mikra

Возможно получение живых вакцин генно-инженерным способом. Принцип получения таких вакцин сводится к созданию непатогенных для человека рекомбинантных штаммов, несущих протективные антигены патогенных микробов и способных при введении в орг. человека размножаться и создавать иммунитет. Такие вакцины называют векторными.

Вне зависимости от того, какие штаммы включены в вакцины, бактерии получают путѐм выращивания на искусственных питательных средах, культурах клеток или куриных эмбрионах. В живую вакцину, как правило, добавляют стабилизатор, после чего подвергают лиофильному высушиванию.

В связи с тем, что живые вакцины способны вызывать вакцинную инфекцию (размножаются в организме, вызывая воспалительный процесс проходящий без клинических проявлений), они всегда вызывают перестройку иммунобиологического статуса организма и образование специфических антител. Это так же может являться недостатком, т. к. живые вакцины чаще вызывают аллергические реакции.

60. Вакцинопрофилактика. Вакцины из убитых бактерий и вирусов. Принципы

приготовления. Примеры убитых вакцин. Ассоциированные вакцины. Преимущества и недостатки убитых вакцин.

Иммунопрофилактика – способ предупреждения инфекционных заболеваний путем создания искусственного специфического иммунитета. Выделяют вакцинопрофилактику и серопрофилактику.

Убитые (инактивированные). Убитые вакцины изготовляют из микрооргнизмов, убитых физическим (нагревание) или химическим (фенол, формалин, ацетон) методами.

Их получают путем выращивания патогенных бактерий и вирусов на искусственных питательных средах, инактивируют, выделяют антигенные комплексы, очищают, конструируют в виде жидкого или лиофильного препарата.

1.Брюшно-тифозная спиртовая вакцина;

2.Лептоспирозная;

3.Холерная;

4.Имовакс Полио;

5.Гриппозная инактивирвоанная жидкая;

6.Вакцина против клещевого энцефалита;

7.ЭнцеВир, Энцепур (клещевой энцефалит);

8.Антирабическая;

9.Паратифная В;

10.Хаврикс (гепатит А);

11.Аваксим (Гепатит А);

12.Геп-А-ин-ВАК (Гепатит А).

Преимущества:

1.Стабильны и безопасны;

2.Легко дозируются.

Недостатки:

1.Реактогенны;

2.Содержат фенол;

3.Требуется неоднократная вакцинация.

Ассоциированные вакцины

Это комбинированные вакцины, в результате действия которых иммунтет формируется одновременно к нескольким инфекциям. Если в препарат входят однородные антигены, то такую ассоциированную вакцину называют поливакциной. Если же ассоциированный препарат состоит из разнородных антигенов, то его целесообразно называть комбинированной вакциной

АКДС (ассоциированная коклюшно-дифтерийная столбнячная) – из убитых коклюшных бактерий и инактивированных экзотоксинов дифтерии и столбняка.

Тривакцина – из аттенуированных (ослабленных) вирусов кори, краснухи и праротита.

Тетракокк – из анатоксинов дифтерии и столбняка и убитых коклюшных бактерий и инактивированных вирусов полиомиелита.

Примером поливакцины можно считать живую полиомиелитную поливакцину, содержащую аттенуированные штаммы вируса полиомиелита I, II, III типов. Примером комбинированной вакцины является АКДС, куда входят инактивированная корпускулярная коклюшная вакцина, дифтерийный и столбнячный анатоксин. КПК (корь, краснуха, свинка).

61. Молекулярные вакцины: анатоксины. Получение. Использование анатоксинов для

профилактики инфекционных заболеваний. Примеры вакцин.

Анатоксины – препараты, содержащие модифицированные химическим путем путем экзотоксины, лишенные токсических свойств, но сохраняют высокую антигенность и иммуногенность. Их получают из экзотоксинов, обезвреженных формалином.

Примеры: АДС – дифтерийно-столбнячные анатоксин;

Трианатоксин – обезвреженные формалинм экзотоксины ботулизма А, В, Е;

Тетраанатоксин – обезвреженные формалином экзотоксины ботулизма А, В, Е и столбняка;

Пентаанатоксин – обезвреженные формалином экзотоксины ботулизма А, В, Е;

Секстаанатоксин;

Аs – анатоксин;

Вакцина холерная бивалентная химическая таблетированная.

