Задача 1. Определение границ осмотической резистентности эритроцитов

Наибольшее значение имеет определение границ осмотической резистентности. Эритроциты в гипертонических солевых растворах сморщиваются вследствие диффузии воды из эритроцита в направлении большего содержания солей, а в гипотонических – набухают в связи с поступлением воды в эритроцит вследствие осмоса (осмос – движение растворителя через полупроницаемую мембрану в направлении большей концентрации солей). При значительном набухании наступает гемолиз. Показателем прочности эритроцита может быть их осмотическая резистентность в гипотонических растворах с известной концентрацией хлорида натрия (концентрация изотонического раствора NaCl 0,9%).

О с н а щ е н и е: 8 пробирок, штатив, растворы NaC разной концентрации, кровь.

С о д е р ж а н и е р а б о т ы: В восемь пробирок с раствором хлорида натрия разной концентрации (0,9%, 0,8%,0,7%,0,6%,0,5%,0,45%,0,4%,0,3%) вносят один и тот же объем крови (0,3 мл). Через час определяют начало гемолиза по легкому порозовению раствора, а полный гемолиз – по интенсивной красной окраске раствора. Полностью гемолинизированная кровь прозрачна («лаковая кровь»). В норме минимальная резистентность колеблется между 0,48%–0,46%, максимальная – между 0,34%–0,32%.

О ф о р м л е н и е п р о т о к о л а. 1. Занесите данные исследования в тетрадь. Зарегистрируйте пробирки, отметьте гемолиз.

2. Постройте график кривой осмотической резистентности эритроцитов по полученным данным.

Концентрация NaCl, %

3. Сделайте вывод о причинах и виде гемолиза эритроцитов.

Вывод

Задача 2. Химический гемолиз

О с н а щ е н и е: пробирки, физиологический раствор, нашатырный спирт, эфир, соляная кислота, кровь.

С о д е р ж а н и е р а б о т ы: Три пробирки, заполненные 5 мл физиологического раствора ставят в штатив. В каждую пробирку добавляют по 3 капли крови. Затем в первую пробирку добавляют 0,5 мл нашатырного спирта, во вторую – 0,5 мл эфира и в третью – 0,5 мл раствора, соляной кислоты. Через час отмечают изменение цвета и прозрачности в пробирках.

О ф о р м л е н и е п р о т о к о л а. 1. Занесите результаты исследования в тетрадь.

Задача 3. Определение скорости оседания эритроцитов

Оседание эритроцитов – их свойство осаждаться на дне сосуда (капилляра), при сохранении крови в несвертывающемся состоянии в виде так называемых монетных столбиков. Основным фактором влияющим на образование столбиков является белковый состав плазмы. Все белковые молекулы (фибриноген, α₁-глобулин, α₂-глобулин, β-глобулин) в разной степени снижает Z-потенциал эритроцитов – отрицательный заряд мембран, способствующий взаимному отталкиванию эритроцитов и поддержанию их во взвешенном состоянии. Наибольшее влияние оказывают фибриноген, иммуноглобулины, гаптоглобин. Изменения СОЭ имеют большое диагностическое и прогностическое значение.

О с н а щ е н и е: прибор Панченкова, лимоннокислый натрий, скарификатор или образцы крови.

С о д е р ж а н и е р а б о т ы.

Метод Панченкова. Определение СОЭ производят в специальных пипетках, имеющих просвет 1 мм и длину 100 мм. Капилляр для взятия крови промывают 5% раствором лимоннокислого кальция в него набирают 25 мл³ этого раствора, который выпускают на предметное стекло. Затем в капилляр до метки «К» набирают кровь и выпускают на это же стекло. Кровь, смешанную с раствором цитрата натрия в соотношении 4:1, набирают в эту пипетку и устанавливают в вертикальном положении на штативе Панченкова на 1 час (не более!). Через час определяют величину оседания по столбику плазмы над осевшими эритроцитами;

деление капиллярной пипетки, соответствующее границе плазмы и эритроцитов, записывают как СОЭ в мм/ч.

О ф о р м л е н и е п р о т о к о л а. 1. Занесите данные исследования в тетрадь.

2. Сделайте вывод о соответствии полученных результатов нормативным.

Домашнее задание:

§ В тетради для самостоятельной работы письменно ответьте на вопросы, предложенные преподавателем.

§ Выберите из «Словаря терминов» «Руководства…» не менее 10, относящихся к теме «Кровь». Выпишите, выучите и умейте их объяснить.

§ Запишите в тетради для самостоятельной работы основные физиологические показатели крови.

Подпись преподавателя

ЗАНЯТИЕ 35,36

Определение количества лейкоцитов в крови. Лейкоцитарная формула. Лейкоцитарный индекс. Определение количества тромбоцитов в крови. Анализ основных этапов и фаз свертывания крови. Определение времени свертывания крови.

Задача 1.Определение количества лейкоцитов .

В норме количество лейкоцитов в 1 л крови колеблется в пределах 4 * л – 9* л.

Лейкоцитоз: а) перераспределительный может возникнуть при физической нагрузке, шоке, агональном состоянии, вследствие операции и пр.; б) реактивный может быть вызван интоксикацией, воспалительным процессом, инфекционным заболеванием; в) стойкий наблюдается при лейкозах.

Лейкопения: а) функциональная может иметь место при брюшном тифе, вирусных заболеваниях, голодании, анафилактических состояниях, после приема амидопирина, сульфаниламидных препаратов, после воздействия ионизирующего проникающего излучения и др.; б) органическая возникает при остром лейкозе, апластическом состоянии костного мозга (апластическая анемия) и др.

О с н а щ е н и е: пробирка, камера Горяева, микроскоп, уксусная кислота 3-5 %, 1 % раствор метиленового синего.

Содержание работы.