Кровяные пластинки

Тромбоциты, или кровяные пластинки (рис. 24–21) — фрагменты расположенных в красном костном мозге мегакариоцитов (см. рис. 24–7,1). Размеры кровяных пластинок в мазке крови — 3–5 мкм. Количество тромбоцитов в циркулирующей крови — 190–40510⁹/л. Две трети кровяных пластинок находятся в крови, остальные депонированы в селезёнке. Продолжительность жизни тромбоцитов — 8 дней. Старые тромбоциты фагоцитируются в селезёнке, печени и костном мозге. Циркулирующие в крови тромбоциты могут при ряде обстоятельств активироваться, активированные тромбоциты участвуют в свёртывании крови и восстановлении целостности стенки сосуда. Одно из важнейших свойств активированных кровяных пластинок — их способность к взаимной адгезии и агрегации, а также адгезии к стенке кровеносных сосудов.

Рис. 24–21. Тромбоцит имеет форму овального или округлого диска. В цитоплазме видны мелкие скопления гликогена и крупные гранулы нескольких типов. Периферическая часть содержит циркулярные пучки микротрубочек (необходимы для сохранения овальной формы тромбоцита), а также актин, миозин, гельзолин и другие сократительные белки, нужные для изменения формы тромбоцитов, их взаимной адгезии и агрегации, а также для ретракции образовавшегося при агрегации тромбоцитов сгустка крови. По периферии тромбоцита расположены также анастомозирующие мембранные канальцы, открывающиеся во внеклеточную среду и необходимые для секреции содержимого a‑гранул. В цитоплазме рассеяны узкие, неправильной формы мембранные трубочки, составляющие плотную тубулярную систему; трубочки содержат циклооксигеназу (необходима для окисления арахидоновой кислоты и образования тромбоксана TXA₂; ацетилсалициловая кислота (аспирин) необратимо ацетилирует циклооксигеназу, локализованную в трубочках плотной тубулярной системы, что блокирует образование тромбоксана, необходимого для агрегации тромбоцитов; в результате функция тромбоцитов нарушается, и время кровотечения удлиняется). [11].

 Гликокаликс. Выступающие наружу части молекул интегральных белков плазматической мембраны, богатые полисахаридными боковыми цепями (гликопротеины), создают внешнее покрытие липидного бислоя — гликокаликс. Здесь же адсорбированы факторы коагуляции и иммуноглобулины. На наружных частях гликопротеиновых молекул находятся рецепторные места. После их соединения с агонистами индуцируется сигнал активации, передающийся к внутренним частям периферической зоны тромбоцитов.

 Плазматическая мембрана содержит гликопротеины, выполняющие роль рецепторов при адгезии и агрегации тромбоцитов (рис. 24–22). Так, гликопротеин Ib (GP Ib, Ib‑IX) важен для адгезии тромбоцитов, он связывается с фактором фон Виллебранда и подэндотелиальной соединительной тканью. Гликопротеин IV (GP IIIb) — рецептор тромбоспондина. Гликопротеин IIb‑IIIa (GP IIb‑IIIa) — рецептор фибриногена, фибронектина, тромбоспондина, витронектина, фактора фон Виллебранда; эти факторы способствуют адгезии и агрегации тромбоцитов, опосредуя формирование между ними «мостиков» из фибриногена.

Рис. 24–22. Мембранные рецепторы тромбоцита [11]. При повреждении стенки сосуда рецепторы тромбоцитов связывают различные факторы. В результате происходят адгезия и агрегация тромбоцитов. Так, гликопротеин Ib (GP Ib) связывает фактор фон Виллебранда (vWF) и опосредует адгезию к стенке повреждённого сосуда. Гликопротеин IIb-IIIa (GP IIb-IIIa) связывает фибриноген и опосредует взаимодействия между тромбоцитами. Плазменный фактор свёртывания Va мембраны тромбоцита связывает фактор гемокоагуляции Xa. Взаимодействие АДФ с соответствующим рецептором тромбоцита стимулирует циклооксигеназный путь окисления арахидоновой кислоты с выделением тромбоксана TXА₂, способствующего дальнейшей агрегации тромбоцитов.

