
chebanov_m_s_galich_e_v_rukovodstvo_po_iskusstv
.pdf
110
Рисунок78:АппаратыМак-Дональда:А–инкубационнаялиния,Б–отдельные аппараты, смонтированные на бассейны для вылупления предличинок.
А |
Б |
Рисунок 79: Схема инкубационных аппаратов: А - Вейса, Б - Мак-Дональда.
5.2.1.4 Подготовка инкубационных аппаратов
Перед закладкой икры проверяют систему подачи и сброса воды в аппаратах, их комплектность и состояние инкубационных секций. Водоподающую систему промывают, аппараты после промывки дезинфицируют и вновь промывают чистой водой.

111
5.2.2 Нормы закладки икры на инкубацию
Учет количества инкубируемой икры осуществляют при закладке в аппараты объёмным или весовым методом. Норма загрузки икры в инкубационные аппараты представлены в Таблице 22.
Таблица 22: Норма загрузки икры в инкубационные аппараты.
|
|
Норма загрузки, тыс. шт. |
|
|
|||
Вид |
Ющенко |
Осетр |
Мак-Дональда |
Вейса |
|||
(для 1 |
(для 1 инкуб. |
|
|
|
|||
|
5 л |
6,5 л |
13 л |
(8л) |
|||
|
секции) |
ящика) |
|||||
|
|
|
|
|
|||
Русский |
220–250 |
130–150 |
15 |
20 |
40 |
25 |
|
осётр |
|||||||
|
|
|
|
|
|
||
Севрюга |
240–260 |
200–220 |
20 |
25 |
50 |
30 |
|
Белуга |
150–165 |
100–110 |
13 |
17 |
35 |
20 |
|
Шип |
220–250 |
130–150 |
15 |
20 |
40 |
25 |
|
Стерлядь |
200–250 |
200–250 |
23 |
30 |
60 |
35 |
Следует отметить, что приведенные нормы загрузки инкубационных аппаратов Ющенко и «Осетр» были разработаны и использовались на рыбоводных заводахАзовского и Каспийского бассейнов (Сборник инструкций…, 1986) в период максимальных объемов заготовки диких производителей и необходимости единовременной инкубации десятков миллионов икры. В современных условиях нормы загрузки аппарата «Осетр» целесообразно снизить на 20–30%.
5.2.3 Расход воды в инкубационных аппаратах
Расход воды в аппаратах устанавливают в зависимости от их типа. Интенсивность потребления кислорода в процессе эмбрионального развития существенно возрастает: осетра - в 20–25 раз, севрюги – в 15–27, шипа – в 39–50 раз (в расчёте на один г - живой массы и на одну икринку) (Коржуев, Никольская и Родзиевская, 1960). Содержание растворенного в воде кислорода не должно снижаться менее 7,5 мг/л. Концентрация ниже 6,0 мг/л (80% насыщения) приводит к различным отклонениям в развитии (гипертрофия сердца, водянка перикарда и др.), концентрация кислорода 3,0– 3,5 мг/л приводит к полной гибели эмбрионов. Для создания благоприятного кислородного режима (6,6–9,0 мг/л) необходимо обеспечить расход воды: в аппарате Мак-Дональда (13 л) - от 4–5 л/мин (30–40% объёма в минуту) до 10 л/мин на завершающих стадиях (Conte et al.,1988), в аппарате Вейса – 1–8 л/ мин.

