Производственный микробиологический контроль на предприятиях молочной отрасли. Лабораторный практикум. Учебное пособие
.pdfсырье, создаются благоприятные условия для роста и размножения внесенных культур, в результате чего снижается активная кислотность (рН), изменяется консистенция, появляются специфический вкус и аромат, то есть получается продукт с заданными свойствами.
Закваски могут содержать как один бактериальный штамм, так и несколько. За рубежом закваски, состоящие из мезофильных бактериальных культур, разделяются на 5 групп: O, L, D, LD и ароматические закваски. В табл.1, взятой из Бюллетеня № 263/1991 Международной молочной федерации, приведены наименования штаммов заквасок в соответствии с указанной группой.
Таблица 1
Группы |
Наименование |
|
Мезофильные |
О |
Lactococcus lactis subsp. lactis |
|
Lactococcus lactis subsp. cremoris |
L |
Lactococcus lactis subsp. lactis |
|
Lactococcus lactis subsp. cremoris |
|
Leuconostoc mesenteroides subsp. cremoris |
D |
Lactococcus lactis subsp. lactis |
|
Lactococcus lactis subsp. cremoris |
|
Lactococcus lactis subsp. lactis biovar diacetilactis |
LD |
Lactococcus lactis subsp. lactis |
|
Lactococcus lactis subsp. cremoris |
|
Leuconostoc mesenteroides subsp. cremoris |
|
Lactococcus lactis subsp. lactis biovar diacetilactis |
Ароматические |
Leuconostoc mesenteroides subsp. dextranicum |
|
Leuconostoc mesenteroides subsp. cremoris |
|
Lactococcus lactis subsp. lactis biovar diacetilactis |
|
Термофильные |
|
Streptococcus thermophilus |
|
Lactobacterium delbruckii subsp. bulgaricum |
|
Lactobacterium delbruckii subsp. lactis |
|
Lactobacterium helveticum |
|
Lactobacterium acidophilum |
Закваски классифицируются на следующие типы в зависимости от температуры, при которой бактериальная культура имеет максимальную скорость роста и размножения:
61
- мезофильные бактерии с температурой развития от 20 до
30 ºС;
- термофильные бактерии с температурой развития от 40 до
45 ºС.
Микробиологи подбирают штаммы и закваску таким образом, чтобы бактерии достигали требуемого результата в симбиозе и не конкурировали друг с другом.
По составу микрофлоры основные закваски, применяемые в молочной промышленности, подразделяются на 3 группы: бактериальные, грибковые и смешанные (табл. 2).
Вспециальных научно-производственных лабораториях выделяют штаммы молочнокислых микроорганизмов, изучают их свойства, селекционируют, составляют и получают закваски.
Вцехах по производству заквасок готовят сухой и жидкий бактериальные концентраты, маточные закваски в виде сухих и жидких заквасок, а также получают натуральные и сухие кефирные грибки (зерна).
Сухой бактериальный концентрат в нашей стране чаще вырабатывают трех видов: мезофильных молочнокислых стрептококков, термофильных молочнокислых стрептококков и ацидофильных молочнокислых палочек. Концентрат содержит от 150 до 300 млрд клеток в 1 г.
Продолжительность свертывания молока при внесении одной порции концентрата на 1 дм3 молока при оптимальной температуре составляет: у мезофильных стрептококков − 4,0 - 5,5 ч, у термофильных молочнокислых стрептококков − 3,0 - 4,5 ч, а у ацидофильных палочек − 2,5 - 3,5 ч. Срок хранения концентрата при температуре 3 - 10 °С 8 мес. со дня выработки.
Жидкий бактериальный концентрат готовят из ме-
зофильных молочнокислых стрептококков.
Концентрат разливают во флаконы по (5 ± 0,5) см3 (полпорции) и по (10 ± 0,5) см3 (порция), укупоривают, охлаждают до температуры от +8 до -5 ˚С и хранят не более двух месяцев со дня выработки. Жидкий бактериальный концентрат содержит не менее 150 млрд клеток в 1 см3.
