- •1. Фотометрический анализ (молекулярная абсорбционная спектроскопия). Теоретические основы
- •1.1. Методы фотометрического анализа
- •1.2. Основной закон светопоглощения (закон Бугера-Ламберта-Бера)
- •1.3. Спектр светопоглощения (спектральная характеристика вещества)
- •1.4. Отклонения от основного закона светопоглощения
- •1.5. Закон аддитивности светопоглощения
- •1.6. Качественный спектрофотометрический анализ
- •1.7. Количественный анализ по светопоглощению
- •1.7.1. Подчинение основному закону светопоглощения
- •1.7.2. Определение концентрации вещества в растворе с помощью градуировочного графика
- •1.7.3. Определение концентрации веществ в смеси
- •1.8. Приборы для измерения поглощения растворов. Принципиальные схемы и основные элементы
- •1.9. Спектрофотометрическое титрование
- •Необходимые реактивы и принадлежности
- •Порядок выполнения работы
- •Вопросы
- •Необходимые реактивы, приборы
- •Необходимые реактивы, приборы
- •Необходимые релжтиеы, приборы
- •Порядок работы на колориметре фотоэлектрическом; концентрационном кфк-2мп
- •Вопросы
- •Необходимые реактивы, приборы
- •Методика определения
- •Вопросы
- •Необходимые реактив, . Приборы
- •Методика онределения
- •Порядок работы на приборе лмф-69
- •Вопросы
- •2. Эмиссионный спектральный анализ
- •2.1. Теоретические основы эмиссионной спектроскопии
- •2.2. Качественный спектральный анализ
- •2.3. Количественный спектральный анализ
- •2.4. Источники возбужнения
- •2.5. Пламенная фотометрия
- •2.6. Применение эмиссионного спектрального анализа
- •Необходимые реактивы, приборы, посуда
- •Вопросы
- •3. Люминесцентный анализ
- •3.1.Теоретические основы метода
- •3.2. Спектры поглощения и спектры люминесценции
- •3.3. Энергетический и квантовый выходы люминесценции
- •3.4. Интенсивность люминесценции
- •3.5. Качественный анализ
- •3.6. Количественный анализ
- •3.7. Применение люминесцентного метода для анализа пищевых продуктов и с/х сырья
- •3.8. Аппаратура люминесцентного анализа
- •Аппаратура ы реактивы
- •Выполнение работы
- •Работа 2. Определение свободного и связанного витамина в2 в пищевых продуктах
- •Необходимые реактивы, приборы
- •Вопросы
- •4. Хроматография
- •4.1. Основные принципы и классификация хроматографических методов анализа
- •4.2. Характеристика хроматографических методов анализа
- •4.2.1. Адсорбционная хроматография (жидкостно-адсорбционная, жидкостная твердoфазная хроматография)
- •4.2.2. Ионообменная хроматоарафия (жидкостная твердофазная хроматография (жтх))
- •4.2.3. Распределительная хроматография (жидкость-жидкостная хроматография жжх))
- •4.2.4. Осадочная хроматография
- •4.2.5. Газовая хроматография
- •4.2.6. Жидкостная высокоскоростная (высокоэффективная) хроматография
- •4.2.7. Гель-хроматография
- •4.2.8. Молекулярный ситовой анализ
- •Вопросы
- •Вопросы
- •Работа 2. Определение углеводов методом тонкослойной хроматографии
- •Работа 3. Изучение свойств ионообменных смол
- •Работа 4. Концентрирование ионов меди (II) из разбавленных растворов методом ионообменной хроматографии
- •Необходимые реактивы, приборы
- •Работа 5. Отделение железа от меди и ее качественное определение
- •Работа 6. Определение никеля по величине зоны хроматограммы
- •Работа 7. Определение спиртов методом газо-жидкостной хроматографии на лабораторном хроматографе
- •Вопросы
- •Работа 8. Идентификация и количестенное определение веществ в газо-жидкостной хроматографии (гжх) по хроматограммам свидетелей и таблицам
- •Работа 9. Определение содержания влаги в спиртах методом внутреннего стандарта
- •Литература
3.5. Качественный анализ
Качественный люминесцецтный анализ основан на способности исследуемого вещества в соответствующих условиях люминесцировать. Возникновение люминесценции обычно наблюдается визуально. В некоторых случаях исследуют спектры люминесценции, однако аналитическая эффективность таких измерений невелика, так как спектры люминесценции представляют собой широкие перекрывающиеся полосы.
