Методы качественного анализа сапонинов

физические методы анализа:	химические реакции: (цветные и осадочные)	биологические методы анализа:
проба на пенообразование, определение угла вращения	реакция Либермана-Бурхарда (для стероидных сапонинов); проба Лафона; реакция Сальковского; реакция Санье; реакции осаждения (с холестерином, солями бария и магния, с солями меди, ацетатом свинца)	- гемолитический индекс, - рыбный индекс

Гемолитический индекс (HI) - это наименьшая концентрация извлечения из сырья, которая вызывает полный гемолиз эритроцитов, рассчитанная на единицу исследуемого вещества.

Пенное число – наименьшая концентрация сапонинов в извлечении, вызывающая образование стойкой пены в течение 1 мин.

Глава 8. Антраценпроизводные Вопросы для подготовки к занятию

1. Какие природные вещества называются антраценпроизводными?

2. Что лежит в основе классификации антраценпроизводных, на какие группы их разделяют?

3. Расскажите о распространении антрацепроизводных в растительном мире.

4. В каком виде находятся антраценпроизводные в растениях? Какие факторы влияют на накопление антропроизводных в растениях?

5. Перечислите физико-химические свойства свободных антраценпроизводных и их гликозидов?

6. Какими методами проводят экстракцию антрагликозидов из растительного сырья?

7. Какими качественными реакциями можно определить присутствие антраценпроизводных в растительном сырье?

8. Какие методы используют для количественного определения антраценпроизводных в растительном сырье?

9. Напишите формулы следующих соединений: антрацен, антрахинон, антранол, антрон, хризарин, ализарин.

Задания для выполнения на занятии

Задание 1. Реакция Борнтрегера

Проведите реакцию Борнтрегера и сделайте вывод о содержании и типе антраценпроизводных в растительном сырье.

Методика проведения реакции

1. 0,2 г измельченного сырья кипятят в течение 2 мин с 5 мл 10% едкого натра. После остывания смесь разбавляют 5мл воды и фильтруют.

2. Фильтрата помещают в делительную воронку, добавляют 10% раствор соляной кислоты до помутнения фильтрата, а затем 10 мл хлороформа.

3. Осторожно перемешивают и после расслоения жидкости сливают хлороформный (нижний) слой, фильтруя его через небольшой комочек ваты в пробирку.

4. К хлороформу в пробирке добавляют 10 мл 10% раствора аммиака, встряхивают и наблюдают появившееся окрашивание.

При наличии 1,8-диоксиантрахинонов аммиачный слой принимает вишнево-красное окрашивание, 1.4- -диоксиантрахинонов – пурпурное окрашивание, 1.2-диоксиантрахинонов - фиолетовое окрашивание.

Задание 2. Сублимация антраценпроизводных

Проведите реакцию и сделайте вывод о содержании антраценпроизводных в исследуемом сырье.

Методика проведения реакции

Поместите на дно сухой пробирки 0,2 г измельченного сырья и, осторожно, нагрейте, держа пробирку почти горизонтально.

Сублимат конденсируется на холодных участках пробирки в виде желтых капель или желтых игольчатых кристаллов.

После остывания пробирки к сублимату прибавляют 1 каплю 5% NaOH в этиловом спирте; появляется яркое красное или фиолетовое окрашивание в зависимости от состава антраценпроизводных.

Сущность реакции: содержащиеся в растительном материале антрагликозиды при высокой температуре расщепляются с образованием свободных агликонов; одновременно производные антрона и антронола окисляются до антрахинонов, которые возгоняются.

Задание 4. Хроматографическое определение антраценпроизводных в растительном сырье

Выделите антраценпроизводные из лекарственного растительного сырья (кора крушины). Проведите обнаружение их методом тонкослойной хроматографии. Зарисуйте схему хроматограммы. Рассчитайте величину Rf . Сделайте заключение о качественном составе антраценпроизводных исследуемого сырья. Напишите схему превращения антрапроизводных в коре крушины ломкой при хранении или прогревании при 100°С.

Методика проведения

1. 0,3 г измельченного растительного сырья нагревают с 3 мл этилового спирта в течение 5 мин, доводя до слабого кипения. После остывания фильтруют.

2. 0,1 мл извлечения наносят на линию старта и хроматографируют в системе «этилацетат: метиловый спирт : вода», взятых в соотношениях 100:17:13, на пластинках «Силуфол». Одновременно хроматографируют стандарт «свидетель», нанося его раствор рядом с исследуемым извлечением.

3. После окончания хроматографирования пластинку вынимают из камеры, отмечают линию финиша пробега растворителя, высушивают и просматривают в видимом и УФ свете до и после проявления парами аммиака или 5% NaOH в этиловом спирте.