Содержание занятия

А. Проверка готовности к занятию (тестовый контроль).

Б. Выполнение лабораторной работы.

Задание 1. Определить подлинность листьев подорожника большого.

1. Изучить внешний вид подорожника большого и возможных примесей (подорожника ланцетного и среднего).

2. Провести макроскопический анализ листьев подорожника большого. Указать диагностические признаки.

3. Провести микроскопический анализ листьев. Приготовить поверхностный микропрепарат листа, рассмотреть при малом и большом увеличениях, зарисовать и отметить диагностические признаки.

4. Результаты анализа сравнить с ГФ-ХI и дать заключение о подлинности и качестве сырья по внешним и микроскопическим признакам.

Задание 2. Определить подлинность корней алтея, очищенных от пробки.

1) Провести микрохимические реакции на слизь с порошком корня алтея:

• с раствором метиленового синего;

• с раствором туши;

• реакцию двойного окрашивания с раствором хлорида окисного железа и раствором метиленового синего. Записать результаты окрашивания.

3) Результаты анализа сравнить с ГФ-ХI и дать заключение о подлинности сырья по микрохимическим реакциям.

Задание 3. Провести макроскопический и микроскопический анализ порошка неизвестного ЛРС.

1. Изучить внешние признаки порошка.

2. Приготовить микропрепарат порошка и рассмотреть его.

3. Пользуясь определителем, установить принадлежность порошка к какому-либо ЛРС или примесям к нему. При необходимости использовать микрохимические реакции.

Задание 4. Изучить внешний вид ЛР по гербарным образцам и диагностические признаки ЛРС: листья мать-и-мачехи, семена льна и подорожника блошного, слоевища ламинарии сахарной, исландский мох, фукус.

В. Итоговый контроль.

Протокол занятия представить преподавателю на проверку и подпись. Ответить на предложенные вопросы по теме занятия.

ЗАНЯТИЕ № 4

Витамины. Анализ лрс, содержащего витамины

ЦЕЛЬ ЗАНЯТИЯ:

1. Уметь:

• проводить обнаружение аскорбиновой кислоты и каротиноидов в ЛРС

• проводить количественное определение аскорбиновой кислоты в ЛРС (на примере плодов шиповника).

2. Знать: классификацию, физико-химические свойства, фармакологическое действие основных витаминов; методы анализа ЛРС, содержащего витамины; медицинское применение ЛРС и препаратов, содержащих витамины.

Вопросы для самоподготовки

1. Определение понятия "витамины".

2. Классификация. Физико-химические свойства.

3. Распространение витаминов в растительном мире.

4. Качественное и количественное определение аскорбиновой кислоты в плодах шиповника по ГФ-ХI.

5. Анализ ЛРС, содержащего каротиноиды.

6. Структурные формулы: аскорбиновой, дегидроаскорбиновой кислот.

7. Применение ЛРС и препаратов, содержащих витамины.

Литература

1. Муравьева Д.А. Фармакогнозия. - М.: Медицина, 1991, с. 127-149.

2. Фармакогнозия. Атлас. /Под ред. Гринкевич Н.И., Ладыгиной Е.Я. - М.: Медицина, 1989, с. 68-100.

3. Химический анализ лекарственных растений. /Под ред. Гринкевич Н.И., Сафронич Л.Н. - М.: Медицина, 1983, с. 5-12.

4. Долгова А.А., Ладыгина Е.Я. Руководство к практическим занятиям по фармакогнозии. - М.: Медицина, 1977, с. 211-218.

5. ГФ РБ.-Молодечно: Типография «Победа», 2008, т.2, с. 450-452.

6.Коноплёва М.М. Фармакогнозия: Природные биологически активные вещества. - Витебск: ВГМУ, 2002, с. 31 – 41.

7. Фармакогнозия. /Под. ред. проф. В.Л. Шелюто.- Витебск: ВГМУ, 2003, с. 55-79.

СОДЕРЖАНИЕ ЗАНЯТИЯ

А. Проверка готовности к занятию (тестовый контроль).

Б. Выполнение лабораторной работы.