62
|
|
|
|
|
|
|
|
Таблица 2 |
Закваски |
|
Микроорганизмы |
Продукт |
|
||||
Бактериальные |
|
Lac. lactis, Leu. cremoris, Lac. cremoris, |
Творог, сметана, простокваша и |
|||||
Мезофильные |
молочнокислые |
Lac. diacetylactis, Leu. dextranicum |
другие кисломолочные продукты, |
|||||
стрептококки |
|
|
|
|
|
кисло-сливочное масло, сыры |
||
Термофильные |
молочнокислые |
Str. |
thermophilus, |
Lbm. |
bulgaricum, |
Мечниковская |
и |
южная |
бактерии |
|
Lbm. |
acidophilum, |
Lbm. |
helveticum, |
простокваши, ряженка, йогурт, |
||
|
|
Lbm. lactis |
|
|
варенец, ацедофилин, крупные |
|||
|
|
|
|
|
|
твердые сыры |
|
|
Бактерии, участвующие в |
Пропионовокислые |
бактерии, Lbm. |
Сыры с высокой |
температурой |
||||
созревании сыра |
|
casei |
subsp. |
|
rhamnosus |
второго нагревания, мягкие сыры |
||
|
|
(казеинкультура), Brevibacterium linens |
|
|
|
|||
|
|
(вырабатывает красную слизь) |
|
|
|
|||
Грибковые |
|
|
|
|
|
|
|
|
Культура рокфора |
Penicillium roqueforti |
|
Сыр рокфор |
|
|
|||
Культура камамбера |
Pen. camamberti, Pen. candidum, Pen. |
Сыр камамбер |
|
|
||||
|
|
album |
|
|
|
|
|
|
Смешанные |
бактериально- |
Lac. lactis, Lbm. buchneri, Lbm. brevis, |
Кефир, кумыс |
|
|
|||
грибковые |
|
Lbm. |
bulgaricum, |
Lbm. |
acidophilum, |
|
|
|
|
|
дрожжи Saccharomyces lactis и рода |
|
|
|
|||
|
|
Torulopsis, уксуснокислые бактерии |
|
|
|
|||
63
Сухие закваски приготовляют на основе бактериальной массы (из бактериального концентрата) или высушиванием комбинаций культур бактерий в защитной среде.
Продолжительность свертывания молока (при внесении одной порции закваски для творога и сметаны на 2 - 2,5 дм3, остальных заквасок на 100 см3 молока) составляет для закваски из бактериальной массы 5 - 9 ч, для закваски из комбинации культур−
16 - 18 ч.
Количество молочнокислых бактерий в 1 г сухой закваски составляет 107 - 108.
Жидкие закваски готовят на стерильном обезжиренном или цельном молоке. Молоко стерилизуют в течение 10 - 15 мин при температуре 121 °С, охлаждают до (37 ± 1) °С и для проверки на стерильность термостатируют при этой температуре в течение 2 сут. Перед заквашиванием молоко контролируют микроскопированием окрашенного препарата. При просмотре не менее чем в 10 полях зрения микроскопа должны отсутствовать вегетативные клетки и споры.
После этого в молоко вносят комбинацию культур и выдерживают его при оптимальной температуре развития до образования сгустка. Закваску фасуют в стеклянные флаконы по 20, 50 и 100 см3, флаконы укупоривают и маркируют (этикетируют). Жидкие закваски имеют срок годности: 10 сут при 3 - 8 °С и 5 сут при комнатной температуре хранения.
Кефирные грибки (зерна) представляют естественную симбиотическую закваску для кефира. В них входят молочнокислые стрептококки, палочки, дрожжи и уксуснокислые бактерии
(рис. 1).
Процесс получения натуральных кефирных грибков включает подготовку молока, культивирование кефирных грибков, отделение, фасование, укупоривание, маркирование и хранение. Для культивированных кефирных грибков используют обезжиренное молоко, пастеризованное при температуре 92 - 95 °С в течение 20 - 30 мин, в которое помещают грибки в соотношении 1:20. Выращивание проводят при температуре 18 - 22 °С. Ежедневно молоко меняют, т. е. грибки заливают свежими порциями питательной среды. Молоко, в котором культивировались кефирные грибки, представляет собой уже культуральную кефирную
64
закваску (грибковую), содержащую ту же микрофлору, что и кефирный грибок.
По мере роста грибков 1 - 2 раза в неделю их отделяют от закваски, фасуют порциями в стерильные флаконы, заливают обезжиренным молоком или сывороткой. Срок хранения кефирных грибков составляет 10 дней при температуре 8 - 10 °С.
Сухие кефирные грибки получают из натуральных (живых) кефирных грибков путем высушивания в защитной среде.
