Методы исследования в медицинской бактериологии

В таблице 2 представлена взаимосвязь групп риска и уровней биобезопасности, практики и оборудования, представленная в “Практическом руководстве по биологической безопасности в лабораторных условиях” (третье издание, Женева, 2004 г.).

Таблица 2 - Взаимосвязь групп риска и уровней биобезопасности, практики и оборудования

В сводной таблице 3 представлены требования к оборудованию для каждого уровня биологической безопасности (заимствовано из Руководства ВОЗ).

Таблица 3 – Сводная таблица требований к биологической безопасности

13

Наиболее распространенными причинами возможного заражения в микробиологической лаборатории являются прямой контакт и манипуляции с культурами микроорганизмов, контакт с инфицированными животными, работа с применением контаминированного оборудования. Поэтому основным принципом биологической безопасности является ограничение распространения или предотвращение утечки инфицированного материала из лабораторной среды, в которой проводятся манипуляции с биологическими агентами. В связи с этим выделяют первичное и вторичное ограничение распространения биологического поражающего агента. Первичное ограничение распространения (защита персонала лаборатории и непосредственно среды лаборатории от воздействия инфекционных агентов) обеспечивается использованием специфических микробиологических приемов и методов работы, специальной защитной одежды и средств защиты и специального оборудования. Вторичное ограничение распространения (защита окружающей среды от воздействия инфицированного материала) обеспечивается инженерно-технологической конструкцией и технологическим оборудованием лабораторий.

14

2. Микробиологическая лаборатория

2.1. Устройство и оборудование микробиологической лаборатории

Деятельность бактериологических лабораторий в Российской Федерации регламентируется следующими основными документами:

-СанПиН 2.1.3.2630-10 “Санитарно-эпидемиологические требования к организациям, осуществляющим медицинскую деятельность”;

-СНиП-СП 1.3.2322-08 “Безопасность работы с микроорганизмами III-IV групп патогенности (опасности) и возбудителями паразитарных болезней”;

-ГОСТ Р ИСО 15189-2015 “Лаборатории медицинские. Частные требования

ккачеству и компетентности”;

-Приказ от 22 апреля 1985 г. №535 “Об унификации микробиологических (бактериологических) методов исследования, применяемых в клиникодиагностических лабораториях лечебно-профилактических учреждений”;

-СанПиН 2.1.7.2790-10 “Санитарно-эпидемиологические требования к обращению с медицинскими отходами”.

Работа с возбудителями инфекционных заболеваний проводится в специализированных лабораториях. Такие лаборатории по своей структуре и оборудованию должны обеспечивать биологическую безопасность проводимых диагностических и экспериментальных исследований. Диагностические исследования проводятся для обнаружения и идентификации возбудителей, их антигенов или антител к ним, а экспериментальные исследования

осуществляются с живыми культурами возбудителей инфекционных заболеваний. Основные исследования, проводимые в микробиологических клинических лабораториях:

-диагностика инфекционных заболеваний;

-определение микробиологических показателей, характеризующих объекты окружающей среды;

-контроль напряженности специфического постинфекционного или поствакцинального иммунитета.

Структура микробиологической лаборатории зависит от задач и особенностей её деятельности. Микробиологические лаборатории, независимо от специализации, должны размещаться в чистых светлых помещениях с необходимым оборудованием и мебелью. Их следует изолировать от других исследовательских лабораторий. Микробиологические лаборатории целесообразно размещать в отдельном здании или в отдельной секции здания с изолированным входом. Эти помещения должны быть обеспечены электроэнергией, горячим и холодным водоснабжением, газом, снабжены эффективной вентиляцией и канализацией. Стены помещений облицовывают кафелем или окрашивают масляной краской светлых тонов. Полы покрывают керамической плиткой, а в некоторых помещениях (комната для переодевания, препараторская) в качестве покрытия полов используют линолеум. В лабораторных помещениях должна быть достаточная освещенность, обеспечивающая удобство в работе.

15

Микробиологическая лаборатория должна иметь достаточное количество комнат, отдельный вход для сотрудников и для посетителей с тамбуром, обязателен гардероб и душевая. В составе лаборатории должны быть помещения для приема материала (приемная), автоклавные, моечная, помещения для хранения химреактивов, виварий и другие помещения. Часто в современных лабораториях виварий отсутствует, так как многие исследования на лабораторных животных заменяются методами, проводимыми in vitro.

При проведении исследований в лабораториях необходимо поддерживать чистоту. Кроме ежедневной влажной уборки помещения периодически обрабатывают растворами дезинфицирующих веществ (карболовой кислоты, хлорной извести, хлорамина и т. п.) и подвергают ультрафиолетовому облучению – текущая дезинфекция. При необходимости проводят заключительную дезинфекцию.

Типовое расположение оборудования в лаборатории для микробиологических исследований микроорганизмов 3-4 групп патогенности представлено на рисунке 1.

