Добавил:
Upload Опубликованный материал нарушает ваши авторские права? Сообщите нам.
Вуз: Предмет: Файл:
Практикум по физиологии 1.docx
Скачиваний:
37
Добавлен:
04.11.2018
Размер:
254.75 Кб
Скачать

Задача 2. Определение концентрации гемоглобина

Важнейшими методами являются колориметрические.

О с н а щ е н и е: гемометр Сали, 0,1% раствор HCI, дистилированная вода, капилляр.

С о д е р ж а н и е р а б о т ы.

Гематиновый метод (метод Сали). Основан на превращении гемоглобина при добавлении к крови хлористоводородной кислоты в хлорид гематина коричневого цвета. Используют гемометр Сали, состоящий из трех пробирок одинакового диаметра.

Одна (средняя) порбирка – пустая, две другие содержат стандартный раствор солянокислого гематина определенной окраски. В градуированную пробирку до нижней метки наливают 0,1% раствор хлористоводородной кислоты. В капиллярную пипетку до линейки 0,1 набирают кровь и медленно выпускают ее под слой кислоты. Содержимое пробирки перемешивают и оставляют на 5—10 мин. Затем полученный раствор хлорида гематина темно-коричневого цвета разводят водой до цвета стандарта, интенсивность окраски которого соответствует идеальной норме – содержанию гемоглобина 166,7 г/л (16,67г%). Как только цвет исследуемой жидкости полностью сравняется с цветом стандартов в гемометре Сали, отмечают, какому делению шкалы градуированной контрольной пробирки соответствует нижний мениск жидкости: это и будет искомое количество гемоглобина. В настоящее время метод считается рутинным, в клиниках применяется редко.

Цианметгемоглобиновый фотометрический метод является наиболее точным. Основан на превращении гемоглобина в цианметгемоглобин при добавлении к крови специального реактива (раствор Драбкина). Показания фотоэлектроколориметра соответствует определенному содержанию в крови гемоглобина.

О ф о р м л е н и е п р о т о к о л а. 1) Определите концентрацию гемоглобина в образце крови, предлагаемой для исследования. 2) Занесите данные в тетрадь:

3) Сделайте заключение о соответствии полученных вами данных нормативным.

Заключение

Задача 3. Вычисление цветового показателя .

Цветовым показателем (ЦП) называют условную величину, характеризующую степень насыщения гемоглобином каждого эритроцита. Этот показатель можно вычислить, зная содержание гемоглобина в исследуемой крови и количество эритроцитов в 1 мкл этой же крови, а также по приведенной ниже номограмме (метод является рутинным; в клинике не используется, но в условиях студенческого практикума применяется с обучающей целью).

Содержание работы.

3.1. Определение цветового показателя по номограмме

На шкалах "в" и "б" (стр 326 руководства по практич. занятиям) найдите точки, соответствующие количеству эритроцитов и гемоглобина, найденным в предыдущих заданиях, и соедините их прямой. По точке пересечения на шкале "а" найдите ЦП.

На рис. 24.4. (руководства по практич. занятиям)приведен пример показателя величины цветового показателя при количестве эритроцитов 3,5 млн и содержании гемоглобина по Сали 70 %. Находят точки, соответствующие этим значениям на шкалах "б" и "в", и соединяют их прямой. Прямую продолжают до пересечения со шкалой "а". Точка пересечения отражает величину цветового показателя; в данном случае он составляет 1,0.

Оформление протокола. Сравните ЦП, вычисленный по номограмме, с ЦП, который подсчитан на основании определенного вами процента гемоглобина и числа эритроцитов.