Задание 1. Провести обнаружение аскорбиновой кислоты в плодах шиповника методом тонкослойной хроматографии.

1. 0,2 г измельченного сырья, просеянного через сито № 1, поместить в пробирку, залить 5 мл спирта, довести до кипения на спиртовке и после настаивания в течение 10 минут отфильтровать.

2. Капилляром нанести фильтрат на пластинку "Силуфол" рядом со "свидетелем" - аскорбиновой кислотой и поместить в хроматографическую камеру с системой растворителей:

ЭТИЛАЦЕТАТ - ЛЕДЯНАЯ УКСУСНАЯ КИСЛОТА (8:2)

3. После того, как пробег растворите­ля составит около13 см, хроматограмму высушить на воздухе под тягой.

4. Хроматограмму обработать 0,04% р-ром 2,6-дихлорфенолиндо-фенолята натрия.

5. Отметить характер окраски пятен, рассчитать Rf и сравнить со «свидетелем».

Задание 2. Провести обнаружение каротиноидов в плодах рябины методом тонкослойной хроматографии.

1. 1,0 г измельченных плодов рябины залить 5 мл хлороформа, настаивать 1,5 часа. Профильтровать.

2. Капилляром нанести фильтрат на пластинку "Силуфол" и поместить в хроматографическую камеру с системой растворителей:

БЕНЗОЛ - ЭТАНОЛ (8:2)

3. После того, как пробег растворите­ля составит около13 см, хроматограмму высушить на воздухе под тягой.

4. Хроматограмму обработать 10% р-ром фосфорномолибденовой кислоты, прогреть в сушильном шкафу при температруе 60-80^о С.

5. Отметить характер окраски пятен, рассчитать Rf.

Задание 3. Провести количественное определение аскорбиновой кислоты в плодах шиповника (ГФ РБ, т.2, с. 452; ГФ ХI изд., вып. 2., с. 295) титриметрическим методом.

1) Подготовка ЛРС: цельные плоды измельчить в порошок; 2,0 порошка сырья поместить в фарфоровую ступку; растереть со стеклянным порошком (1,0 г).

2) Экстракция: постепенно добавить при помешивании 75 мл воды, настоять в течение 10 мин и отфильтровать.

3) Количественное определение - окислительно-восстановительное титрование:

• в коническую колбу емкостью 50-100 мл внести 1 мл полученного извлечения, 1 мл 2% р-ра соляной кислоты, 13 мл воды, перемешать;

титровать быстро из микробюретки 0,001 моль/л раствором 2,6-дихлорфенолиндофенолята натрия, до появления розовой окраски, не исчезающей в течение 30-60 сек. (восстановление 2,6-дихлорфенолиндофенолята натрия, который в кислой среде имеет красное окрашивание).

6. Расчет результатов: рассчитать процентное содержание аскорбиновой кислоты (Х) по формуле:

Y * Y₁ * 0,000088 * 100 * 100

Х = ----------------------------- , где

м * Y₂ * (100 - W)

Y - объем 0,001 моль/л раствора 2,6-дихлорфенолиндофенолята натрия, израсходованный на титрование, мл.

Y₁ - объем извлечения, соответствующий всей навеске, 75 мл.

Y₂ - объем извлечения, взятый для титрования, 1 мл.

м - масса навески, 2 г.

W - влажность сырья, %.

1 мл 0,001 моль/л раствора 2,6-дихлорфенолиндофенолята натрия соответствует 0,000088 г аскорбиновой кислоты.

Примечание. При интенсивном окрашивании извлечения или высоком содержании в нем аскорбиновой кислоты (расход раствора 2,6-дихлорфенолиндофенолята натрия более 2 мл) обнаруженном первым титрованием, перед повторным титрованием его разбавить водой в два и более раз.

Работу оформить в виде протокола фитохимического анализа. На основании проведенного анализа дать заключение о соответствии сырья требованиям НД по содержанию аскорбиновой кислоты.

В. Итоговый контроль.

Протокол занятия представить преподавателю на проверку и подпись. Ответить на предложенные вопросы по теме занятия.

ЗАНЯТИЕ № 5