Добавил:
ivanov666
Опубликованный материал нарушает ваши авторские права? Сообщите нам.
Вуз:
Предмет:
Файл:Санитарная микробиология. Учебное пособие
.pdf
Стафилококки – широко распространенные в природе микроорганизмы. Они встречаются в воде, воздухе, на коже и в дыхательных органах человека и животных. Бактериальные инфекции,
вызываемые стафилококками, характеризуются преимущественно
гноеродными процессами различной локализации. Проявляются в
виде абсцессов, флегмон, маститов, метритов, пнев моний, сепсиса. Токсигенные штаммы стафилококков могут вызвать пищевые
отравления у
людей.
Возбудители стафилококкозов в основном штаммы S. aureus,
реже S. epidermidis и некоторые другие виды рода Staphylococcus,
семейства Micrococcaceae.
Лабораторная диагностика стафилококкозов основана на результатах бактериологического исследования.
Бактериологическое исследование включает в себя обнаружение возбудителя в исходном материале методом световой
микроскопии, выделение чистой культуры посевом на питательные среды и идентификацию возбудителя по культуральноморфологическим, ферментативным, серологическим, а также
токсигенным признакам (методом биопробы).
Материал для исследования. Для прижизненной диагностики
пищевую продукцию или раневой экссудат, содержимое абсцессов отбирают стерильным шприцем, а при маститах материалом
служит секрет вымени.
Бактериологическая диагностика проводится по классической
триаде Генле – Коха путем:
– изучения морфологических свойств возбудителя, путем об-
наружения возбудителя в исходном материале при микроскопии мазков.
При окрашивании дифферинциально-диагностическим методом Грама клетки стафилококков грамположительные.
Имеют сферическую форму, диаметром 0,5–1 мкм, располагаются в виде скоплений неправильной формы, а также единично, парами и цепочками. Вирулентные штаммы могут
образовывать капсулу, их окрашивают на наличие капсулы;
– изучения культуральных свойств возбудителя, путем посева
из органов на МПА, МПБ и культивирования посевов при
температуре 37–38 °С, рН 7,2–7,4. Возбудитель является факультативным анаэробом. При посеве на МПА образуются
непрозрачные колонии правильной круглой формы, выпу-
151
клые, с гладкой поверхностью, ровными краями, диаметром
2–7 мм. На кровяном МПА вирулентные штаммы обычно ра-
стут, формируя широкую зону гемолиза. При росте на МПБ
наблюдается интенсивное помутнение среды и образование
осадка. Щтаммы Staphylococcus aureus вырабатывают золотистый или белый пигмент. Имеются специальные дифферинциальные среды.
Для идентификации стафилококков применяют их фаготипиро-
вание.
Биопроба проводится на белых мышах, выявляют токсигенные
свойства стафилококка.
Стрептококки встречаются в полости рта, носа, в глотке и
кишечнике и т. д. Обычно присутствие их в организме безвредно, но в некоторых случаях отдельные виды стрептококков могут
вызывать заболевания верхних дыхательных путей и гнойничковые поражения десен и кожи. Род Streptococcus содержит 29 видов.
S. pyogenes – возбудитель ряда заболеваний, преимущественно человека.
Лабораторная диагностика стрептококкозов основана на ре-
зультатах бактериологического исследования.
Бактериологическое исследование включает в себя обнару-
жение возбудителя в исходном материале методом световой микроскопии, выделение чистой культуры посевом на питательные
среды или методом биопробы, идентификацию возбудителя по
культурально-морфологическим, ферментативным, серологическим и патогенным признакам (методом биопробы).
Материал для исследования. При подозрении на стрептокок-
ковый токсикоз исследуют пищевую продукцию, а при страфилококковых маститах исследуют молоко. При подозрении на септические стрептококкозы (диплококковая инфекция и др.) – кровь из
сердца, селезенку, печень, костный мозг, носовые истечения.
Бактериологическая диагностика проводится по классической
триаде Генле – Коха путем:
– изучения морфологических свойств возбудителя, путем об-
наружения возбудителя в исходном материале при микроскопии мазков.
При окрашивании дифферинциально-диагностическим методом Грама клетки стрептококков грамположительные. Стрептококки представляют собой сферические или овальные грам-
152
положительные клетки диаметром 0,5–1,25 мкм, без спор и
жгутиков, часто образуют цепочки различной длины;
– изучения культуральных свойств возбудителя, путем по-
сева из органов на МПА, МПБ и культивирования посевов
при температуре 37–38°С, рН 7,2–7,4. Возбудитель является факультативным анаэробом. На общепринятых питательных средах растут плохо, обычно используют обогащенные среды с
кровью и глюкозой. На глюкозо-кровяном
МПА все виды патогенных стрептококков образуют мелкие колонии, чаще с зоной гемолиза. На МПБ стрептококки растут с помутнением среды, образованием пушистых
хлопьев.