Преимущества:

1. Менее реактогенны.

Недостатки:

1.Слабые иммуногены и поэтому к ним для повышения эффективности добавляют адъюванты (помощники): Они действуют на антиген и организм в целом. Действие на антиген сводится к укрупнению молекул антигена, т. е. превращению растворимых антигенов в корпускулярные, в результате чего антиген лучше захватывается иммунокомпетентными клетками. При воздействии на организм в месте инъекции адъюванты вызывают воспалительный процесс образование фиброзной капсулы, что способствует более длительному сохранению антигена в «депо» и суммации антигенных раздражений. Адъюванты так же непосредственно активируют пролиферацию В, Т и А систем иммунитета.

Минеральные соединения;

Соединения костного мозга;

Цитокины;

Синтетические пептиды.

Анатоксины применяются для профилактики и реже, для лечения токсинемических инфекций (дифтерия, газовая гангрена, ботулизм, столбняк). Так же анатоксины применяются для получения антитоксических сывороток путем гипериммунизации животных.

62. Генно-инженерные вакцины. Получение. Применение. Преимущества и недостатки.

Третье поколение вакцин – генно-инженерные вакцины – это препараты, полученные с помощью биотехнологии, которая по сути сводится к генетической рекомбинации .

I.Биосинтетические – искусственно созданные антигены микробов. Для их получения используют дрожжевую клетку, в которую встраивают ген патогенного микроорганизма, отвечающий за синтез данного антигена.

Вакцины от Гепатита В:

Энджерикс (Бельгия);

ДНК-рекомбинантная (США);

Вакцина гепатита В рекомбинантная дрожжевая (Куба);

Комбиотех ЛТД (Россия).

Преимущества:

1.Меньше побочных эффектов, так как не содержат микроорганизмов;

2.Вызывают узкоспецифический иммуитет;

3.Возможно комплектование по иммуногенным свойствам.

Недостатки:

Менее эффективны по сравнению с традиционными, так как вирусы вариабельны.

II.Векторные (рекомбинантные) вакцины – получают встраиванием генов различных возбудителей в геном ослабленного вируса или бактерии (вектор). Иммунитет формируется к нескольким инфекциям.

III.Рибосомальные вакцины – получают путем выделения микробных рибосом с матрицей иРНК = иммуномодуляторы.

ИРС-19;

Бронхомунал;

Рибомунил.

Подробное получение Для начала получают ген, который должен быть встроен в геном реципиента.

Небольшие гены могут быть получены методом химического синтеза. Для этого расшифровывается число и последовательность аминокислот в белковой молекуле вещества, затем по этим данным узнают очерѐдность нуклеотидов в гене, далее следует синтез гена химическим путем.

Крупные структуры, которые довольно сложно синтезировать, получаются путем выделения

(клонирования), прицельного выщепления этих генетических образований с помощью

рестриктаз.

Полученный одним из способов целевой ген с помощью ферментов сшивается с другим геном, который используется в качестве вектора для встраивания гибридного гена в клетку. Вектором могут служить плазмиды, бактериофаги, вирусы человека и животных. Экспрессируемый ген встраивается в бактериальную или животную клетку, которая начинает синтезировать несвойственное ей ранее вещество, кодируемое экспрессируемым геном.

В качестве реципиентов экспрессируемого гена чаще всего используется E. coli, B. subtilis, псевдомонады, дрожжи, вирусы, некоторые штаммы способны переключаться на синтез чужеродного вещества до 50% своих синтетических возможностей – эти штамм называются

суперпродуцентами.

Иногда к генно-инженерным вакцинам добавляется адъювант.

63. Вакцинотерапия. Понятие о лечебных вакцинах. Получение. Применение. Механизм

действия.

Иммунотерапия - это лечение острых и хронических заболеваний при помощи медицинских биологических средств. Подразделяется на специфическую и специфическую.

Неспецифические:

Иммунокорректоры;

Адаптогены.

Специфические:

Лечебные вакцины;

Лечебные сыворотки.

Лечебные вакцины

Применяются для перевода хронической стадии болезни в острую при неэффективности антибиотикотерапии вследствие лекарственной устойчивости микроорганизма. Действие данных вакцин основано на стимуляции защитных сил макроорганизма.

