
- •Передмова
- •Правила роботи в клініко-діагностичній лабораторії
- •Правила роботи в клініко-діагностичній лабораторії
- •Розділ 1 інструментальні методи аналізу в медицині
- •Розділ 2 правила роботи з приладами
- •2.1. Фотоелектроколориметри
- •2.1.2. Колориметр фотоелектричний концентраційний кфк-2мп
- •2.1.4. Фотометр аналітичний медичний мефан-8001
- •2.2. Правила проведення фотометрії та розрахунок результатів досліджень
- •2.3. Поляриметр
- •2.4. Рефрактометр ирф–22
- •2.5. Прилади для потенціометричного аналізу
- •2.5.2. Універсальний йономір эв–74
- •Контрольні питання до розділів 1 – 2
- •Розділ 3 методи вивчення білкового обміну
- •Визначення загального білка в сироватці крові й інших біологічних рідинах
- •Лабораторна робота № 1 Уніфікований метод визначення загального білка в сироватці крові. Біуретова реакція
- •Лабораторна робота № 2 Рефрактометричний метод визначення загального білка в сироватці крові
- •Лабораторна робота № 3 Визначення загального білка в сечі. Проба Гелера
- •Клініко-діагностичне значення визначення загального білка у біологічних рідинах
- •Лабораторна робота № 4 Проби колоїдостійкості білків сироватки крові. Тимолова проба
- •Приклад побудови калібрувального графіка для визначення тимолової проби
- •Клініко-діагностичне значення тимолової проби
- •Лабораторна робота № 5 Визначення білкового спектру сироватки крові методом електрофорезу на папері
- •Приклад розрахунку білкових фракцій у відносних одиницях
- •Приклад розрахунку білкових фракцій в абсолютних одиницях
- •Клініко-діагностичне значення дослідження електрофореграм
- •Приклад опрацювання електрофореграм за допомогою комп'ютера
- •Контрольні питання до розділу 3
- •Розділ 4. Небілкові нітрогенвмісні (Азотисті) сполуки
- •Методи дослідження вмісту сечовини, креатину, креатиніну та сечової кислоти в біологічних рідинах
- •Лабораторна робота № 6 Визначення сечовини в сироватці крові та сечі за кольоровою реакцією з діацетилмонооксимом
- •Готування робочого реактиву
- •Клініко – діагностичне значення кількісного визначення сечовини у біологічних рідинах
- •Лабораторна робота № 7 Визначення креатиніну в біологічних рідинах за кольоровою реакцією Яффе
- •Б) Хід визначення вмісту креатиніну в добовій сечі
- •Клініко-діагностичне значення дослідження концентрації креатиніну у біоматеріалі
- •Лабораторна робота № 8 Визначення сечової кислоти в сироватці крові за реакцією з фосфорно-вольфрамовим реактивом
- •Лабораторна робота № 9 Кількісне визначення сечової кислоти в сечі
- •Клініко-діагностичне значення дослідження вмісту сечової кислоти у біологічних рідинах
- •Контрольні питання до розділу 4
- •Розділ 5. Ферменти
- •Визначення активності α-амілази в біоматеріалі
- •Лабораторна робота № 10 Визначення активності α–амілази зі стійким крохмальним субстратом. Метод Каравею
- •Лабораторна робота № 12 Визначення активності α-амілази в сироватці крові. Метод Кінга
- •Лабораторна робота № 13 Вплив рН середовища на активність ферментів
- •Лабораторна робота № 14 Вплив активаторів та інгібіторів на активність ферменту α-амілази
- •Лабораторна робота № 15 Вплив температури на активність
- •Готування розведеної слини
- •Клініко-діагностичне значення визначення активності α-амілази у біологічних рідинах
- •Визначення амінотрансфераз у сироватці крові
- •Лабораторна робота № 16 Колориметричний метод визначення активності аспартатамінотрансферази у сироватці крові (за Райтманом – Френкелем)
- •Клініко-діагностичне значення визначення активності амінотрансфераз у сироватці крові
- •Контрольні питання до розділу 5
- •Розділ 6. Методи вивчення вуглеводного обміну
- •Лабораторна робота № 17 Якісне визначення глюкози в біологічних рідинах. Реакція Тромера
- •Лабораторна робота № 18 Визначення глюкози в біологічних рідинах глюкозооксидазним (уніфікованим) методом
- •Лабораторна робота № 19 Кількісне визначення глюкози в сечі за кольоровою реакцією з о-толуїдиновим реактивом
- •Лабораторна робота № 20 Кількісне визначення глюкози в сечі поляриметричним методом
- •Клініко-діагностичне значення визначення глюкози в біологічних рідинах
- •Контрольні питання до розділу 6
- •Розділ 7. Обмін ліпідів
- •Біологічна роль ліпідів
- •Лабораторна робота №21 Якісна реакція на ацетон та ацетоацетатну кислоту
- •Лабораторна робота №22 Якісна реакція на ацетоацетатну кислоту. Реакція Герхарда
- •Лабораторна робота №23 Якісне виявлення ацетону у біологічних рідинах
- •Лабораторна робота №24 Якісна реакція на β-оксимасляну кислоту
- •Клініко-діагностичне значення визначення кетонових тіл у біологічних рідинах
- •Контрольні питання до розділу 7
- •Біохімічні показники для дорослих у нормі
- •Література
- •Безпальченко Віолета Михайлівна
- •Практикум Навчальний посібник для студентів вищих навчальних закладів
Біологічна роль ліпідів
1. Енергетична: при повному розпаді 1 г жиру виділяється 9,3 ккал енергії, що більш ніж у 2 рази вище у порівнянні з вуглеводами та білками.