Биопроба проводится на белых мышах.
Санитарная оценка. Необходимо тщательно проводить экс-
пертизу туш и органов животных, а при наличии в них гнойничковых процессов мясо использовать в пищу нельзя. Категорически
запрещается также использовать в пищу молоко коров, больных
маститом.
Профилактика токсикозов кокковой этиологии включает мероприятия по предохранению пищевых продуктов от попадания в
них данных микроорганизмов. Кроме того, люди, имеющие контакт с пищевой продукцией, должны обследоваться и иметь медицинские книжки.
САМОСТОЯТЕЛЬНАЯ РА Б О ТА СТУДЕНТОВ:
Изготовить мазки из культуры стафилококков (1. S. aureus),
окрасить по Граму, микроскопировать и зарисовать.
Изотовить мазки из культуры стрептококков (2. Str. pyogenes),
окрасить по Граму, микроскопировать и зарисовать.
Изучить визуально культуральные свойства стафилокок-3.
ков (S. aureus) и стрептококков (Str. pyogenes).
КОНТРОЛЬНЫЕ ВОПРОСЫ:
Как проявляются токсикозы стафилококкового и стрепто-1.
коккового происхождения?
Каким образом проводится лабораторная диагностика ста-2.
филококков?
Каким образом проводится лабораторная диагностика 3.
стрептококков?
153
Тема 5
Лабораторная диагностика возбудителей сальмонеллезов
ЦЕЛЬ ЗАНЯТИЯ: ознакомить студентов с лабораторной диагно-
стикой сальмонеллезов и санитарной оценкой зараженной продукции.
МАТЕРИАЛЫ И ОБОРУДОВАНИЕ:
– культура Salmonell, выращенная на МПА, МПБ (3 шт.);
– набор бактериальных красок для метода Грама;
– спиртовки;
– микроскопы.
Сальмонеллезы – группа острых септических заболеваний млекопитающих животных и птиц, болеет преимущественно молодняк
сельскохозяйственных животных (телята, поросята
та, пушных зверей, птицы) от 10 дней до 3–4-месячного возраста.
У взрослых животных маточного поголовья могут быть аборты у овец и жеребых кобыл. У человека сальмонеллез протекает в
виде токсикоинфекции.
При сальмонеллезе поражается желудочно-кишечный тракт, нарушается пищеварение и всасывание пищи, наблюдается профузный понос, отставание в росте и развитии, истощение и смерть.
Чаще всего это заболевание проявляется в хозяйствах, где наблюдаются антисанитарные условия.
В настоящее время известно более 2 тыс. серовариантов сальмонелл, объединенных в один род – Salmonellа. Род Salmonellа по
ферментативной активности условно подразделяют на 5 подродов.
Большинство сальмонелл, выделяемых от животных, входит в
І подрод (S. cholerae suis, S. tuphimurium, S. gallinarium, S. pullorum,
S. enteritidis, S. dublin, S. tuphi suis и др.). Сальмонеллы внутри
рода идентифицируют по антигенной структуре, каждый серологический вариант характеризуется определенным набором О- и
Н-антигенов.
Лабораторная диагностика сальмонеллеза основана на ре-
зультатах бактериологических, биохимических и серологических
исследований.
Бактериологическая диагностика заключается в изучении морфо-
логических свойств возбудителя в мазках из патматериала и чистой
культуры, которое проводится методом световой микроскопии.
154
, жеребята, ягня-
Основными видами сальмонелл являются S. dublin, S. tuphimurium – встречаются чаще у телят, S. cholerae suis – у поросят,
S. pullorum – у цыплят, S. gallinarium – у кур, индеек, фазанов,
диких птиц.
Сальмонеллы – сравнительно короткие палочки с закругленными концами (2,0–4,00,3–0,6 мкм), грамотрицательные, не образуют спор и капсул, в основном подвижные перитрихи, за исключением S. pullorum.
Изучение культуральных свойств
возбудителя проводится
путем посева из патматериала на МПА, МПБ с рН 7,2–7,4, культивированием в термостате при температуре 37–38 °С. Возбудитель
является факультативным анаэробом. При посеве на МПБ через
24 часа наблюдается равномерное помутнение с образованием
легкоразбивающегося осадка. На МПА формируются влажные,
слабовыпуклые, круглые колонии с ровными краями и гладкой
поверхностью сероватого цвета.
На среде Эндо и Левина образу-
ются полупрозрачные колонии диаметром 2,0–3,0 мм.
Для дифференциальной диагностики Salmonell от E. coli обяза-
тельно изучают биохимические свойства возбудителей.