Классификация

По природе иммуногена лечебные вакцины:

Убитые (инактивированные):

1.Бруцеллезная;

2.Герпетическая;

3.Гонококковая;

4.Стафилококковая жидкая;

5.Дизентерийная

Химические (субклеточные):

1.Протейная;

2.Стафилококковые антифагин;

3.Стафилококковая сухая;

4.Поликомпонентная из антигенов условно патогенных микроорганизмов.

Применяются при длительном течении инфекции, при бактерио- и вирусоносительстве в случаях безуспешной антибиотикотерапии. Механизмы действия лечебных вакцин изучены недостаточно. При хронических инфекциях всегда есть источник поступления антигена.

Целесообразность введения вакцин на фоне специфической антигенной перегрузки не всегда поддается обоснованию. Лечебные моновакцины усиливают не только специфический иммунитет, но и стимулируют неспецифические факторы иммунитета, наблюдаются увеличение числа и нормализация функциональной активности субпопуляций Т-клеток,

фагоцитов, повышается уровень общего и специфического иммуноглобулина. Решающими факторами действия таких вакцин являются стимуляция функции вспомогательных клеток

(макрофагов, дендритных клеток, клеток Лангерганса и др.) и усиление фагоцитоза, процессинга, представления антигена и секреции цитокинов. Получают из убитых м/о.

64. . Диагностические антигенные препараты: диагностикумы, аллергены, токсины.

Получение. Применение.

В диагностических целях при обнаружении антител в сыворотке крови больных,

Необходимость использования диагностикумов для серологических реакций связана не только с явным их преимуществом перед живыми культурами микробов (безопасность в работе), но еще и потому, что для приготовления диагностикумов подбираются штаммы микроорганизмов с высокой чувствительностью к антителам и способностью длительно сохранять антигенные свойства. Для инактивации микроорганизмов при приготовлении диагностикумов чаще всего используются химические вещества, особенно формалин, являющийся лучшим консервантом. Убитые нагреванием микробы хуже сохраняют антигенные свойства и применяются редко. В серологических реакциях (реакции агглютинации, реакции пассивной гемагглютинации, реакции связывания комплемента, реакции торможения гемагглютинации) для выявления специфических антител применяются: бактериальные, эритроцитарные и вирусные диагностикумы.

Бактериальные диагностикумы могут содержать инактивированную микробную взвесь или отдельные антигенные компоненты бактерий: О, Н или Vi-антигены и используются в

танином или формалином) с адсорбированными на них антигенами, извлеченными из бактерий, и применяются в РПГА (реакции пассивной гемагглютинации). В том случае, когда РПГА используется для выявления антигена в выделениях больных, в тканях и др., применяют «антительные диагностикумы», т. е. эритроциты, сенсибилизированные антителами.

Вирусные диагностикумы — препараты, содержащие инактированные вируссодержащие жидкости (культуральные, из куриных эмбрионов или организма животных, зараженных соответствующим вирусом), применяются в РСК (реакции связывания комплемента), реакции торможения гемагглютинации (РТГА) и реакции нейтрализации.

Аллергия проявляется в нарушении обычного течения общих или местных реакций при повторном поступлении в организм веществ, называемых аллергенами. Понятие аллергена близко к понятию антигена. Аллергенами чаще всего бывают убитые микробные тела или различные продукты микробов.

Выявление состояния повышенной чувствительности организма может быть диагностическим приемом. Для этого используются аллергические пробы, воспроизводимые с помощью аллергенов.

Аллергены бактериального происхождения .Использование аллергических реакций в качестве диагностических проб основано на специфичности и высокой чувствительности их, а также на доступности и простоте их выполнения. На введение аллергена инфицированный, аллергизированный организм отвечает местной, очаговой или общей

реакцией. Интенсивность и характер ответной реакции определяется состоянием организма, свойствами аллергена и методами его введения. Практическое значение для диагностики заболеваний у человека получили кожные аллергические пробы, которые широко применяются пока лишь при ограниченном числе инфекций, а именно: при туберкулезе (реакции Пиркета и Манту), при бруцеллезе (реакция Бюрне), при туляремии, сапе, токсоплазмозе, орнитозе и других заболеваниях.

