- •Пцр - анализ в клинической лаборатории
- •Р е ц е н з е н т ы
- •К о л л е к т и в а в т о р о в
- •Оглавление
- •Введение
- •История открытия и разработка метода пцр
- •Механизм полимеразной цепной реакции
- •Праймеры
- •Полимераза
- •Пробоподготовка (выделение днк/рнк)
- •Амплификация
- •Факторы, влияющие на эффективность амплификации
- •Использование «горячего старта» при постановке пцр
- •Приборное обеспечение
- •Регистрация результатов
- •Возможности лабораторной диагностики инфекционных болезней
- •Преимущества пцр перед другими методами клинической лабораторной диагностики
- •Универсальность процедуры выявления различных возбудителей
- •Специфичность
- •Чувствительность
- •Актуальность ответа (быстрота получения результата анализа)
- •Возможность экспертизы
- •Исследуемый биологический материал
- •Локализация возбудителей
- •Правила забора материала и транспортировки клинического материала для пцр-диагностики
- •Кровь, плазма, сыворотка
- •Соскоб с эпителиальных клеток для выявления днк возбудителей инфекций, передающихся половым путем
- •Факторы, влияющие на эффективность выявления урогенитальных патогенных микроорганизмов с помощью нк
- •Правила подготовки больного для пцр-диагностики урогенитальных инфекций
- •Мазок с конъюнктивы, слизистой зева и дыхательных путей
- •Гепатит а (hаv), е (hеv)
- •Гепатит в (hвv)
- •Гепатит d (вгd)
- •Гепатит с (hcv)
- •Использование пцр в пульмонологии и фтизиатрии
- •Применение пцр в урогинекологической практике
- •Основные клинические синдромы и урогенитальные инфекции
- •Генитальный герпес вызывает вирусы простого герпеса I и II типов
- •Криминология
- •Установление отцовства
- •Персонализированная медицина
- •Клонирование генов
- •Онкология
- •Применение пцр в практике службы крови
- •Управление качеством пцр-исследований
- •Преаналитический этап
- •Аналитический этап
- •Контроль качества пцр-исследований
- •Контроль реакции амплификации
- •Внутренний контроль вко
- •Проблема контаминации
- •Действия при возникновении контаминации нуклеиновыми кислотами
- •Постаналитический этап
- •Заключение
- •Вопросы для самопроверки
- •Ответы на вопросы для самопроверки
- •Список литературы
- •Приложение
- •Возможности пцр-диагностики в гуз иоккдц
- •Комплекс исследований на заболевания,
- •Передающиеся половым путем (зппп), 2ж3001
- •Хламидиоз, 2ж3002
- •Туберкулез, 2жз003
- •Гепатит с, 2ж3004
- •Микоплазма гоминис, 2ж3005
- •Трихомониаз, 2ж3006
- •Гепатит в, 2ж3007
- •Уреаплазма, 2ж3009
- •Папиллома (впч с определением онкогенности), 2ж3010
- •Гонорея, 2ж3011
- •Гепатит с количественный, 2ж3012
- •Генотипирование вируса гепатита с, 2ж3013
- •Микоплазма гениталиум, 2ж3015
- •Цмв, 2ж3019
- •Вирус Эпштейна-Барр, 2ж3020
- •Вирус герпеса I-го и II-го типов, 2ж3021
- •Вирус герпеса 6-го типа, 2ж3022
- •Токсоплазмы гондии, 2ж3023
- •Энтеровирус, 2ж3027
- •Гепатит в количественный, 2ж3031
- •Пцр - анализ в клинической лаборатории
- •664079, Г. Иркутск, м-н Юбилейный, 100, к. 302.