Продолжительность сквашивания молока при соотношении грибка и молока 1:40 и температуре 18 - 22 °С для натуральных грибков составляет 16 - 18 ч, для сухих – 24 - 28 ч. Кислотность сгустка 90 - 110 °Т. В микроскопическом препарате наблюдаются диплококки, короткие цепочки, единичные палочки и клетки дрожжей (рис. 2).
Рис. 1. Кефирные грибки (зерна) |
Рис. 2. Микроскопическая |
|
картина грибковой кефирной за- |
|
кваски |
Этапы приготовления заквасок (рис. 3). Существуют сле-
дующие названия заквасок:
1 – промышленная закваска, оригинальная закваска – исходная культура, которую молочные заводы покупают у специальных научно-производственных лабораторий;
2 – материнская закваска – приготавливается из оригинальной на молочном заводе. Она готовится ежедневно и является, как указывает название, исходной для всех заквасок;
65
3 – промежуточная закваска (вторичная) – промежуточный этап производства больших объемов производственной закваски; 4 – производственная закваска – закваска, используемая в
производстве.
Рис. 3. Этапы приготовления заквасок: а – флакон; б – колба с первичной или материнской закваской; в – емкость для вторичной закваски; г – заквасочник для производственной закваски: 1 – вентиль; 2 – мешалка; 3 и 10 – змеевики; 4 – облицовка; 5 – крышка; 6 – механизм подъема и поворота крышки; 7 - резервуар; 8 – кожух; 9 – теплоизоляция; 11 – кран
Дня получения материнской закваски мезофильных молочнокислых стрептококков одну порцию сухой закваски вносят в 2 дм3 стерилизованного молока и термостатируют при 26 °С в течение 12 - 16 ч. Для приготовления вторичной (промежуточной) закваски в стерилизованное молоко вносят 0,5 - 1 % материнской закваски и культивируют посевы 10 - 12 ч. Если в закваске преобладает Lac. cremoris, то период сквашивания продлевают до 12 - 14 ч, или увеличивают количество посевного материала до 2 - 3 %. Производственную закваску мезофильных стрептококков получают посевом в пастеризованное молоко 0,5 – 1 % или
66
2 - 3 % вторичной производственной закваски и выращиванием посевов также в течение 10 - 12 ч или 12 - 14 ч.
Материнскую закваску термофильного стрептококка и болгарской палочки получают внесением одной порции сухой закваски в 100 см3 стерилизованного молока. Посевы культивируют при 43 °С в течение 5 - 7 ч. Для приготовления производственной закваски посевной материал вносят в молоко в количестве 1 % и сквашивают его в течение 3 ч. Таким же образом готовят закваски ацидофильной палочки. Однако культивирование проводят при температуре 38 °С в течение 5 - 5,5 ч.
Режимы приготовления основных групп заквасок приведены в табл. 3.
Бактериальный концентрат используют для приготовления производственной закваски или непосредственно продукта после активизации (табл. 4) или без активизации (культуры прямого внесения).
При выработке сыра используется вторичная или производственная закваска (рис.4).