Очень чувствительны люминесцентные качественные реакции, когда добавление некоторых органических реактивов к раствору неорганических веществ вызывает яркую люминесценцию. Например, интенсивную люминесценцию вызывает добавление салициловой кислоты к раствору соли цинка, что может бьгтъ использовано для его качественного открытия. Для обнаружения лития и алюминия предложен 8-оксихинолин, для открытия бериллия, циркония используют морин и т.д.
Достоинством обнаружения реакций является их исключительно низкий предел обнаружения. Например, ярко-зеленая люминесценцця соединения лития с 8-оксихинолином возникает при содержании 0,5 мкг Li в 5 мл.
3.6. Количественный анализ
В основе количественного люминесцентного анализа лежит зависимость между интенсивностью флуоресценции Јл и концентрацией С исследуемого вещества (7).
Јл = К ∙ С
где К - коэффициент пропорциональности.
Линейная зависимость Јл от С наблюдается только для малых концентраций, меньших «пороговой».
Интенсивность флуоресценцш: определяют как визуально, так и с помощью специальных приборов.
При визуальном определении сравнивают интенсивности излучении анализируемого раствора со шкалой стандартных растворов.
При измерении интенсивности излучения с помощью флуориметров применяют метод построения градуировочного графика.
Количественные определения можно проводить путем титрования в присутствии люминесцентных индикаторов, которые имеют преимущества перед обычными цветными индикаторами. Флуоресцентные индикаторы применяют для анализа мутных и окрашенных растворов, в которых трудно зафиксировать изменение цвета обычных индикаторов, например, для анализа вин, масел и др. Флуоресцентные индикаторы применяют в ничтожно малых количествах, что снижает погрешность титрования. Существуют различные виды флуоресцентных индикаторов. Наиболее широкое применение нашли металлофлуоресцентнье индикаторы, образующие комплексы с титруемым ноном. Для повышения точности титриметрического метода целесообразно наблюдать интенсивность люминесценции не визуально, а с помощью флуориметра.
3.7. Применение люминесцентного метода для анализа пищевых продуктов и с/х сырья
Люминесцентный анализ находит широкое применение при исслсдовании пищевых продуктов растительного и животного происхождения. Люминесцентный анализ подразделяют на качественный (сортовой) и количественный. Установлено, что начало гниения на ранней стадии бобов, белой и красной капусты, огурцов можно определить по изменению цвета и интенсивности флуореспенции. Люминесценция свежего, лежалого и портящегося зерна различна. Возможно применение данного метода анализа для контроля качества картофеля. Метод позволяет обнаружить некоторые заболевания и выявить клубни, поврежденные морозом. Подмороженныие клубни определяют по слабому белесовато-голубому свечению.
По цвету люминесценции устанавливают сорт муки: чем больше в ней отрубей, тем интенсивнее свечение.
Широко используют люминесцентный анализ для определения белков. Способность к люминесценции - общее свойство белковых веществ, которое обусловлено содержащимися в них ароматическими аминокислотами. Высокая чувствительность люминесценции позволяет изучать структурные и физико-химические превращения в белковой макромолекуле.
Подробно разработаны методы качественного и количесгвенного люминесцентного анализа для определения ряда витаминов.
Спектральные люминесцентные характеристики использованы для идентификации жиров. По изменению положения максимума спектров люминесценции жиров судят о степени их окислепия.
Благодаря низкому пределу обнаружения и простоте применяемой аппаратуры люминесцентный анализ успешно развивается и является одним из перспективных методов.