- •Государственное бюджетное образовательное учреждение высшего профессионального образования
- •Практическое занятие № 1
- •Практическое занятие № 2
- •Учебная карта Вопросы для подготовки к занятию
- •Практическая часть занятия Высаливание белков сыворотки
- •Тепловая денатурация белков
- •Домашнее задание
- •Практическое занятие №3 Лабораторный практикум
- •Учебная карта занятия Вопросы для подготовки к занятию
- •Практическая часть Специфичность действия ферментов
- •Влияние температуры на активность фермента
- •Влияние активаторов и ингибиторов на активность ферментов
- •Практическое занятие №4
- •Учебная карта занятия Вопросы для подготовки к занятию
- •Практическая часть занятия
- •Практическое занятие № 5
- •Практическое занятие №6 Коллоквиум
- •Учебная карта занятия Вопросы для самоподготовки
- •Практическое занятие № 7
- •Учебная карта занятия вопросы для подготовки студентов к занятию
- •Практическая часть
- •Домашнее задание
- •Практическое занятие 8
- •Учебная карта вопросы для подготовки к занятию
- •Задания для контроля исходных и текущих знаний студентов
- •Практическое занятие 9
- •Учебная карта занятия вопросы для подготовки к занятию:
- •Домашнее задание
- •Практическое занятие 10
- •Учебная карта занятия вопросы для подготовки к занятию:
- •Домашнее задание
- •Практическое занятие № 11
- •Учебная карта занятия вопросы для подготовки к занятию:
- •Практическая часть Семинар
- •Практическое занятие № 12 (семинар)
- •Учебная карта занятия вопросы для подготовки к занятию:
- •Практическое занятие № 13
- •Учебная карта занятия вопросы для подготовки к занятию
- •Практическая работа Определение содержания мочевой кислоты в сыворотке крови и моче по методу Мюллера-Зейферта
- •1.1. Первичная гиперурикемия
- •Синдром Леша-Нихена (ювенильная гиперурикемия)
- •Подагра
- •Вторичная гиперурикемии
- •2.Гипоурикемия
- •3. Нарушение обмена пиримидиновых нуклеотидов
- •Нарушение катаболизма пиримидинов Наследственная оротовая ацидурия
- •Практическое занятие № 14
- •Учебная карта занятия Вопросы для подготовки к занятию
- •Практическое занятие № 15
- •Учебная карта занятия вопросы для подготовки к занятию:
- •Практическая часть занятия
- •Практическое занятие № 16
- •Учебная карта занятия вопросы для подготовки к занятию:
- •Практическая часть Определение активности алт и аст
- •Источники и пути обезвреживания аммиака в разных тканях
- •Практическое занятие № 17
- •Учебная карта занятия вопросы для подготовки к занятию:
- •Практическое занятие № 18
- •Учебная карта занятия вопросы для подготовки к занятию: Содержание темы
Учебная карта занятия вопросы для подготовки к занятию
1. Строение и номенклатура основных пуриновых и пиримидиновых нуклеотидов.
2. Первичная структура ДНК и основных разновидностей РНК.
3. Вторичная и третичная структура ДНК и РНК.
4. Источники атомов в биосинтезе пуринового ядра.
5. Последовательность реакций в синтезе пиримидиновых нуклеотидов.
6. Химизм катаболизма нуклеиновых кислот до образования конечных
продуктов распада пуриновых и пиримидиновых нуклеотидов.
8. Нарушение пуринового и пиримидинового обмена. Заболевания и
связанные с этими заболеваниями нарушения в обмене нуклеотидов.
9.Молекулярные болезни, связанные с нарушением обмена нуклеопротеидов:
1. Нарушение метаболизма пуриновых нуклеотидов:
Первичная гиперурикемия
- Синдром Леша-Нихена (ювенильная гиперурикемия)
- Подагра
Вторичная гиперурикемии
2. Гипоурикемия
3.Нарушение обмена пиримидиновых нуклеотидов:
- Наследственная оротовая ацидурия. I и II типа.
- Синдром Рейе.
Практическая работа Определение содержания мочевой кислоты в сыворотке крови и моче по методу Мюллера-Зейферта
Принцип метода: метод основан на колориметрировании окрашенных продуктов, образующихся при восстановлении фосфорновольфрамового реактива мочевой кислотой.
Для определения в моче этап осаждения белка опускается.