 Гранулы. Тромбоциты содержат 3 типа гранул (-, -, ) и микропероксисомы.

 -Гранулы содержат различные гликопротеины (фибронектин, фибриноген, фактор фон Виллебранда), связывающие гепарин белки (например, фактор 4 тромбоцитов), тромбоцитарный фактор роста PDGF и трансформирующий фактор роста b, плазменные факторы свёртывания VIII и V, а также тромбоспондин (способствует адгезии и агрегации тромбоцитов) и рецептор клеточной адгезии GMP-140.

Таким образом, -гранулы содержат белки, выделяющиеся из активированных тромбоцитов. Так, фактор 4 тромбоцитов регулирует проницаемость стенки сосудов, мобилизацию Са²⁺ из кости, хемотаксис моноцитов и нейтрофилов, способен нейтрализовать противосвёртывающие свойства гепарина. Тромбоцитарный фактор роста (PDGF) и трансформирующий фактор роста b (TGFb), как и фактор 4, выступают в роли хемоаттрактантов для лейкоцитов и фибробластов. PDGF влияет на пролиферацию многих клеток и имеет большое значение при заживлении ран, поскольку стимулирует пролиферацию фибробластов, ускоряя заживление ран. Тромбоспондин, секретируемый активируемым тромбоцитом, связывается с GP IIIb плазмолеммы и внеклеточными компонентами (гепарином, фибриногеном, фибронектином, коллагеном типа V, ламинином, плазминогеном), способствуя адгезии и агрегации тромбоцитов. Фактор V необходим в качестве кофактора для опосредованной фактором Xa активации протромбина с последующим его конвертированием в тромбин. В активированных тромбоцитах фактор V встраивается в плазмолемму и в виде Va служит рецептором для фактора Xa (см. рис. 24–22). GMP‑140 (селектин P) — мембранный белок ‑гранул, при активации и дегрануляции тромбоцита встраивается в плазмолемму и служит рецептором адгезии. ‑Гранулы содержат также фибронектин, фибриноген, фактор фон Виллебранда.

 Другие гранулы. ‑Гранулы накапливают неорганический фосфат P_i, АДФ, АТФ, Ca²⁺, серотонин и гистамин (серотонин и гистамин не синтезируются в тромбоцитах, а поступают из плазмы). ‑Гранулы содержат лизосомные ферменты и могут участвовать в растворении тромба. Микропероксисомы обладают пероксидазной активностью.

Функции тромбоцитов. В физиологических условиях тромбоциты находятся в неактивном состоянии, т.е. свободно циркулируют в крови, не адгезируют друг с другом и не прикрепляются к эндотелию сосуда (частично это связано с тем, что эндотелиальные клетки вырабатывают простациклин PGI₂, препятствующий адгезии тромбоцитов к стенке сосуда). Однако при повреждении кровеносного сосуда тромбоциты вместе с плазменными факторами свёртывания крови образуют сгусток крови — тромб, предотвращающий кровотечение (рис. 24–23).

 Остановка кровотечения происходит в 3 этапа. 1. Сначала происходит сокращение просвета кровеносного сосуда. 2. Далее в повреждённом участке сосуда тромбоциты прикрепляются к стенке сосуда и, наслаиваясь друг на друга, образуют тромбоцитарную гемостатическую пробку (белый тромб). Эти события (изменение формы кровяных пластинок, их адгезия и агрегация) обратимы, так что слабо агрегированные тромбоциты могут отделяться от гемостатических тромбоцитарных пробок и возвращаться в кровоток. 3. Наконец, растворимый фибриноген превращается в нерастворимый фибрин, который формирует прочную трёхмерную сеть, в петлях которой расположены клетки крови, в том числе и эритроциты; это фибриновый — красный тромб.