Цмв, 2ж3019
Исследуемый материал: кровь, соскобы (мазки) со слизистых оболочек урогенитального тракта, осадок клеток первой порции утренней мочи, биоптаты внутренних органов, мокрота, спинномозговая жидкость, слюна, грудное молоко, бронхоальвеолярный лаваж. Забор крови осуществляется в пробирку с антикоагулянтом (ЭДТА). Кусочек ткани объемом примерно 2 мм3, соскоб, мазок или спинномозговую жидкость 0,2 мл поместить в стерильную пробирку типа "Эппендорф" объемом 1,5 мл. Мокрота и моча собираются утром в домашних условиях в одноразовые пластиковые пробирки объемом 10–15 мл.
Возбудитель цитомегаловирусной инфекции (ЦВМ) принадлежит к семейству герпесвирусов 5-го типа. Вирус имеет сродство к ткани слюнных желез и при локализованных формах обнаруживается в этих железах. Заражение цитомегаловирусом происходит в быту: воздушно-капельным и контактным путем, половым путем, при переливании крови и трансплантации донорских органов, трансплацентарным путем, инфицированием ребенка в послеродовом периоде через грудное молоко от больной матери.
Наиболее часто ЦМВ-инфекция проявляется как: ОРВИ, бронхиты, "беспричинные" пневмонии, плохо поддающиеся антибиотикотерапии. В этом случае больные жалуются на слабость, общее недомогание, быструю утомляемость, головные боли, насморк, воспаление и увеличение слюнных желез, с обильным отделением слюны и белесоватыми налетами на деснах и языке. Генерализованная форма ЦМВ-инфекции с поражением внутренних (паренхиматозных) органов. Наблюдается воспаление печеночной ткани, надпочечников, селезенки, поджелудочной железы, почек. Поражение органов мочеполовой системы у мужчин и женщин проявляется симптомами хронического неспецифического воспаления.
Нередки поражение сосудов глаза, стенок кишечника, головного мозга и периферических нервов.
Патология беременности, плода и новорожденного: вероятность заражения ребенка цитомегаловирусом достаточно высока, если инфицирование матери произошло во время беременности. Однако наступление беременности с уже имеющейся латентной инфекцией не всегда приводит к заражению плода. У таких женщин заражение плода может произойти только при обострении латентной инфекции с развитием вирусемии. ЦМВ – инфекция новорожденных может стать причиной желтухи, увеличения печени и селезенки, кровоизлияний во внутренние органы, различных симптомов поражения нервной системы.
Возбудитель цитомегаловируса Cytomegalovirus hominis, попадая в организм один раз, остается там навсегда.
Вирус Эпштейна-Барр, 2ж3020
Исследуемый материал: кровь, соскоб, мазок, моча, биоптат, мокрота, спинномозговая жидкость. Забор крови осуществляется в пробирку с антикоагулянтом (ЭДТА). Кусочек ткани объемом примерно 2 мм3, соскоб, мазок или спинномозговую жидкость 0,2 мл поместить в стерильную пробирку типа "Эппендорф" объемом 1,5 мл. Мокрота и моча собираются утром в домашних условиях в одноразовые пластиковые пробирки объемом 10–15 мл.
Вирус Эпштейна-Барр (EBV) принадлежит к семейству герпесвирусов 4 (Human herpesvirus HHV- 4). EBV — острое вирусное заболевание, характеризующееся лихорадкой, поражением зева, лимфатических узлов, печени, селезенки и своеобразными изменениями состава крови. Относится к ДНК-содержащим лимфопролиферативным вирусам. Вирус Эпштейна-Барр является причиной инфекционного мононуклеоза, гепатита, волосистой лейкоплакии, синдрома Стивенса – Джонсона. С ним также связывают развитие лимфомы Беркитта – рака лимфоузлов и носоглотки и Лимфогранулематоз (болезнь Ходжкина). ЭБВ может быть маркером имеющегося первичного иммунодефицита.
Источником инфекции являются больной человек, в том числе со стертыми формами болезни, и вирусоноситель. Возбудитель передается воздушно-капельным путем, возможен контактный, алиментарный и трансфузионный пути передачи.