2. Пластична. Жири приймають участь у будові мембран клітин всіх органів і тканин організму. Являються попередниками ряду біологічно-активних речовин – гормонів, вітамінів та ін.
3. Захисна. Підшкірно-жировий шар захищає організм від переохолодження. Жири змазують шкіру, захищаючи її від висихання і розтріскування, також захищають внутрішні органи від механічних ушкоджень (жирові капсули навколо нирок).
Розщеплення ліпідів відбувається у шлунково-кишковому тракті під впливом специфічних ферментів – ліпаз (шлункова, панкреатична, кишкова, клітинна). У слині ліпаза відсутня, тому в ротовій порожнині перетравлення жирів не відбувається. Починається процес розщеплення тригліцеридів у шлунку під дією шлункової ліпази. Основний розклад жирів відбувається у тонкому кишечнику. У печінці відбувається подальше їх розщеплення під дією печінкового ферменту (тригліцеридліпази). Продукти розщеплення (гліцерин, ряд жирних кислот) піддаються засвоєнню на внутрішньоклітинному рівні і беруть участь у процесах синтезу ряду біологічно важливих для організму речовин – гормонів, вітамінів, жовчних кислот та ін.
Жирні кислоти піддаються окисненню, у процесі якого від молекули ферментативним шляхом послідовно відщеплюються двовуглецеві фрагменти з боку карбоксильної групи. Кожний із цих фрагментів перетвориться згодом в ацетилкоензим-А з виділенням великої кількості енергії. Утворення ацетилкоензимів відбувається в печінці. Наступне розщеплення призводить до утворення b-оксимасляної кислоти й ацетону. У нормі вміст ацетону в крові повинен складати 0,85 – 1,7 ммоль/л. У нормальній сечі ацетон відсутній. Збільшення кількості ацетону, ацетилацетону, b-оксимасляної кислоти призводить до зниження концентрації дикарбонатів у плазмі крові та розвитку ацидозу, який блокує нормальну течію всіх видів обміну речовин.
Основним біологічним матеріалом, який використовується у діагностиці захворювань із порушенням обміну ліпідів, є кров, рідше плазма (сироватка) або сеча.
Найбільше поширення при діагностиці захворювань, пов'язаних із порушенням ліпідного обміну, одержали якісні методи визначення наявності ненасичених ліпідів і продуктів їх розщеплення в крові (сироватці) та сечі.
Лабораторна робота №21 Якісна реакція на ацетон та ацетоацетатну кислоту
Мета: Вивчити взаємодію ацетону й ацетоацетатної кислоти з натрій нітропрусидом та на підставі отриманих результатів зробити клініко-діагностичний висновок (стор. 119).
Принцип реакції: Під час взаємодії ацетону й ацетоацетатної кислоти з натрій нітропрусидом у лужному середовищі утворюються комплексні сполуки, які забарвлені в червоний колір:
СН3–СО–СН3 + Na2[Fe(CN)5NO] + 2NaOH ®
® Na4[Fe(CN)5NO=CHCOCH3] + 2H2O.
Внаслідок наступного додавання до реакційної суміші концентрованої оцтової кислоти утворюється сполука темно-червоного кольору:
Na4[Fe(CN)5NO=CHCOCH3] + CH3COOH ®
Na3[Fe(CN)5NOCH2COCH3] + CH3COONa.
Матеріали та реактиви: досліджувана сеча, розчин з масовою часткою натрій гідроксиду 10 %, розчин з масовою часткою натрій нітропрусиду 10 %, концентрована оцтова кислота.
Хід визначення. У пробірку з 2 мл сечі додають 0,5 мл розчину натрій гідроксиду і 0,5 мл розчину натрій нітропрусиду та перемішують. При наявності в сечі ацетону або ацетоацетатної кислоти розчин забарвлюється в рожево-червоний колір. Після внесення у пробірку 1мл концентрованої оцтової кислоти розчин набуває темно-червоного кольору.
Норма: ацетон й ацетоацетатна кислота у сечі відсутні.
Примітка: реакція не є специфічною для ацетону й ацетоацетатної кислоти, оскільки креатинін сечі також реагує з нітропрусидом, що супроводжується утворенням подібного забарвлення, але в цьому разі внаслідок додавання концентрованої оцтової кислоти рідина не забарвлюється в темно-червоний колір.