112
Нормы расхода воды в аппарате Ющенко в зависимости от стадии эмбрионального развития представлены в таблице 23, а в аппарате «Осётр» в таблице 24.
Таблица 23: Удельный расход воды в аппарате Ющенко (Мильштейн, 1982).
|
|
Расход воды, |
||
Стадии развития |
Период движения |
л/мин. на 100 тыс. икринок |
||
|
лопасти, сек. |
|
|
|
|
белуга и русский |
севрюга |
||
|
|
осетр |
|
|
От морулы до конца |
40–45 |
2,4 |
1,2 |
|
гаструляции |
||||
|
|
|
||
От конца гаструляции |
|
|
|
|
до стадии подвижного |
30–35 |
3,4 |
1,7 |
|
эмбриона |
|
|
|
|
Вращающийся эмбрион, |
20–25 |
5,5 |
3,3 |
|
вылупление предличинок |
||||
|
|
|
||
|
|
|
|
Таблица 24: Удельный расход воды в аппаратах «Осётр» (Сборник инструкций…, 1986).
Стадия развития |
Расход воды на 100 000 икры, |
|
в аппарате, л/мин |
||
|
||
Дробление |
2,0–2,3 |
|
Гаструляция |
2,3–3,0 |
|
Начало пульсации сердца |
3,0–4,5 |
|
Стадия подвижного эмбриона |
4,5–5,0 |
|
Вылупление предличинок |
5,8–6,2 |
5.2.4 Освещенность
Уровень освещенности инкубационных аппаратов должен соответствовать видовым требованиям (белуга – менее 100 лк, севрюга – 20–100 лк, русский осетр и шип – 10–20 лк (Касимов, 1987). При большей освещенности увеличивается число аномалий развития и снижается выживаемость эмбрионов.
5.2.5 Контроль инкубации икры осетровых рыб
В ходе инкубации ведут круглосуточное наблюдение за бесперебойным водоснабжением, газовым, гидрохимическим и температурным режимом (суточные колебания не должны превышать 2оС), своевременно удаляя неразвивающиеся икринки.

113
Для предотвращения поражения икры сапролегниозом используют ультрафиолетовую бактерицидную стерилизацию и терморегуляцию, а также профилактическую обработку соответствующими препаратами (Глава 12). Приэтомболееэффективнымявляетсяметоднепрерывнойобработкималыми концентрациями фиолетового «К» (C24H28N3Cl) (Мамедов, 2000).
5.2.5.1 Подсчёт процента оплодотворения
Для оценки рыбоводного качества инкубируемой икры подсчитывают соотношение развивающихся и мертвых икринок. Икра хорошего качества имеет чистые прозрачные оболочки, позволяющие отчетливо наблюдать за ходомэмбриогенеза.Мёртваяикразаметноувеличиваетсявразмере,вотличие от нормально развивающихся эмбрионов и имеет характерную “мраморную” или белую мутную окраску.
Первоначальный процент оплодотворения икры подсчитывается на стадии второго-третьего деления дробления (4–8 бластомеров) (Рисунок 80). Время отбора проб для определения процента оплодотворения яиц в зависимости от температуры воды Соответствующий график представлен на Рисунке 81.
Рисунок 80: Эмбрион на стадиях второго и третьего деления дробления (Детлаф, Гинзбург и Шмальгаузен, 1981).

114
Рисунок 81: Время взятия проб для определения процента оплодотворения яиц: A - русский осетр; Б – севрюга; В – белуга; Г – стерлядь, в зависимости от температуры инкубации (Детлаф, Гинзбург и Шмальгаузен, 1981).
Примечание: кривые показывают время от осеменения до появления борозд второго (I) и третьего (III) делений дробления, II лучшее время для взятия пробы.
Для подсчёта процента оплодотворения икру в аппарате перемешивают, берут пробу 100–200 икринок, просматривают невооруженным взглядом или с помощью бинокуляра, отделяют мертвые, неоплодотворенные активированные, полиспермные икринки, а затем подсчитывают долю нормально развивающихся эмбрионов в общем количестве икринок в пробе.
5.2.5.2 Наблюдение за дальнейшим развитием икры
В ходе инкубации ведётся наблюдение за синхронностью и соответствием норме эмбрионального развития осетровых. Указанный контроль более удобно проводить на стадии «большой и малой желточной пробки» (стадии
16–17) (Рисунок 82).

115
Рисунок 82: Нормальное развитие зародыша на стадиях 16–17 (Детлаф, Гинзбург и Шмальгаузен, 1981).
Следует отметить, что только после завершения этой стадии обычно может приниматься окончательное решение о возможной транспортировке данной партии икры. Действительно, к началу стадии (для русского осетра - 31,4 часа после осеменения при температуре воды 18оС) (Таблица 25), к концу гаструляции погибают все неоплодотворившиеся яйца русского осетра, а нормально развивающиеся зародыши не имеют желточных пробок, или эти пробки очень маленькие.

