- •Пцр - анализ в клинической лаборатории
- •Р е ц е н з е н т ы
- •К о л л е к т и в а в т о р о в
- •Оглавление
- •Введение
- •История открытия и разработка метода пцр
- •Механизм полимеразной цепной реакции
- •Праймеры
- •Полимераза
- •Пробоподготовка (выделение днк/рнк)
- •Амплификация
- •Факторы, влияющие на эффективность амплификации
- •Использование «горячего старта» при постановке пцр
- •Приборное обеспечение
- •Регистрация результатов
- •Возможности лабораторной диагностики инфекционных болезней
- •Преимущества пцр перед другими методами клинической лабораторной диагностики
- •Универсальность процедуры выявления различных возбудителей
- •Специфичность
- •Чувствительность
- •Актуальность ответа (быстрота получения результата анализа)
- •Возможность экспертизы
- •Исследуемый биологический материал
- •Локализация возбудителей
- •Правила забора материала и транспортировки клинического материала для пцр-диагностики
- •Кровь, плазма, сыворотка
- •Соскоб с эпителиальных клеток для выявления днк возбудителей инфекций, передающихся половым путем
- •Факторы, влияющие на эффективность выявления урогенитальных патогенных микроорганизмов с помощью нк
- •Правила подготовки больного для пцр-диагностики урогенитальных инфекций
- •Мазок с конъюнктивы, слизистой зева и дыхательных путей
- •Гепатит а (hаv), е (hеv)
- •Гепатит в (hвv)
- •Гепатит d (вгd)
- •Гепатит с (hcv)
- •Использование пцр в пульмонологии и фтизиатрии
- •Применение пцр в урогинекологической практике
- •Основные клинические синдромы и урогенитальные инфекции
- •Генитальный герпес вызывает вирусы простого герпеса I и II типов
- •Криминология
- •Установление отцовства
- •Персонализированная медицина
- •Клонирование генов
- •Онкология
- •Применение пцр в практике службы крови
- •Управление качеством пцр-исследований
- •Преаналитический этап
- •Аналитический этап
- •Контроль качества пцр-исследований
- •Контроль реакции амплификации
- •Внутренний контроль вко
- •Проблема контаминации
- •Действия при возникновении контаминации нуклеиновыми кислотами
- •Постаналитический этап
- •Заключение
- •Вопросы для самопроверки
- •Ответы на вопросы для самопроверки
- •Список литературы
- •Приложение
- •Возможности пцр-диагностики в гуз иоккдц
- •Комплекс исследований на заболевания,
- •Передающиеся половым путем (зппп), 2ж3001
- •Хламидиоз, 2ж3002
- •Туберкулез, 2жз003
- •Гепатит с, 2ж3004
- •Микоплазма гоминис, 2ж3005
- •Трихомониаз, 2ж3006
- •Гепатит в, 2ж3007
- •Уреаплазма, 2ж3009
- •Папиллома (впч с определением онкогенности), 2ж3010
- •Гонорея, 2ж3011
- •Гепатит с количественный, 2ж3012
- •Генотипирование вируса гепатита с, 2ж3013
- •Микоплазма гениталиум, 2ж3015
- •Цмв, 2ж3019
- •Вирус Эпштейна-Барр, 2ж3020
- •Вирус герпеса I-го и II-го типов, 2ж3021
- •Вирус герпеса 6-го типа, 2ж3022
- •Токсоплазмы гондии, 2ж3023
- •Энтеровирус, 2ж3027
- •Гепатит в количественный, 2ж3031
- •Пцр - анализ в клинической лаборатории
- •664079, Г. Иркутск, м-н Юбилейный, 100, к. 302.
Токсоплазмы гондии, 2ж3023
Исследуемый материал: кровь, соскоб, моча, биоптат, мокрота, спинномозговая жидкость (ликвор). Забор крови осуществляется в пробирку с антикоагулянтом (ЭДТА). Кусочек ткани объемом примерно 2 мм3, соскоб, мазок или спинномозговую жидкость 0,2 мл поместить в стерильную пробирку типа "Эппендорф" объемом 1,5 мл. Мокрота и моча собираются утром в домашних условиях в одноразовые пластиковые пробирки объемом 10–15 мл.
Токсоплазмоз – паразитарное заболевание человека и животных, вызываемое токсоплазмами. В эпителии тонкого кишечника кошки и других кошачьих токсоплазмы проходят сложный жизненный цикл, завершающийся образованием мелких яйцевидных ооцист. Они могут вызывать у человека и животных тяжелое заболевание – токсоплазмоз. Источник инфекции – различные виды (свыше 180) домашних и диких животных (собаки, кошки, кролики, хищники, травоядные, грызуны и др.) и птиц. Заражение человека происходит при употреблении мясных продуктов и яиц, не прошедших достаточную термическую обработку. Не исключена возможность заражения при попадании возбудителя на слизистые оболочки и поврежденные кожные покровы трансмиссивным и другими путями. Наблюдается и внутриутробное заражение. Токсоплазмоз протекает с субфебрильной температурой, головной болью, увеличением лимфоузлов и печени, понижением работоспособности, может сопровождаться поражением глаз, сердца, нервной и других систем и органов. Заболевание может протекать и в латентной форме. Для распознавания используют методы серодиагностики и внутрикожную аллергическую пробу, ПЦР - диагностика позволяет определить наличие в организме живого паразита по присутствию его ДНК в клиническом образце.
Энтеровирус, 2ж3027
Исследуемый материал: кровь с ЭДТА, ликвор, соскоб. Забор крови осуществляется в пробирку с антикоагулянтом (ЭДТА). Соскоб или спинномозговую жидкость (0,2 мл) поместить в стерильную пробирку типа "Эппендорф" объемом 1,5 мл.
Энтеровирусы относятся к семейству пикарновирусов. Энтеровирусная инфекция характеризуется многообразием клинических проявлений — от легких лихорадочных состояний до тяжелых миокардитов, менингитов, менингоэнцефалитов. Энтеровирусы кислотоустойчивы и относительно стабильны при низких значениях рН (<3,0), что позволяет им выживать в кислой среде желудка, а отсутствие оболочки делает их резистентными к действию желчных кислот. Энтеровирусная инфекция характеризуется многообразием клинических проявлений: от легких лихорадочных состояний до тяжелых миокардитов, менингитов, менингоэнцефалитов. Первичный очаг размножения локализован в эпителии рта, глотки, тонкой кишки, а также в лимфоидных тканях кольца Пирогова-Вальдейера и пейеровых бляшках. Возможно вторичное проникновение вируса из эпителия слизистых оболочек в лимфоидные ткани и кровоток (первичная вирусемия), а затем в различные органы и ЦНС. Основной путь передачи – фекально-оральный, возможен контактный путь передачи возбудителя с отделяемым носоглотки и через воду загрязненных водоемов.
Для энтеровирусной инфекции характерна сезонность с подъемом заболеваемости в летние месяцы. Инфицированный человек выделяет вирус в течение пяти недель. Естественный хозяин вируса – человек. Сложность этиологической расшифровки ИФА методом обусловлена значительным числом серологических вариантов. Этот метод недостаточно чувствителен и специфичен, требует исследования парных сывороток. Перспективным направлением лабораторной диагностики энтеровирусной инфекции является прямой метод выявления вируса с помощью ПЦР.