9.Основные этапы созревания гранулоцитов и моноцитов, опишите морфологические и цитохимические признаки клеток миелопоэза. Клиническое значение цитологического исследования клеток миелопоэза.

Миелопоэз — это часть процессов гемопоэза, заключающаяся в регулируемом образовании миелоидных клеток, включая гранулоциты — нейтрофилы, эозинофилы и базофилы (что называется гранулопоэзом) — и моноциты (что называется моноцитопоэзом) в костном мозгу.

Гранулопоэз (гранулоцитопоэз) — это процесс гемопоэза для гранулоцитов.

Моноцитопоэз (монопоэз) — это разновидность процессов гемопоэза (в данном случае разновидность лейкопоэза), приводящая к образованию моноцитов (через стадию промоноцита) и затем макрофагов.

Гранулопоэз происходит преимущественно в костном мозге и состоит из следующих стадий:

• Гемоцитобласт

• CFU-GEMM

• CFU-GM

• Миелобласт

• Промиелоцит

• Миелоцит (нейтральный, базофильный, эозинофильный)

• Метамиелоцит нейтрофильный

• Палочкоядерный нейтрофил

• Гранулоцит (сегментоядерный нейтрофил, эозинофил, базофил)

Миелобласты — это довольно маленькие клетки, со средним диаметром от 14 до 18 мкм. При этом бо́льшую часть клетки занимает крупное овальное ядро. В ядре наблюдается очень тонкий и нежный неагрегированный (несконденсированный) хроматин и хорошо различимы 3 или более ядрышек. Цитоплазма миелобласта имеет базофильную окраску и лишена специфических гранул, что является главным отличием миелобласта от следующей стадии развития, промиелоцита. Ядрышки являются местами образования рибосомальных белков. Рибосомы расположены в различных участках цитоплазмы клетки. Митохондрии в клетке наличествуют, но имеют довольно малые размеры.

Основные морфологические отличия, которые позволяют отличить миелобласт от лимфобласта при микроскопическом исследовании мазка костного мозга — это присутствие более заметных, хорошо выраженных ядрышек, менее выраженная конденсация (менее плотная упаковка) ядерного хроматина, и наличие неспецифических гранул в цитоплазме клетки.

Промиелоцит несколько крупнее, чем миелобласт, и имеет размеры 10-20 мкм. Его ядро похоже на ядро миелобласта, но в нём наблюдается некоторая конденсация хроматина, а ядрышко менее выражено. Цитоплазма промиелоцита содержит выраженные азурофильные гранулы, так называемые «первичные гранулы». Эти гранулы содержат ферменты миелопероксидазу, кислую фосфатазу и эстеразу.

Миелоцит (нейтрофильный, базофильный, эозинофильный) — менее крупная клетка, чем миелобласт или промиелоцит, 12-15 мкм.При обычной окраске гематоксилин — эозином цитоплазма миелоцита резко базофильна. Её относительно больше, чем в миелобластах или в промиелоцитах.

В более зрелых формах миелоцитов наблюдаются обильные специфические цитоплазматические гранулы. Нейтрофильные и эозинофильные гранулы положительны на миелопероксидазу, в то время как базофильные гранулы — отрицательны.

Ядерный хроматин выглядит грубее, чем наблюдающийся у миелоцитов, но относительно бледно окрашен и не имеет чётко выраженной мембраны.

Ядро миелоцита довольно правильных округлых чертаний (не имеет почкообразных «вмятин») и выглядит «затерявшимся» среди многочисленных цитоплазматических гранул. Если ядро клетки имеет почкообразную «вмятину» или вдавленность, то это, скорее всего, уже не миелоцит, а следующая стадия развития — метамиелоцит.

Метамиелоцит нейтрофильный – диаметр 10-16 мкм, ядро в центре, хроматин распределен неравномерно, глыбчатый, ядрышки отсутсвтют. Морфологически метамиелоциты характеризуются появлением «вдавленного», или «почкообразного» ядра, наличием обильных специфических цитоплазматических гранул, и отсутствием видимого ядрышка. Если ядро клетки ещё не имеет характерной почкообразной вдавленности — это, по всей вероятности, миелоцит. Если же оно сильно вдавлено — практически до образования буквы U — это уже палочкоядерный гранулоцит.

Палочкоядерный гранулоцит — разновидность гранулоцитов (нейтрофилов, базофилов, эозинофилов), 10-16 мкм. Имеют U- или S-образное ядро темно-фиолетового цвета в центре. Цитоплазма розового цвета, содержит гранулы.

Сегментоядерный нейтрофил – диаметр 10-15 мкс, ядро темно-фиолетового цвета в центре, состоит из 2-5 сегментов. Цитоплазма розового цвета, содержит гранулы.

Эозинофилы названы так потому, что при окраске по Романовскому интенсивно окрашиваются кислым красителем эозином и не окрашиваются основными красителями, в отличие от базофилов (окрашиваются только основными красителями) и от нейтрофилов (поглощают оба типа красителей). Так же отличительным признаком эозинофила является двудольчатое (2-4 сегмента) ядро (у нейтрофила оно имеет 4-5 долей, а у базофила не сегментировано).

Базофилы — очень крупные гранулоциты: они крупнее и нейтрофилов, и эозинофилов. Гранулы базофилов содержат большое количество гистамина, серотонина, лейкотриенов, простагландинов и других медиаторов аллергии и воспаления. Содержат базофильное S-образное ядро, зачастую не видимое из-за перекрытия цитоплазмы гранулами гистамина и прочих аллергомедиаторов.

Моноцитопоэз происходит преимущественно в костном мозге и состоит из следующих стадий:

• Гемоцитобласт

• CFU-GEMM

• CFU-GM

• монобласт

• промоноцит

• моноцит

• макрофаг.

Монобласт имеет размеры от 12 до 20 мкм в диаметре, имеет соотношение размеров ядра и цитоплазмы от 4:1 до 3:1. Подобно большинству миелоидных бластных клеток, монобласты имеют круглое или овальное ядро с нежной, тонкой структурой хроматина. Обычно в ядре монобласта хорошо различимы от 1 до 4 ядрышек. Ядро монобласта может быть расположено как по центру клетки, так и эксцентрично, и иногда на нём есть вмятины (вдавленности) или складки. Цитоплазма монобласта голубого цвета, агранулярна (то есть лишена гранул), в отличие от цитоплазмы клеток гранулоцитарного ростка..

Промоноцит - отличается от монобласта более грубым ядром и отсутствием четких нуклеол. Цитоплазма серовато-голубого, а иногда синего цвета, окружает ядро ободком, может содержать мелкую азурофильную зернистость.

Моноцит - зрелая клетка. Размер - 12 - 20 мкм. Ядро светло-фиолетового цвета, может иметь различную форму - круглую, овальную, подковообразную, кольцевидную, в виде петли, бабочки. гриба, иногда становится сегментированным. Структура хроматина крупно-сетчатая, петлистая. Ядро занимает большую или равную с цитоплазмой часть клетки. Цитоплазма серовато-голубая, дымчатая, нередко содержит пылевидную азурофильную зернистость и вакуоли.

Макрофаги - крупные клетки (15 - 80 мкм) неправильной формы. Ядро чаще одно, овальное или продолговатое, хроматин неплотный. Цитоплазма обильная, без четких границ, голубая, иногда с азурофильными гранулами. В макрофагах можно обнаружить различные включения - обломки клеток, эритроциты, пигмент, капли жира, иногда бактерии и т. д.