116
Таблица 25: Хронология зародышевого развития русского осетра Acipenser gueldenstaedtii colchicus (Детлаф, Гинзбург и Шмальгаузен, 1981).
|
Время от |
|
|
|
Стадия |
осеменения |
|
||
|
|
|
|
|
часы и |
|
0 |
Отличительные признаки стадии |
|
|
число τ1 |
|||
минуты при |
|
|
||
температуре |
|
|
||
18 оC |
|
|
||
1 |
0 |
|
0 |
Яйцо в момент оплодотворения |
2 |
~ 0,50 |
|
~ 1 |
Светлое полярное пятно исчезло; |
|
образовалось перивителлиновое пространство |
|||
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
3 |
~ 1,40 |
|
~ 2 |
Пигментное скопление в анимальной области располагается |
|
эксцентрически; образовался светлый серп |
|||
4 |
2,55 |
|
3,5 |
Анимальная область разделена первой бороздой |
|
|
|
|
|
5 |
3,45 |
|
4,5 |
Анимальная область разделена на 4 бластомера |
|
|
|
|
|
6 |
4,35 |
|
5,5 |
Анимальная область разделена на 8 бластомеров |
|
|
|
|
|
7 |
5,25 |
|
6,5 |
В анимальной области легли борозды IVделения |
|
|
|
|
|
8 |
6,15 |
|
7,5 |
В анимальной области легли борозды Vделения |
|
|
|
|
|
9 |
7,3 |
|
9 |
VII деление; борозды полностью разделяют вегетативную |
|
область |
|||
|
|
|
|
|
10 |
8,2 |
|
10 |
Начинается образование полости дробления; ядерные |
|
деления в анимальной области еще синхронные |
|||
|
|
|
|
Ранняя бластула; бластомеры в анимальной области хорошо |
11 |
10 |
|
12 |
различимы при небольшом увеличении; десинхронизация |
|
|
|
|
ядерных делений в анимальной области |
12 |
12,3 |
|
15 |
Поздняя бластула; в анимальной области отдельные клетки |
|
при небольшом увеличении неразличимы |
|||
12+ |
14,1 |
|
17 |
Перестройка клеточного цикла в бластомерах анимальной |
|
области; падение митотического индекса |
|||
|
|
|
|
Начало гаструляции; выше экватора в области будущей |
13 |
16,5 |
|
19,5 |
спинной губы бластопора образовалась сильно |
|
|
|
|
пигментированная полоска |
14 |
17,05 |
|
20,5 |
Ранняя гаструла; спинная губа бластопора в виде щели на |
|
небольшом протяжении |
|||
15 |
22,55 |
|
27,5 |
Средняя гаструла; анимальный материал покрывает 2/3 |
|
поверхности зародыша; бластопор замкнулся в кольцо |
|||
16 |
25,00 |
|
30,0 |
Желточная пробка значительного размера |
|
|
|
|
|
17 |
27,50 |
|
32,5 |
Маленькая желточная пробка |
|
|
|
|
|
18 |
31,40 |
|
38,0 |
Гаструляция закончена, бластопор щелевидный |
|
|
|
|
|
19 |
32,30 |
|
39,0 |
Ранняя нейрула; начинают обозначаться нервные валики |
|
вокруг головного отдела нервной пластинки |
|||
20 |
33,45 |
|
40,5 |
Широкая нервная пластинка; нервные валики вокруг |
|
головного отдела нервной пластинки четко обозначены |
|||
21 |
34,45 |
|
41,7 |
Начало сближения нервных валиков; впервые обозначаются |
|
зачатки выделительной системы |