Серологическую идентификацию E. coli и Salmonell осуществляют путем постановки реакции агглютинации с поливалентными, а затем с моновалентными сыворотками.
Биопроба проводится на белых мышах.
Санитарная оценка. Если в органах
и туше обнаружены
сальмонеллы, органы направляют на техническую утилизацию,
а тушу обезвреживают как всегда провариванием. Мясо считается обезвреженным, если внутри куска температура была не
менее 80 °С. В отдельных случаях при проварке мяса единичные
сальмонеллы все же выживают. В условиях комнатной температуры эти бактерии могут быстро размножаться и накапливаться
продукте в огромных количествах. Поэтому после проварки
в
обезвреженное мясо направляют для немедленной реализации.
Кратковременное хранение его (2–3 суток) допускают лишь при
температуре 0–2 °С. Мясо, в котором выделены сальмонеллы,
нельзя направлять в колбасное производство, поскольку термический режим варки колбас не гарантирует полной гибели сальмонелл. Такое мясо можно использовать в консервном
производ-
стве.
155
САМОСТОЯТЕЛЬНАЯ РАБОТА СТУДЕНТОВ:
Изучить морфологические и культуральные свойства 1.
Salmonell путем микроскопии окрашенных препаратов и
описания характера роста микробов на МПА и МПБ.
Провести микроскопию мазков, сделанных из чистой 2.
культуры Salmonell, окраску проводят по методу Грама.
КОНТРОЛЬНЫЕ ВОПРОСЫ:
Опишите морфологические свойства 1. Salmonell.
Опишите культуральные свойства 2. Salmonell.
156
Раздел 3.
ГЛОССАРИЙ
Авидность – степень сродства (мера прочности связывания)
антител с антигеном. Определяется аффинностью взаимодействия
между всеми антигенными детерминантами (эпитопами) и активными антигенсвязывающими участками антител (паратопами) при
образовании комплекса антиген-антитело.
Авирулентный – не ядовитый, не заразный, не обладающий
способностью заражать.
Агглютинация – склеивание бактерий в кучки. Агглютинат –
комочки склеенных бактерий под воздействием специфической
иммунной агглютинирующей сыворотки.
Агломерация – сбивание микробов в кучки (клубочки).
Адаптация – приспособление организма к условиям существо-
вания, например специфического фага к растворению негомологичных культур микробов.
Адаптивный иммунный ответ – антигенспецифическая иммунная реакция, развивающаяся в ответ на воздействие конкретных
антигенов и направленная на их удаление (в отличие от естественной резистентности, факторы которой формируются вне зависимости от внедрения чужеродных агентов и лишены специфичности).
Адгезия (прилипание) – взаимосвязь между клетками, осуществляемая взаимно-комплементарными молекулами клеточных
мембран (типа интегринов, селектинов и их рецепторов).
Адекватный – соответствующий по своим свойствам.
Адсорбция – сгущение газообразного или жидкого вещества на
поверхности твердого или жидкого тела.
Адъюванты – химические вещества, неспецифически усиливающие реакцию на антигены. Например, полный адъювант
Фрейна состоит из вазелинового масла, ланолина и убитых клеток
микобактерий туберкулеза, неполный – из вазелинового масла и
ланолина.
Активные метаболиты кислорода и азота – образуемые акти-
вированными фагоцитами бактерицидные метаболиты (супероксидный радикал, пероксид водорода, оксид азота и др.).
Акцепторы – в теории Эрлиха боковые цепи клеточной протоплазмы, химически связывающиеся с различными субстратами,
в том числе антигенами.
157
Алиментарный – имеющий отношение к пище, пищевой; за-
ряжение с принятым кормом.
Аллерген – антигены, вызывающие опосредованные IgE-
антителами аллергические реакции немедленного типа.
Аллергия (аллергическая реакция) – иммунная реакция ор-
ганизма на вещества антигенной природы, сопровождающаяся повреждением клеток, тканей и органов в результате воспалительного процесса.
Аллогенная (видовая) специфичность антигенов обеспечи-
вает отличия и
защиту представителей одного вида от особей дру-
гого вида.
Аллогенная трансплантация – донор и реципиент принадлежат к одному и тому же виду.
Аллогенный – генетически отличный организм в пределах
одного биологического вида.
Аллотипы – аллельные варианты белков, различающиеся по
антигенной специфичности у разных особей одного и того же
вида.
Альтернативный путь активации комплемента – процесс
активации системы комплемента С3 и факторов В, D, Р, Н, взаимодействующий в непосредственной близости к активирующей поверхности микроорганизма (без участия антител), с образованием
С3-конвертазы альтернативного пути (С3вВвР).
Амфитрих – бактерии со жгутиком на одном полюсе.