Рисунок 1 - Расположение оборудования в лаборатории для исследований микроорганизмов 3-4 групп патогенности. Заимствовано из Интернет-ресурсов.

Регистрация поступающего на исследование патологического материала проводят в приемной. Пол в ней должен быть бетонный (выложен кафельной плиткой), стены покрыты масляной краской или керамической плиткой. При входе в

17

В боксах над рабочим столом на расстоянии 50-70 см от поверхности устанавливают бактерицидные лампы. Для этих целей можно использовать передвижную кварцевую лампу. Для обеззараживания воздуха широко используются бактерицидные облучатели настенные или потолочные. Открытые ультрафиолетовые лампы включаются только при отсутствии в помещениях людей. Экранированные бактерицидные облучатели могут использоваться в присутствии персонала. В последние годы широкое применение находят системы стерилизации воздуха непрерывного действия (например, ультрафиолетовая система стерилизации воздуха “Germredue”). В таких системах воздух с помощью насосов пропускается через камеру, в которой подвергается УФ-облучению. В боксе, кроме рабочих столов и стульев, должны быть все необходимые для работы принадлежности: стерилизаторы для инструментов, емкости с дезинфицирующими растворами для отработанных пипеток и другой стеклянной посуды, бак с дезраствором для сбора отработанных материалов, баночки со спиртом, йодом, штативы для пробирок, пробирки с питательными средами, стерильные пипетки, ступки и т. д.

У входа в бокс помещают коврик, пропитанный дезраствором. По мере высыхания дезраствора коврик смачивают. В предбокснике должны находиться сменная обувь (тапочки), стерильные халаты, шапочки, маски, которые одевают перед работой с культурами в боксе. В предбокснике можно размещать дополнительное оборудование: термостаты, холодильники, лабораторные центрифуги, микроскопы и другое оборудование.

Боксы и предбоксники, кроме ежедневной влажной дезинфекционной обработки, облучают бактерицидными лампами в течение 30-40 минут перед началом работы и после работы.

Альтернативой боксированного помещения являются вытяжные шкафы и ламинарные боксы (рисунок 4).

а б Рисунок 4 – Вытяжной шкаф (а) и ламинарный бокс (б). Заимствовано из Интернет-

ресурсов.

Проведение работ с непатогенными культурами, антигенными препаратами, диагностикумами и химическими реактивами проводят в обычных лабораториях. Потолок и стены лабораторных комнат покрывают масляной краской (кафельной плиткой), пол – линолеумом или кафельной плиткой. Лабораторию оборудуют

18

термостатами, холодильниками, центрифугами, весами различных типов, электроплитками, водяными банями, электромагнитными мешалками и другими приборами, необходимыми для проведения исследований. Лабораторию снабжают в достаточном количестве биксами, фильтрами Зейтца, ящиками для хранения сред, эмалированной и стеклянной посудой – матрацами, флаконами, колбами разных объемов, градуированными пипетками, микропипетками, цилиндрами, стаканами, пробирками серологическими, бактериологическими и центрифужными, ампулами и резиновыми пробками разных размеров, металлическими или пластмассовыми штативами для пробирок, карандашами по стеклу, фильтровальной бумагой. В лабораториях для определенных операций закрепляют рабочее место. На столах размещают необходимую аппаратуру, соответствующие дезинфицирующие средства, краски, реактивы.

В автоклавной необходимо иметь два автоклава: для чистых материалов (для стерилизации посуды, питательных сред, инструментов) и для инфицированных материалов (для обезвреживания заразного материала). Допускается наличие в автоклавной сухожаровых шкафов, сушильных шкафов, дистилляторов, столов и шкафов для стерильной посуды (рисунок 5).

Рисунок 5 – Автоклавная. Заимствовано из Интернет-ресурсов.

Моечная предназначена для мытья посуды и принадлежностей. В ней располагают машины для мытья посуды и стирки белья, сушильные шкафы, необходимую мебель. Посуду, пипетки и инструменты, загрязненные инфицированным материалом, моют только после автоклавирования или использования другого способа дезинфекции. Оснащение моечной представлено на рисунке 6.

19

Рисунок 6 – Моечная. Заимствовано из Интернет-ресурсов.

Виварием называется помещение, используемое для содержания лабораторных животных и работы с ними. В виварии должно быть карантинное отделение, комнаты для экспериментальных и здоровых животных, помещение для мытья и дезинфекции клеток, инвентаря и спецодежды, кухня для приготовления кормов для животных, кладовая, фуражная и другие помещения. Все помещения вивария должны быть изолированы друг от друга и иметь самостоятельные входы с дезинфицирующими ковриками. Кроме того, они должны быть недоступны для грызунов и насекомых. Виварий должен быть теплым, светлым и сухим (рисунок 7).

Рисунок 7 – Помещение для содержания лабораторных животных. Заимствовано из Интернет-ресурсов.

Лабораторных животных в виварии содержат в клетках или коробках с сетчатыми крышками (рисунок 8).