- •Государственное бюджетное образовательное учреждение высшего профессионального образования
- •Практическое занятие № 1
- •Практическое занятие № 2
- •Учебная карта Вопросы для подготовки к занятию
- •Практическая часть занятия Высаливание белков сыворотки
- •Тепловая денатурация белков
- •Домашнее задание
- •Практическое занятие №3 Лабораторный практикум
- •Учебная карта занятия Вопросы для подготовки к занятию
- •Практическая часть Специфичность действия ферментов
- •Влияние температуры на активность фермента
- •Влияние активаторов и ингибиторов на активность ферментов
- •Практическое занятие №4
- •Учебная карта занятия Вопросы для подготовки к занятию
- •Практическая часть занятия
- •Практическое занятие № 5
- •Практическое занятие №6 Коллоквиум
- •Учебная карта занятия Вопросы для самоподготовки
- •Практическое занятие № 7
- •Учебная карта занятия вопросы для подготовки студентов к занятию
- •Практическая часть
- •Домашнее задание
- •Практическое занятие 8
- •Учебная карта вопросы для подготовки к занятию
- •Задания для контроля исходных и текущих знаний студентов
- •Практическое занятие 9
- •Учебная карта занятия вопросы для подготовки к занятию:
- •Домашнее задание
- •Практическое занятие 10
- •Учебная карта занятия вопросы для подготовки к занятию:
- •Домашнее задание
- •Практическое занятие № 11
- •Учебная карта занятия вопросы для подготовки к занятию:
- •Практическая часть Семинар
- •Практическое занятие № 12 (семинар)
- •Учебная карта занятия вопросы для подготовки к занятию:
- •Практическое занятие № 13
- •Учебная карта занятия вопросы для подготовки к занятию
- •Практическая работа Определение содержания мочевой кислоты в сыворотке крови и моче по методу Мюллера-Зейферта
- •1.1. Первичная гиперурикемия
- •Синдром Леша-Нихена (ювенильная гиперурикемия)
- •Подагра
- •Вторичная гиперурикемии
- •2.Гипоурикемия
- •3. Нарушение обмена пиримидиновых нуклеотидов
- •Нарушение катаболизма пиримидинов Наследственная оротовая ацидурия
- •Практическое занятие № 14
- •Учебная карта занятия Вопросы для подготовки к занятию
- •Практическое занятие № 15
- •Учебная карта занятия вопросы для подготовки к занятию:
- •Практическая часть занятия
- •Практическое занятие № 16
- •Учебная карта занятия вопросы для подготовки к занятию:
- •Практическая часть Определение активности алт и аст
- •Источники и пути обезвреживания аммиака в разных тканях
- •Практическое занятие № 17
- •Учебная карта занятия вопросы для подготовки к занятию:
- •Практическое занятие № 18
- •Учебная карта занятия вопросы для подготовки к занятию: Содержание темы
Практическое занятие № 7
(лабораторная работа)
ТЕМА: Сложные белки – хромопротеиды
ЦЕЛИ ЗАНЯТИЯ: - Изучить химическое строение, состав и функции гемоглобина.
Знать уровень содержания гемоглобина в крови
Знать состав гемоглобина у людей разных возрастных групп
Познакомиться с определением каталазы и гемоглобина в крови методом прямой фотометрии.
Базисные знания:
Из курса биоорганической химии студент должен знать:
- определение и классификацию сложных белков;
- строение гема в гемоглобине;
- характеристику белка глобина в гемоглобине (особенности
четвертичной структуры);
- биологическую роль гемоглобина и миоглобина
Учебная карта занятия вопросы для подготовки студентов к занятию
1.Сложные белки-хромопротеиды. Определение. Классификация.
2.Гемоглобин. Структура и биологическая роль. Характеристика гема и глобина.
Содержание гемоглобина в разные возрастные периоды.
3.Формы гемоглобина. Возрастные особенности.
4.Производные гемоглобина.
5.Миоглобин.
6.Порфирины. Биологическая роль. Патология порфиринового обмена.
7.Пероксидаза и каталаза.
8.Система цитохромов. Дыхательный фермент Варбурга - цитохромоксидаза. Цитохром С. Особенности структуры, биологическая роль.
Практическая часть
1.Количественное определение активности каталазы по Бану и Зубковой.
В колбочку "О" налить 7мл воды и 1мл крови гемолизированной 1:1000. В колбу "К" налить 7 мл воды и 1мл гемолизированной крови прокипяченной. В обе колбы + 3мл 1% перекиси водорода. Поставить на 30 минут. После этого в обе колбы + 3мл 2N р-ра серной кислоты и титровать обе колбочки до устойчивой слабо-розовой окраски 0,1N р -ром перманганата калия.(КМnО4 ).
На титрование "К" - 9мл
на титрование "О" - 1,6мл
Активность каталазы (9 - 1,6) х 1,7 = 12,58
Результат:
Вывод:
2.Определение гемоглобина методом прямой фотометрии.
0,1мл крови + 2,9мл дистиллированной воды. Колориметрировать на ФЭКе при зеленом светофильтре против воды, в кюветах на 5мм. Содержание гемоглобина определяется по калибровочному графику.
Результат:
Вывод:
3.Амидопириновая проба на кровь.
0,5мл крови 1:1000 + 3-4 капли амидопиринового реактива + 1-2 капли 30% уксусной кислоты +3-4 капли 3% перекиси водорода. Появляется сиреневое окрашивание.
Результат:
Вывод:
ПРИЛОЖЕНИЕ
Гетерогенность гемоглобина
Гемоглобин в организме человека в разные возрастные периоды может существовать в виде нескольких форм, отличающихся белковым компонентом молекулы, то есть аминокислотным составом полипептидных цепей.
В ранний эмбриональный период в крови человека выявлено 3 формы гемоглобина : гемоглобин - Говер I, II и гемоглобин Портленд. Это так называемые эмбриональные гемоглобины или примитивные - НвР.
К 3 месяцу развития зародыша, в крови исчезают эмбриональные и появляется фетальный гемоглобин (НВ F), включающий 2 и 2 -цепи в состав белковой части молекулы. НВ F является главным типом гемоглобина
плода и составляет к моменту рождения ребенка до 70-90% всего гемоглобина.
У детей 1 месяца жизни НВ F составляет от 50% до 85% всего гемоглобина.
К моменту рождения ребенка на долю гемоглобина А приходится до 10-30%, однако его количество резко увеличивается по мере исчезновения гемоглобина F (в течение 3-4х месяцев после рождения ребенка). Начиная с 3-5 месячного возраста ребенка, реже после 1 года, НВ А становится основным гемоглобином, составляя 96-99%. На долю гемоглобина F в этот период приходится всего лишь 1-2%.
Как было установлено НВ F и НВ А имеют имеют одинаковое сродство к кислороду, но проявляют разную чувствительность к действию аллостерического эффектора - 2,3 дифосфоглицерата (2,3 ДФГ). НВ F слабее связывает 2,3 ДФГ, чем НВ А, поэтому в присутствии 2,3 ДФГ сродство НВ А к кислороду снижается, а у НВ F наоборот возрастает. В этих условиях НВ F плода оксигенируется за счет гемоглобина А матери и обеспечиваются оптимальные условия для транспорта кислорода из крови матери в кровь плода.