Рис. 4. Схема приготовления бактериальных заквасок трехпересадочным способом: I - колба с первичной закваской; II - емкость для вторичной закваски; III - заквасочник для производственной закваски; IV - аппарат выработки сырного зерна
67
68
|
|
|
|
|
|
|
|
|
Таблица 3 |
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
Продукт |
Микрофлора |
Темпера |
|
|
Закваски |
|
|
|
|
|
|
закваски |
|
тура |
материнская |
вторичная |
производственная |
|
|||
|
|
|
скваши- |
Соотношение |
Продолжи- |
Коли- |
Продолжи- |
Коли- |
Продолжи- |
|
|
|
|
вания, |
количества сухой |
тельность |
чество, |
тельность |
чество, |
тельность |
|
|
|
|
°С |
закваски и молока, |
сквашива- |
% |
сквашива- |
% |
сквашива- |
|
|
|
|
|
порция на 1 дм3 |
ния, ч |
|
ния, ч |
|
ния, ч |
|
1 |
2 |
|
3 |
4 |
5 |
6 |
7 |
8 |
9 |
|
Творог, |
Мезофильные |
26 |
1/2 |
12-16 |
0,5-1 |
10-12 |
0,5-1 |
10-12 |
|
|
сметана, |
стрептококки |
|
|
|
|
|
|
|
|
|
простокваша и |
(преобладает |
|
|
|
|
|
|
|
|
|
др. |
Lac. lactis) |
|
|
|
|
|
|
|
|
|
То же |
То |
же |
24 |
1/2 |
14-18 |
0,5-1; |
12-14; |
0,5-1; |
12-14; |
|
|
(преобладает |
|
|
|
2-3 |
10-12 |
2-3 |
10-12 |
|
|
|
Lac. cremoris) |
|
|
|
|
|
|
|
|
|
Йогурт, |
Термофильный |
43 |
1/0,1 |
5-7 |
1 |
3 |
1 |
3 |
|
|
простокваша |
стрептококк |
и |
|
|
|
|
|
|
|
|
мечниковская, |
болгарская |
|
|
|
|
|
|
|
|
|
напитки «Юж- |
палочка (сим- |
|
|
|
|
|
|
|
|
|
ный», «Сне- |
биотическая) |
|
|
|
|
|
|
|
|
|
жок» и др. |
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
Окончание табл.3
1 |
|
2 |
|
3 |
4 |
5 |
6 |
7 |
8 |
9 |
То |
же, |
То же (раздельно), |
40 |
1/0,1 |
12-18 |
0,5-1; |
5-5,5; |
0,5-1; |
5-5,5; |
|
варенец, |
|
термофильный |
|
|
|
2-3 |
3,5-4,5 |
2-3 |
3,5-4,5 |
|
ряженка |
|
стрептококк |
(с |
|
|
|
|
|
|
|
|
|
добавлением или без |
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
добавления |
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
болгарской палочки) |
|
|
|
|
|
|
|
|
Ацидофильное |
Ацидофильная |
38 |
1/0,1 |
12-14 |
0,5-1; |
5-5,5; |
0,5-1; |
5-5,5; |
||
молоко, |
|
палочка |
|
|
|
|
2-3 |
4,0-4,5 |
2-3 |
4,0-4,5 |
ацидофильная |
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
паста, |
напито |
|
|
|
|
|
|
|
|
|
«Московский», |
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
ацидофильная |
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
смесь «Малютка |
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
Кумыс |
|
Болгарская |
и |
30 |
2/0,3 + |
7-10* |
10-20 |
7-10* |
20 |
4-6** |
жирный, |
|
ацидофильная |
|
смыв с |
7-10* |
10-20 |
7-10* |
|
|
|
кумыс |
|
палочки; |
дрожжи, |
30 |
дрожжей |
|
|
|
5-7 |
14-15 |
нежирный |
сбраживающие |
|
2 проби- |
|
|
|
|
|
||
|
|
лактозу |
|
|
рок |
|
|
|
|
|
*Дополнительная выдержка при температуре 16 - 18 °С в течение 3 - 6 ч. для накопления дрожжей.
**Дополнительная выдержка при температуре 16 - 18 °С в течение 8 - 24 ч. для накопления дрожжей.
69
70
|
|
|
|
|
|
Таблица 4 |
|
|
|
|
|
|
|
Продукт |
Микрофлора |
Вид |
Тем- |
Продолжи- |
Кислот- |
Соотношение одной |
|
|
бактериаль- |
пера- |
тельность |
ность, °Т |
порции |
|
|
ного |
тура, |
термостати- |
|
активизированного |
|
|
концентрата |
°С |
рования, ч |
|
бактериального |
|
|
|
|
|
|
концентрата и молока |
|
|
|
|
|
|
(сливок), порция на 1 |
|
|
|
|
|
|
дм3 |
Творог, сметана |
Мезофильные |
Сухой |
30 |
4,0-5 |
43-45 |
1/2000 |
|
стрептококки |
жидкий |
30 |
4,0-5 |
42-48 |
1/3000 |
Ряженка, варенец |
Термофильные |
Сухой |
|
|
|
|
|
стрептококки |
|
40 |
3,5-4 |
38-42 |
1/500 |
Ацидофильное |
Ацидофильные |
Сухой |
|
|
|
|
молоко, |
палочки |
|
|
|
|
|
ацидофильная |
|
|
|
|
|
|
паста, напиток |
|
|
|
|
|
|
«Московский», |
|
|
|
|
|
|
детские молочные |
|
|
|
|
|
|
продукты |
|
|
38 |
3,5-4 |
40-45 |
1/500 |
|
|
|
