Вопросы

1. К какому виду хроматографии относится хроматография в тонком слое?

2. Что такое коэффициент распределения? Что является подвижной и неподвижной фазой при определении красителей?

З. Техника операций в тонкослойной хроматографии.

4. Когда разделение красителей считается законченным?

5. Что характеризует величина R_f? От чего она зависит?

6. Что собой представляет пластина для хроматографирования? Какие вещества применяются в качестве сорбента, который наносят на пластинку (в закрепленном или незакрепленном слое)?

7. Каково назначение сорбента? Каково назначение растворителя - подвижной фазы?

8. Как провести количественное определение красителей в данном виде хроматографии?

9. Какова роль «свидетелей»? Какие красители были применены в качестве свидетелей? 10. Можно ли идентифицировать вещества, не имея в наличии растворов свидетелей?

Работа 2. Определение углеводов методом тонкослойной хроматографии

Необходимые реактивы, приборы

1. Растворитель: пропанол - этилацетат - вода (75:10:15).

2. Проявитель: 4 г дифениламина растворяют в 100 мл ацетона, добавляют 4 мл свежеперегнанного анилина и 20 мл ортофосфорной кислоты

3. Пластинка силуфола, 15 х 5 см.

4. Хроматографическая камера (эксикатор).

5. Сушильный шкаф.

Методика определения

Пластинку силуфола размером 15 х 5 см перед работой активизируют в сушильном шкафу при t = 105 °С в течение 40 мин. Линия старта намечается на расстоянии 10-12 мм от нижнего края пластины. Затем на линию старта пластины наносят капилляром 1 каплю раствора углевода. Расстояние между отдельными пробами 10-15 мм. После испарения растворителя пластину помещают в хроматографическую камеру (эксикатор), в которую заранее, за 40 мин до начала хроматографирования налит растворитель, - 15 мл (подвижная фаза). Это делается для лучшего насыщения камеры, что приводит к увеличению скорости хроматографирования. Растворитель - пропанол-этилацетат-вода.

Фронт растворителя начинает подниматься по пластине. Разделение считают законченным, когда растворитель не подходят на 10-15 мм до верхнего края пластинки. Затем пластинку вынимают, отмечают карандашом линию фронта растворителя, сушат на воздухе и проявляют.

В качестве проявителя используют смесь дифениламина с анилином и ортофосфорной кислотой.

Хроматограмму проявляют методом опрыскивания. После чего ее помешают в сушильный шкаф при t = 105 °С на 2-5 мин для более четкого проявления пятен. Рассчитывают величину R_f и данные заносят в табл. 1.

Таблица 1

Значения R_f исследуемых растворов углеводов на пластине силуфола

№ п/п	Углевод	Величина Rf
1. 2. ит.д.

Работа 3. Изучение свойств ионообменных смол

Основными характеристиками ионообменных смол являются влажность, обменная емкость и набухание

Необходимые реактивы, приборы

1. Едкий натр, С(NаОН) - 1 моль/л.

2. Хлороводородная кислота, С(НСI) - 1-моль/л.

3. Катионообменная смола в Н-форме, КУ-2 .

4. Индикатор метиловый красный.

5. Бюкс стеклянный.

6. Стакан химический вместимостью 100 мл.

7. Колба плоскодонная с пробкой вместимостью 300-500 мл и 100 мл.

8. Фильтры беззольные.

9. Пипетка, 25 мл.

10. Сушильный шкаф.

11. Мешалка.

12. Центрифуга.

Методика определения

1. Определение влажности ионообменной смолы.

В бюкс с притертой крышкой помещают навеску 3-4 г катионита, взвешенного с точностью до 0,0002 г на аналитических весах. Открытый бюкс помещают в сушильньий шкаф и высушивают катионит до постоянной массы при температуре 100-105 °С. Перед взвешиванием бюкс с катионитом охлаждают в эксикаторе в течение 60 мин.

Расчет влажности проводят по формуле:

, %

где m₁ - масса пробы ионита до сушки, г;

m₂ - масса пробы ионита после сушки, г;

W - влажность, %

2. Определение обменной емкости сильнокислотных ионитов

В плоскодонную колбу вместимостью 300-350 мл помешают навеску катионита в Н-форме (КУ-2) в количестве, соответствуюшем 1 г абсолютно сухого продукта, взвешенного с точностью до 0,0002 г. Навеску заливают 200 мл 0,1 М раствора NаОН. Колбу закрывают пробкой и оставляют стоять 2 часа, периодически встряхивая 1-2 раза в час. По истечении указанного срока содержимое фильтруют через беззольный фильтр, предварительно смоченный испытуемым раствором. Первую порцию фильтрата (около 5 мл) отбрасывают, фильтрат собирают в сухую колбу. Отбирают пипеткой 25 мл фильтрата и титруют раствором НСI, добавив две капли индикатора метилового красного.

Расчет обменной емкости проводят по формуле:

, моль-экв/г

где С(NаОН); С(НСI) - молярная концентрация эквивалента растворов соответственно щелочи и кислоты;

а - количество раствора НСI, пошедшее на титровавие, мл;

m - навеска смолы, г;

W - влажность ионита, %.

3. Определение набухания катионообменной смолы КУ-2

В склянку вместимостью 50 мл помещают 1,5 г воздушно-сухого ионита и 25-30 мл дистиллированной воды. Ионит оставляют в контакте с водой в течение З часов. Затем смолу отделяют от воды центрифугированием и осторожно подсушивают фильтровальной бумагой. Берут точную навеску набухшей смолы (0,8-1,0 г). Взвешавание производят в бюксе, предварительно доведенным до постоянной массы в сушильном шкафу при температуре 100-105 °С. Бюкс с набухшей смолой доводят в сушильном шкафу при той же температуре до постоянной массы. Расчет набухания (Н) проводят по формуле:

,

где m₁ - масса набухшей смолы, г; m₂ - масса высушенной смолы, г