Рис. 24–23. Образование тромба [11]. А — образование тромба начинается с прикрепления тромбоцитов к подэндотелиальной соединительной ткани. Свойства интактного эндотелия совместно с секретируемым эндотелиальными клетками простациклином PGI₂ препятствуют адгезии тромбоцитов. Однако, тромбоциты прикрепляются к коллагену подэндотелиальной соединительной ткани в местах повреждения стенки сосуда. Эта адгезия вызывает активацию и агрегацию тромбоцитов с последующим освобождением АДФ и образованием тромбоксана TXА₂. Б — образование тромбоксана TXА₂ и дальнейшее выделение АДФ стимулируют дополнительную агрегацию тромбоцитов в месте повреждения до тех пор, пока не образуется тромбоцитарная пробка. Освобождение тканевого фактора и контактная активация также запускают процессы внешней и внутренней коагуляции, в результате которых образуется тромбин. В — в результате коагуляции формируются нити фибрина, вплетающиеся в тромбоцитарный тромб и стабилизирующие его.

 Адгезия. В адгезии тромбоцитов участвуют коллаген, гликопротеин Ib, фактор фон Виллебранда, Ca²⁺ и другие факторы (например, тромбоспондин, фибронектин). Коллаген базальной мембраны эндотелия и подэндотелиальной соединительной ткани служит субстратом для адгезии тромбоцитов и стимулирует их последующую агрегацию. Гликопротеин Ib тромбоцита взаимодействует с фактором фон Виллебранда — комплексом белков, содержащихся в основном в ‑гранулах тромбоцитов, частично в эндотелии и его базальной мембране.

 Первичная агрегация. Вслед за адгезией начинается агрегация тромбоцитов. При этом Ca²⁺–зависимый трансмембранный гликопротеин IIb‑IIIa связывается с фибриногеном. Фибриноген опосредует связывание тромбоцитов, обеспечивая их агрегацию. Агрегацию запускают различные вещества: адреналин (через ‑адренорецепторы в плазматической мембране тромбоцитов), АДФ (из ‑гранул), тромбин.

 Вторичная агрегация (образование тромбоцитарной пробки). По мере прикрепления всё большего количества тромбоцитов к подэндотелиальной соединительной ткани они активируются. Активированные тромбоциты приобретают шаровидную форму, образуют метаболиты арахидоновой кислоты и секретируют содержимое - и ‑гранул. Если повреждение сосуда небольшое, то достаточно тромбоцитарной пробки (в частности, она может сама по себе остановить кровотечение). В противном случае включается механизм свёртывания крови.

 Коагуляция, или свёртывание крови. Тромбоциты высвобождают фибриноген в дополнение к уже присутствующему в плазме в норме. Фибриноген с помощью факторов свёртывания конвертируется в фибрин, образующий плотную фиброзную прокладку, к которой прикрепляется всё больше тромбоцитов и других клеток крови.

 Ретракция фибринового сгустка. Сгусток крови, или фибриновый гель — прикреплённая к повреждённой поверхности сосудов трёхмерная сеть фибриновых волокон, в которой находятся клетки крови, кровяные пластинки и сыворотка крови. В течение десятков минут после образования сгустка происходит его ретракция (сжатие), в результате которой из фибринового геля удаляется его жидкая часть (сыворотка), т.е. сгусток крови становится плотным тромбом. Ретракция кровяного сгустка предупреждает полную закупорку сосудов, создавая возможность восстановления кровотока.

 Судьба тромба. Тромб первоначально выступает в просвет сосуда, но позже он сокращается (ретракция тромба) и уплотняется. По мере заживления стенки сосуда тромб удаляется при помощи плазмина. Плазмин образуется из плазминогена, синтезируемого в печени. Дополнительно из ‑гранул тромбоцитов выделяются ферменты, разрушающие тромб. Стенка сосуда восстанавливается благодаря пролиферации ГМК и фибробластов, накоплению нового соединительнотканного матрикса, восстановлению эндотелия.

Образованию фибринового тромба предшествует каскад протеолитических реакций, приводящий к активации фермента тромбина, который и превращает фибриноген в фибрин. Таким образом, на одном из этапов тромбообразования происходит свёртывание крови — гемокоагуляция — часть системы гемостаза, самое непосредственное отношение к которой имеют тромбоциты.