Вопросы для самопроверки:

1. Строение и функциональное значение кожи рыб.

2. Механизм образования слизи, ее состав и значение.

3. Строение и функции чешуи.

4. Физиологическая роль регенерации кожи и чешуи.

5. Роль пигментации и окраски в жизнедеятельности рыб.

Раздел 2: Материалы лабораторных работ.

1. Состав и свойства желудочного сока.

Цель: Изучение состава и условий действия ферментов желудочного сока.

Материал и оборудование: штатив с набором пробирок, водяная баня или термостат, чашка со льдом или холодильник, лакмусовая бумага, стеклограф, спиртовка, ножницы, пинцет, скальпель, пипетки на 1-2 мл, 5% раствор пепсина, желудочный сок, фибрин, вареный белок куриного яйца, спирт этиловый, углекислый кальций, 10 % NaOH , 2 % CuS0₄ , 0,5 % HCl, молоко свежее.

Задание:

1. Ознакомьтесь с теоретической частью и ходом работы.

2. Используя реактивы и методику, изложенную в ходе работы, проведите опыты.

3. Полученные результаты внесите в таблицу и сделайте выводы.

Теоретическое обоснование

Желудочный сок представляет собой прозрачную, бесцветную жидкость, главнейшими ферментами которой являются, пепсин, химозин и желудочная липаза. Пепсин -это основной протеолетический фермент, который синтезируется и выделяется главными клетками слизистой оболочки желудка в виде пепсиногена. Под действием соляной кислоты он превращается в активную форму. Этот фермент гидролизует белки до стадии полипептидов: пептонов и частично до аминокислот. Оптимум действия пепсина определяется температурой около 40 градусов по Цельсию и реакцией среды соответствующей рН=2,2. Химозин или сычужный фермент вызывает створаживание молока при слабокислой, нейтральной и щелочной реакциях, а желудочная липаза расщепляет в основном эмульгированные жиры. Кроме того, желудочный сок содержит и другие ферменты, обладающие слабой аминолитической и липолитической активностью, соляную кислоту, слизь, минеральные вещества и воду.

Ход работы.

При работе с натуральным желудочным соком часть его нейтрализуйте прибавлением углекислого кальция до нейтральной среды рН = 7, при работе с пепсином одну часть его растворите в воде (из расчета 5г на 1 литр воды), другую часть - в 0,5% растворе соляной кислоты для получения соответственно нейтрального (рН = 7) и кислого (рН = 2-3) искусственного сока. Активную реакцию рН проконтролируйте лакмусовой бумагой. Пронумеруйте 5 пробирок стеклографом. В первую пробирку налейте 1мл 0,5% раствора соляной кислоты; во вторую - 1мл натурального желудочного сока (рН = 2) или раствора пепсина с соляной кислотой (рН = 2); в третью - 1 мл натурального, предварительно прокипяченного и охлажденного до комнатной температуры, желудочного сока или раствор пепсина с кислотой с аналогичной термической обработкой; в четвертую - 1мл натурального желудочного сока, предварительно нейтрализованного углекислым кальцием до рН = 7 или раствор пепсина без кислоты (рН = 7); в пятую -предварительно охлажденного до 0 градусов по Цельсию натурального желудочного сока (рН = 2) или пепсина с кислотой (рН = 2). Активную реакцию среды контролируйте лакмусовой бумагой.

Во все приготовленные таким образом пробирки с растворами внесите по небольшому одинаковому кусочку фибрина или яичного белка и первые четыре поместите на водяную баню или в термостат с t = 38-40 градусов по Цельсию, а пятую - в лед или холодильник на 30 минут. Периодически наблюдайте, что происходит с фибрином или белком в пробирках. По истечении указанного времени данные наблюдений занесите в таблицу, а затем проделайте Биуретовую реакцию. Для чего к исследуемым растворам прибавьте пипеткой 3-5 капель 10 % раствора гидроксида натрия и 1-2 капли раствора сульфата меди и тщательно перемешайте. При наличии белка в растворе наблюдается сине-фиолетовая окраска. Продукты расщепления белка, придают ему красно-фиолетовый цвет. Результаты титрования запишите в таблицу и на основании результатов опыта сделайте вывод об оптимальных условиях действия протеолитических ферментов желудочного сока.

Таблица: Условия и результаты эксперимента с протеолитическими ферментами желудочного сока.

№ пробирки	pH	Температура	Характер раствора (белка) в конце опыта	Биуретовая реакция
1 2 3 4 5

Контрольные вопроси:

1. Сущность и значение пищеварения.

2. Ферменты, входящие в состав желудочного сока.

3. Железы в слизистой оболочке желудка.

4. Оптимальные условия действия ферментов желудочного сока.