 26. Программа контрольной работы по разделу "обмен белков"
- •Оглавление Химия и обмен липидов
- •Обмен белков
Лабораторная работа №13 Количественное определение мочевины в сыворотке крови уреазным методом
Принцип метода: мочевина под действием фермента уреазы разлагается на СО2 и NН3, последний в реакции с салицилатом натрия и гипохлоридом натрия в присутствии нитропруссида натрия образует окрашенный продукт, интенсивность окраски которого пропорциональна концентрации мочевины в пробе.
Реактивы и оборудование: 1) реагент 1 – раствор уреазы в фосфатном буфере; раствор салицилата натрия и нитропруссида натрия; 2) реагент 2 – раствор гипохлорита натрия и гидроокиси натрия; 3) образцы сыворотки крови; 4) калибровочный раствор мочевины с концентрацией 5,0 ммоль/л; 5) пробирки, пипетки; 6) термостат; 7) ФЭК.
Ход работы:
|
Опытная проба |
Калибровочная проба |
Контрольная проба |
Реагент 1 |
1,0 мл |
1,0 мл |
1,0 мл |
Сыворотка |
0,02 мл |
- |
- |
Калибратор |
- |
0,02 мл |
- |
Дистиллированная вода |
- |
- |
0,02 мл |
Пробы перемешать и инкубировать 5 мин при температуре 370С, затем добавить:
Реагент 2 |
1,0 мл |
1,0 мл |
1,0 мл |
После добавления реагента 2 пробы перемешать и инкубировать 5 мин при температуре 370С.
Измерить оптическую плотность опытной (Д) и калибровочной (Дк) проб против контрольной пробы при λ = 610 нм. Окраска стабильна в течение 2 час.
Результаты: Д1=
Д2= Дк=
Для расчета концентрации мочевины использовать формулу:
С=Д1/Дк х 5,0 (ммоль/л)
С1=
С2= Норма : 2,5 – 8,3 ммоль/л
Выводы:
Количественное определение мочевины в моче цветной реакцией с парадиметиламинобензальдегидом
Принцип метода: мочевина, взаимодействуя с парадиметиламинобензальдегидом в кислой среде, образует окрашенное в желто-зеленый цвет соединение. Интенсивность окраски пропорциональна концентрации мочевины в пробе. Оптическую плотность раствора определяют методом фотоэлектроколориметрии.
Реактивы и оборудование:1) 2%-водный раствор парадиметиламино-бензальдегида (пДАБ), 2) образцы мочи, 3) пробирки, 4) пипетки, 5) ФЭК.
Ход работы: к 0,5 мл мочи (предварительно разведенной в 100 раз) добавить 2,5 мл 2% водного раствора пДАБ и тщательно перемешать. Через 15 мин определить оптическую плотность раствора на ФЭК, используя синий светофильтр (=400 нм) и кюветы с рабочим расстоянием 10 мм. В качестве раствора сравнения использовать контроль, содержащий 0,5 мл воды и 2,5 мл 2% водного раствора пДАБ. Определить содержание мочевины в пробе (мг/мл) с использованием калибровочного графика. Рассчитать содержание мочевины в моче в
ммоль/сутки.
Результаты: D1= С1= мг/мл
D2= С2= мг/мл
Формула: С . В . 1,5 . 16,6 = (ммоль/сут)
где С – концентрация мочевины мг/мл
(по калибровочному графику)
В – разведение мочи (100 раз)
1,5 - среднесуточный диурез (л)
16,6 – коэффициент пересчета в единицах СИ