Ход работы: в центрифужную пробирку налить 1,5 мл сыворотки крови,
добавить 1,5 мл 10% ТХУ + 1,5 мл воды. Через 10 минут смесь центрифугировать в течение 10 минут при 4000 об/мин. Затем в пробирку с отметкой 10 мл налить 1,5 мл центрифугата +0,7 мл насыщенного раствора соды
и добавляют 0,05 мл реактива Фолина. Довести объем жидкости до отметки дист. водой, перемешать и колориметрировать против воды с красным светофильтром. Содержание мочевой кислоты определяют по калибровочному графику.
Результат:
Вывод:
Определение содержания мочевой кислоты в моче: 1,5 мл мочи + 0,7
мл соды + 0,05 мл реактива Фолина. Довести объем до 10 мл дист. водой.
Перемешать, колориметрировать на ФЭКе с красным светофильтром. Содержание мочевой кислоты определяют по калибровочному графику.
Результат:
Вывод:
В моче мочевой кислоты в норме экскретируется 2 - 7 ммоль/сут
Норма содержания мочевой кислоты у взрослых - 0,12 - 0,24 ммоль/л (0,02 - 0,04 г/л, 2 - 4 мг/100мл) у детей - 0,6 ммоль/л.
Клиническое значение определения мочевой кислоты:
определение уровня этого метаболита (конечного продукта распада пуринов у человека) характеризует состояние пуринового обмена и интенсивность распада нуклеиновых кислот. Для правильной оценки этих показателей с целью исключения влияния пуринов алиментарного происхождения пациент должен в течение недели находиться на диете, обедненной содержанием нуклеопротеидов (исключить мясо, рыбу). Имеет значение обнаружение повышенных уровней мочевой кислоты в крови и моче.
Гиперурикемия почечного происхождения: наблюдается при поражении клубочков почки (острый и хронический нефрит, сморщенная почка). Причина - нарушается выделение мочевой кислоты с мочей. Гиперурикемия непочечного происхождения: наблюдается при подагре (связано с нарушением обмена нуклеотидов). Причина - соли мочевой кислоты откладываются в суставах и различных тканях. Много мочевой кислоты определяется в моче и крови при усиленном распаде нуклеопротеидов (лейкозах, после после облучения рентгеновскими лучами, гемолитической желтухе, злокачественных новобразованиях, диабете, отравлениями свинцом, угарным газом и т.д.).
ПРИЛОЖЕНИЕ
1.Причины метаболической урикемии - повышенная продукция мочевой
кислоты или снижение ее экскреции: энзимодефекты, нарушение канальцевой экскреции, ускоренный гемолиз, псориаз, серповидно-клеточная анемия.
2.Причины вторичной урикемии - недостаточность глюкозо-6-фосфатазы, наследственно обусловленная непереносимость фруктозы, заболевания, сопровождающиеся миелопролиферацией, болезни почек и дегидратация (почечная недостаточность, отравление свинцом, передозировка мочегонных, несахарный диабет).
3.Классическая подагра - обусловлена одновременно тремя факторами: увеличением синтеза мочевой кислоты, уменьшением содержания уратсвязывающего белка и замедленным выведением с мочой. Известны два генетических энзимодефекта, приводящих к урикемии и подагре: а) повышение активности фосфорибозилпирофосфатсинтетазы; б) частичный дефицит гипоксантингканин-фосфорибозилтрансферазы.
4.Синдром Леша-Нихана - признаки подагры у мальчиков в возрасте от полугода до 16 лет.
На первый план выступают тяжелые неврологические симптомы. Основной патогенетический фактор - дефект гипоксантингуанинфосфорибозилтрансферазы, катализирующей превращения гипоксантина и гуанина в инозинмонофосфат и ГМФ.
Рассмотрим эти патологии подробнее
Нарушение метаболизма пуриновых нуклеотидов
Пурины, синтезируемые в организме, поступающие с продуктами питания и высвобождаемые при распаде эндогенных нуклеиновых кислот, подвергаются дальнейшим превращениям. Они могут быть использованы либо для синтеза нуклеиновых кислот, либо окисляться до мочевой кислоты (уратов).
Гиперурикемия
Факторы, ведущие к развитию гиперурикемии, могут быть сведены к следующим:
1) повышение синтеза пуринов, потребление их с пищей, и, как следствие, образование мочевой кислоты.
2) стимуляция обновления нуклеиновых кислот.
3) снижение скорости экскреции уратов.
Различают первичную и вторичную гиперурикемию