В качестве аллергенов используются специфические препараты, получаемые из соответствующих возбудителей. Аллергены при одних заболеваниях (туберкулез, бруцеллез, caп) представляют собой фильтраты бульонных культур, при других (туляремия, гонорея) - взвесь бактерий, убитых нагреванием при определенной температуре. В настоящее время выпускаются следующие аллергены: бруцеллин, тулярин для накожного и внутрикожного применения, альттуберкулин, сухой очищенный туберкулин, токсоплазменный и сибиреязвенный аллергены. Разработаны также методы получения аллергенов из стафилококков, стрептококков, дизентерийных бактерий, препарат для аллергической, диагностики проказы (лепрамин) и др. Срок годности аллергенов - 1 год.

Аллергены из паразитических грибов

Неинфекционные аллергены

Все аллергены неинфекционной природы используют как для определения аллергизирующего агента, так и с целью последующей десенсибилизирующей терапии. Аллергены дозированы в единицах белкового азота.

Пыльцевые

Бытовые

Эпидермальные

Пищевые

Токсины (от греческого toxikоn - яд), вещества бактериального происхождения, способные угнетать физиологические функции, что приводит к заболеванию или гибели животных и человека. По химической природе все токсины - белки или полипептиды. В отличие от других органических и неорганических ядовитых веществ, токсины при попадании в организм вызывают образование антител. При некоторых инфекционных заболеваниях (дифтерия, скарлатина) для определения напряженности иммунитета и восприимчивости детей используются внутрикожные пробы с применением соответствующих разведенных токсинов. Положительная реакция (местное воспаление кожи в области введения токсина) обусловливается ядовитым действием токсина на ткани кожи. Отрицательный результат реакции объясняется нейтрализацией введенного в кожу токсина соответствующим антитоксином, содержащимся в иммунном организме в достаточном для этого количестве. Токсины получают из токсигенных штаммов микробов (дифтерийная палочка или скарлатинозный стрептококк) методом посева на жидкую питательную среду (мартеновский бульон) с последующей фильтрацией через бактериальные фильтры. Из полученных токсинов готовят диагностические токсины Шика (дифтерийный) и Дика (скарлатинный). Токсины вводят внутрикожно, в количестве 0,2 мл (Шика) и 0,1 мл (Дика), в среднюю часть внутренней поверхности предплечья.

65. Иммунные сыворотки. Современная классификация сывороток. Получение , очистка, применение. Требования, предъявляемые к сывороточным препаратам.

Сыворотки – иммунобиологические препараты, содержащте антитела, обеспечиыающие пассивную невосприимчивость к возбудителям инфекционных болезней.

Их используют:

Для профилактики;

Для лечения.

Иммунитет, создаваемый сывороточными препаратами, проявляется сразу после введения препарата, непродолжительный и длится 2-4 недели.

Иммунные сыворотки: иммунологические препараты на основе антител.

1.Антитоксические - сыворотки против дифтерии, столбняка, ботулизма, газовой гангрены, т.е. сыворотки, содержащие в качестве антител антитоксины, которые нейтрализуют специфические токсины.

2.Антибактериальные - сыворотки, содержащие агглютинины, преципитины, комплементсвязывающие антитела к возбудителям брюшного тифа, дизентерии, чумы, коклюша.

3.Противовирусные сыворотки (коревая, гриппозная, антирабическая) содержат вируснейтрализующие, комплементсвязывающие противовирусные антитела.

Иммунные сыворотки получают путем гипериммунизации животных (лошади) специфическим антигеном (анатоксином, бактериальными или вирусными культурами и их антигенами) с последующим, в период максимального антителообразования, выделением из крови иммунной