Анатоксины – обезвреженные токсины, сохранившие антиген-
ные свойства.
Анатоксины – токсины бактерий, потерявшие токсические
свойства при инактивации формалином, с сохранением антигенности.
Анафилаксия – повышенная чувствительность, особенно к парэнтеральному введению белковых тел, чужеродных сывороток.
Анафилаксия – явление резко повышенной чувствительности
к повторному введению гомологичного антигена, опосредованного главным образом IgE.
Анаэробы – бактерии, способные жить только без доступа атмосферного кислорода.
Антибиотики – бактерийные природные вещества, при помощи которых одни виды бактерий и грибов подавляются другими
видами микроорганизмов (явление антагонизма).
158
Антигены – генетически чужеродные, макромолекулярные вещества (белки, полисахариды), взаимодействующие своими эпитопами со специфическими рецепторами Т- и В-клеток, способные
индуцировать иммунный ответ, направленный на удаление данного антигена из организма.
Антитела – белки глобулярной природы, образующиеся в организме позвоночных В-лимфоцитами в ответ на введение антигенов и способные специфически
связывать их гаптены, имеющие
аналогичные эпитопы.
Антропонозы – болезни, свойственные человеку.
Артроспоры – распад мицелия вследствие сегментации на отдель-
ные клетки в виде четок (вид споруляции, преимущественно у грибов).
Аскомицеты – сумчатые грибы.
Аскоспоры – сумка со спорами.
Атопия – наследственно обусловленная (повышенной выра-
боткой IgE-антител, особенностями распределения тучных клеток,
проницаемости тканевых барьеров и т. д.) склонность к развитию
иммунного ответа в виде гиперчувствительности наследственного
типа (ГЧНТ).
Аутоантигенная специфичность обусловлена белками инди-
видуальности (антигенами тканевой совместимости) – собственными и «опознавательными знаками», имеющимися только в клетках данной особи.
Аутоантигены – собственные антигены организма, распознаваемые аутоантителами. Аутоантигены могут быть органоспецифическими или широко распространенными в тканях (чему соответствует органоспецифическая и системная формы аутоиммунных заболеваний).
Аутоиммунные процессы (аутоиммунитет, аутоиммунные болезни) – процессы и связанные с ними заболевания, обусловленные
приобретением иммунной системой способности распознавать
собственные антигены (аутоантигены) организма и реагировать на
них образованием аутоантител или аутоиммунных Т-лимфоцитов.
Аутолиз – саморастворение клеток крови и тканей под действием энзимов.
Аутотолерантность – состояние ареактивности факторов иммунной системы в отношении собственных тканей организма,
возникающее прежде всего как следствие элиминации аутоспецифических клонов лимфоцитов.
159
Аутотрансплантация – пересадка собственных органов и тка-
ней, т. е. пересадка в пределах одного организма.
Аффинность – степень прочности связи одной антигенной детерминанты (эпитопа) с одним связывающим участком антитела
(паратопом). Суммарную аффинность антител к различным эпитопам одного антигена обозначают термином «авидность».
Аэробы – бактерии, для жизнедеятельности которых необходим кислород.
Аэрогенный (
путь) – передача инфекции через воздух.
Бактериемия – присутствие бактерий в токе крови.
Бактерии – общее название низших бесхлорофилльных форм
растительного мира; в частности палочковидные формы, не образующие спор.
Бактериолизины – антитела, непосредственно растворяющие
(убивающие) бактерийные клетки.
Бактериостатический – «застойное» состояние бактерий в
смысле торможения роста.
Бактерицидный – убивающий бактерии, в более общем смыс-
ле – вредящий им.
Бацилла – палочковидная бактерия, образующая споры.
Белки острой фазы – защитные антибактериальные белки,
уровень которых повышается при инфекциях или воспалительных
процессах.
Броуновское движение – беспорядочное движение частиц кол-
лоидного раствора вследствие ударов о них молекул растворителя.
БЦЖ (от BCG – бацилла Кальметта – Герена) – аттенуированный
штамм Mycobacterium tuberculosis, применяемый в качестве вакцины, а также как адъювант для повышения активности антигена.
Вакцинация – искусственная иммунизация путем введения
вакцин для повышения устойчивости животных к инфекционным
заболеваниям.
Вакцины – биологические препараты, способные при введении
в организм индуцировать образование протективного иммунитета
против соответствующего заболевания.
Валентность антигена – количество антигенных детерминант на
молекулу антигена, которые могут реагировать с антителами. Каждая
антигенная детерминанта обладает антигенной специфичностью.
Валентность антитела – количество активных центров анти-
тела, способных вступить во взаимодействие с антигеном.
160
Соседние файлы в предмете [НЕСОРТИРОВАННОЕ]