- •Пцр - анализ в клинической лаборатории
- •Р е ц е н з е н т ы
- •К о л л е к т и в а в т о р о в
- •Оглавление
- •Введение
- •История открытия и разработка метода пцр
- •Механизм полимеразной цепной реакции
- •Праймеры
- •Полимераза
- •Пробоподготовка (выделение днк/рнк)
- •Амплификация
- •Факторы, влияющие на эффективность амплификации
- •Использование «горячего старта» при постановке пцр
- •Приборное обеспечение
- •Регистрация результатов
- •Возможности лабораторной диагностики инфекционных болезней
- •Преимущества пцр перед другими методами клинической лабораторной диагностики
- •Универсальность процедуры выявления различных возбудителей
- •Специфичность
- •Чувствительность
- •Актуальность ответа (быстрота получения результата анализа)
- •Возможность экспертизы
- •Исследуемый биологический материал
- •Локализация возбудителей
- •Правила забора материала и транспортировки клинического материала для пцр-диагностики
- •Кровь, плазма, сыворотка
- •Соскоб с эпителиальных клеток для выявления днк возбудителей инфекций, передающихся половым путем
- •Факторы, влияющие на эффективность выявления урогенитальных патогенных микроорганизмов с помощью нк
- •Правила подготовки больного для пцр-диагностики урогенитальных инфекций
- •Мазок с конъюнктивы, слизистой зева и дыхательных путей
- •Гепатит а (hаv), е (hеv)
- •Гепатит в (hвv)
- •Гепатит d (вгd)
- •Гепатит с (hcv)
- •Использование пцр в пульмонологии и фтизиатрии
- •Применение пцр в урогинекологической практике
- •Основные клинические синдромы и урогенитальные инфекции
- •Генитальный герпес вызывает вирусы простого герпеса I и II типов
- •Криминология
- •Установление отцовства
- •Персонализированная медицина
- •Клонирование генов
- •Онкология
- •Применение пцр в практике службы крови
- •Управление качеством пцр-исследований
- •Преаналитический этап
- •Аналитический этап
- •Контроль качества пцр-исследований
- •Контроль реакции амплификации
- •Внутренний контроль вко
- •Проблема контаминации
- •Действия при возникновении контаминации нуклеиновыми кислотами
- •Постаналитический этап
- •Заключение
- •Вопросы для самопроверки
- •Ответы на вопросы для самопроверки
- •Список литературы
- •Приложение
- •Возможности пцр-диагностики в гуз иоккдц
- •Комплекс исследований на заболевания,
- •Передающиеся половым путем (зппп), 2ж3001
- •Хламидиоз, 2ж3002
- •Туберкулез, 2жз003
- •Гепатит с, 2ж3004
- •Микоплазма гоминис, 2ж3005
- •Трихомониаз, 2ж3006
- •Гепатит в, 2ж3007
- •Уреаплазма, 2ж3009
- •Папиллома (впч с определением онкогенности), 2ж3010
- •Гонорея, 2ж3011
- •Гепатит с количественный, 2ж3012
- •Генотипирование вируса гепатита с, 2ж3013
- •Микоплазма гениталиум, 2ж3015
- •Цмв, 2ж3019
- •Вирус Эпштейна-Барр, 2ж3020
- •Вирус герпеса I-го и II-го типов, 2ж3021
- •Вирус герпеса 6-го типа, 2ж3022
- •Токсоплазмы гондии, 2ж3023
- •Энтеровирус, 2ж3027
- •Гепатит в количественный, 2ж3031
- •Пцр - анализ в клинической лаборатории
- •664079, Г. Иркутск, м-н Юбилейный, 100, к. 302.
Гонорея, 2ж3011
Исследуемый материал: соскоб урогенитальный или из конъюнктивы.
Соскоб поместить в стерильную пробирку типа "Эппендорф" объемом 1,5 мл. При вялотекущих и хронических инфекциях урогенитального тракта рекомендуется применять провокации (кроме химических).
Исследуемый материал должен быть без примесей крови и слизи.
3а 3–5 суток до забора материала необходимо прекратить прием химиопрепаратов и лечебные процедуры.
Гонорея – инфекционное заболевание, передаваемое половым путем, возбудителем которого является гонококк (Neisseria gonorrhoeae). Гонореей наиболее часто страдают лица 20–30 лет. В большинстве случаев заражение происходит при половом контакте (вагинальном, анальном, оральном). Как правило, источником заражения бывают женщины, т.к. заболевание у них может протекать бессимптомно и трудно диагностируется. Бытовое заражение (через белье, полотенце, мочалку, посуду, воду в бассейне) встречается крайне редко, т.к. гонококковая инфекция не может существовать вне организма человека. Более того, бытовой способ заражения не дает возможности необходимому количеству гонококков попасть в организм. При этом заболевании поражаются слизистые мочеиспускательного и цервикального каналов, что приводит у женщин к воспалению шейки матки, а у мужчин к нарушению мочеиспускания. Независимо от пола длительное течение гонореи без соответствующего лечения приводит к бесплодию. Возможно заражение новорожденного от больной матери в процессе родов. У детей, зараженных во время родов гонококком, поражаются глаза, что может приводить к слепоте.
Neisseria gonorrhoeae является абсолютным патогеном, поэтому обнаружение этого возбудителя в биологическом материале свидетельствует о наличии инфекционного процесса и требует назначения лечения. Симптомы заболевания появляются на 3–5 сутки с момента заражения. У женщин появляются желтовато-белые выделения, боль внизу живота и межменструальные кровотечения, однако возможно и полное отсутствие каких-либо симптомов. У мужчин первичной формой инфекции является гонорейный уретрит, для которого характерны зуд и жжение наружного отверстия мочеиспускательного канала, которые усиливаются при мочеиспускании. Далее начинаются обильные гнойные выделения, а также сильное покраснение и отек наружного отверстия уретры. Все половые партнеры больного гонореей должны пройти обследование, а в случае необходимости, и лечение. Подтвердить отсутствие гонококковой инфекции можно только лабораторно. В Российской Федерации регламентированными методами диагностики гонококковой инфекции являются микроскопия (МС) окрашенного по Грамму препарата и бактериологический посев (БП), однако многочисленные зарубежные исследования показали, что диагностическая чувствительность указанных методов уступает современным молекулярно-биологическим тестам, основанным на методах амплификации нуклеиновых кислот (ПЦР).
Гепатит с количественный, 2ж3012
Исследуемый материал: кровь с ЭДТА. Забор крови осуществляется в пробирку с антикоагулянтом (ЭДТА). Наиболее информативным параметром отклика пациента на терапию является уровень вирусной нагрузки. Ее понижение в случае проводимой терапии является явным маркером того, что пациент хорошо реагирует на выбранные лекарственные препараты и их дозу. В случае, если проводимая терапия не дает результата и в течение 3-х месяцев не происходит значимого уменьшения уровня вирусной нагрузки (в 100 и более раз), обычно рекомендуется увеличение дозы или смена препарата и схемы лечения.
Количественное определение РНК вируса гепатита С в плазме крови является абсолютно необходимым исследованием при мониторинге течения заболевания и проводимой терапии. Наблюдение уровня виремии во время лечения позволяет врачам более информировано вести пациента, что в свою очередь повышает вероятность благоприятного ответа.
Обнаружение в сыворотке крови РНК HCV является "золотым стандартом" диагностики, свидетельствующим о продолжающейся репликации HCV.