117
22 |
36,4 |
44 |
Поздняя нейрула; нервные валики в туловищном отделе |
|
сближены, зачатки выделительной системы удлинились |
||||
|
|
|
|
|
23 |
37,30 |
45 |
Нервная трубка замкнулась; шов в области слияния нервных |
|
валиков хорошо различим |
||||
|
|
|
В переднем мозговом пузыре образовались глазные выросты; |
|
24 |
- |
- |
в передней части закладок выделительной системы возникло |
|
|
|
|
утолщение |
|
|
|
|
Боковые пластинки достигли переднего конца головы, |
|
25 |
- |
- |
их суженные концы сближаются впереди зачатка железы |
|
вылупления; образовалось утолщение в области общего |
||||
|
|
|
||
|
|
|
зачатка заднетуловищного отдела и хвоста |
|
|
|
|
|
|
|
|
|
Боковые пластинки сливаются и в месте их слияния |
|
26 |
50,00 |
60,0 |
образуется зачаток сердца; начинается обособление зачатка |
|
|
|
|
заднетуловищного и хвостового отделов |
|
27 |
53,20 |
64,0 |
Сформировался зачаток сердца, имеющий вид короткой |
|
трубочки |
||||
|
|
|
Зачаток сердца имеет строение прямой удлиненной |
|
28 |
57,30 |
69,0 |
трубочки; туловищные мышцы еще не отвечают на |
|
|
|
|
раздражение сокращением |
|
|
|
|
Сердечная трубка приобрела S-образный изгиб, начинает |
|
29 |
60,00 |
72,0 |
пульсировать; туловищные мышцы на укол отвечают |
|
|
|
|
подергиванием |
|
|
|
|
У зародыша в оболочках конец хвоста приближается |
|
30 |
62,05 |
74,5 |
к голове; заднетуловищный отдел и хвост начали |
|
|
|
|
распрямляться |
|
31 |
- |
- |
У зародыша в оболочках конец хвоста приближается к |
|
сердцу; зародыш может двигать головой и хвостом |
||||
|
|
|
||
32 |
78,00 |
93,5 |
У зародыша в оболочках конец хвоста касается головы |
|
|
|
|
|
|
33 |
- |
- |
После удаления оболочек заднетуловищный |
|
|
|
|
|
|
34 |
- |
- |
Зародыш, вынутый из оболочек, способен к медленному |
|
поступательному движению |
||||
|
|
|
||
|
|
125– |
Вылупление единичных предличинок; после удаления |
|
35 |
104–106,40 |
оболочек зародыш способен к быстрому поступательному |
||
|
|
128 |
движению |
|
|
|
|
Массовое вылупление; предличинка еще не имеет жаберных |
|
36 |
- |
- |
щелей и ротового отверстия; в глазу четкое пигментное |
|
|
|
|
пятно; кровь розовая |
1 - τ0 - продолжительность одного митотического цикла в период синхронных делений дробления.
Последующий контроль осуществляется на стадиях формирования зачатковсердца(стадии26–28)когдапоколичествунормальноразвивающихся эмбрионов можно получить четкое представление об ожидаемом выходе предличинок (Рисунок 83).

118
Рисунок 83: Нормально развивающиеся зародыши на стадиях 26–28 (Детлаф, Гинзбург и Шмальгаузен, 1981): h – вид со стороны головного отдела, d – вид со спинной стороны.
Оптимальное время отбора проб для контроля за ходом эмбриогенеза зависит от температурного режима инкубации икры (Рисунок 84).

119
Рисунок 84: Продолжительность зародышевого развития A. gueldenstaedtii
(AG), A. stellatus (AS), H. huso (HH), A. ruthenus (AR), и время взятия проб для определения типичности развития в зависимости от температуры инкубации, (Детлаф, Гинзбург и Шмальгаузен, 1981).
Примечание: I – время от осеменения до конца гаструляции (стадия 18); II – стадии слияния боковых пластинок перед образованием зачатка сердца (стадия 26); III – стадии вылупления единичных предличинок (стадия 35). Ось ординат, время после осеменения, часы; ось абсцисс значения температурыоС.
5.2.5.3 Нарушения эмбрионального развития
Типичные нарушения нормального развития эмбрионов на разных стадиях детально описаны Детлаф, Гинзбург и Шмальгаузен (1981). Наиболее часто встречающиеся из них представлены на рисунках 85, 86, 87.