Агглютинирующие сыворотки получают путем иммунизации кроликов взвесью убитых микроорганизмов или их антигенов с последующим взятием у них крови и приготовлением сыворотки. Агглютинирующие сыворотки применяют для идентификации микроорганизмов в реакции агглютинации. Недостатком таких сывороток является то, что они способны давать групповые реакции агглютинации, т.к. они содержат антитела к бактериям, имеющим общие антигены. Поэтому, в настоящее время большинство сывороток используется адсорбированными ,Адсорбированные сыворотки содержат только типовые или видовые антитела, соответствующие определенному типу или виду антигена. Для получения таких сывороток применяют метод Кастеллани - метод адсорбции. Этот метод заключается в истощении сыворотки на групповые агглютинины путем насыщения ее родственными гетерогенными бактериями. При этом происходит адсорбция групповых антител, а специфические антитела остаются в сыворотке. Таким путем можно получить монорецепторные сыворотки - сыворотки, содержащие антитела только к одному антигену, и поливалентные сыворотки, дающие реакции агглютинации с двумятремя родственными бактериями, имеющими общий антиген. Титром агглютинирующей сыворотки называется то ее наибольшее разведение, при котором идет реакция агглютинации.

Агглютинирующие сыворотки широко применяют, например, при диагностике заболеваний, вызываемых эшерихиями, сальмонеллами и другими представителями семейства энтеробактерий.

1.2. Преципитирующие сыворотки.

Преципитирующие сыворотки получают иммунизацией кроликов антигенами бактерий, их экстрактами и токсинами. Титром преципитирующей сыворотки называется то максимальное разведение антигена, при котором идет реакция преципитации. Преципитирующие сыворотки выпускаются с высоким титром - не менее 1:100000. Это связано с тем, что антиген, определяемый в реакции преципитации, имеет мелкодисперсную структуру и в единице объема его может содержаться больше, чем в таком же объеме сыворотки - антител.

Специфические преципитирующие сыворотки применяются при диагностике инфекционных заболеваний (сибирская язва, чума, туляремия, дифтерия, и др.), в судебно-медицинской экспертизе для определения видовой принадлежности белка, в санитарной практике для обнаружения соответствия белковых веществ в продуктах (при подозрении на фальсификацию).

взвесью эритроцитов барана. Титром сыворотки называют то ее максимальное разведение, которое в присутствии комплемента вызывает гемолиз 3% взвеси эритроцитов барана. Гемолитические сыворотки используют для титрования комплемента и при постановке реакции связывания комплемента в индикаторной системе.

1.4.Противовирусные сыворотки.

Иммунные противовирусные сыворотки получают путем иммунизации различных животных в зависимости от вида вируса. Например, сыворотку против аденовирусов получают иммунизацией кроликов, сыворотку против вируса гриппа - иммунизацией белых хорьков и т.д.

Диагностические противовирусные сыворотки используются для определения вида или типа вируса в РТГА, РСК., РН.

1.5.Люминесцирующие сыворотки.

Люминесцирующие сыворотки представляют собой иммунные сыворотки, содержащие специфические антитела, меченые флюоресцирующими красителями. При приготовлении люминесцирующих сыворотокпроводят присоединение к глобулиновой фракции иммунной

сывороткиразличных флюорохромов путем прочной химической связи. Люминесцирующие сыворотки используют при постановке РИФ.

1.6. Анпшглобулиновые сыворотки.

Антиглобулиновые сыворотки (АГС) содержат антитела к иммуноглобулинам сыворотки человека или кролика - в зависимости оттого, какая иммунная сыворотка используется в реакции. АГС получают путем иммунизации животных иммуноглобулинами человека или кролика. Такие сыворотки используют для постановки непрямой РИФ, реакции ИФА, реакции Кумбса.

68. Понятие об иммуномодуляторах. Принцип действия. Применение.

Иммуномодуляторы – природные или синтетические вещества, способные оказывать регулирующее действие на иммунную систему. По характеру влияния на иммунную систему их подразделяют на иммуностимулирующие и иммуносупрессивные.

К экзогенным иммуномодуляторам относится большая группа веществ различной химической природы и происхождения, оказывающих неспецифическое активирующее или супрессивное действие на иммунную систему, но являющихся чужеродными для организма. Антибиотики, левамизол, полисахариды, ЛПС, адъюванты.

Эндогенные иммуномодуляторы представляют собой достаточно большую группу олигопептидов, синтезируемых самим организмом, его иммунокомпетентными клетками, и способных активировать иммунную систему путем усиления функции иммунокомпетентных клеток. К ним относятся регуляторные пептиды: интерлейкины, интерфероны, гормоны тимуса.

Иммуностимуляторы