chebanov_m_s_galich_e_v_rukovodstvo_po_iskusstv

40

Емкости для перевозки производителей должны быть тщательно промыты, и продезинфицированы. Во избежание травмирования рыб, на их внутренней поверхности должны быть устранены все дефекты. Выгрузка производителей осетровых рыб осуществляется с помощью подъемного устройства (кран, лебедка) в брезентовых емкостях с водой.

3.3 МЕЧЕНИЕ ДИКИХ ПРОИЗВОДИТЕЛЕЙ

Производители разных сроков нерестового хода характеризуются различным трофоплазматическим запасом, стадией функциональной зрелости и готовностью к гонадотропным инъекциям. В связи с этим, необходимо проводить мечение рыб внутренними (желательно ПИТ-метками) или внешними метками (в качестве дополнительных меток, если используются внутренние метки). Соответствующая информации должна включать: место (река/море) и сроки заготовки, с выделением групп: раннего хода, середины (массовый ход) и конца анадромной миграции. Отсутствие данных по срокам заготовки может привести к неправильному выбору режима преднерестового выдерживания и, как следствие, к снижению числа созревших самок, высокой смертности полученных личинок и молоди. Данные мечения по местам и срокам заготовки должны быть зафиксированы.

3.4 ОСНОВНЫЕ РЫБОВОДНЫЕ ПОКАЗАТЕЛИ ДИКИХ ПРОИЗВОДИТЕЛЕЙ

Производители, заготовленные в естественных водоемах существенно отличаются от «домашних» рыб по ряду основных рыбоводных показателей (Таблица 5).

Таблица 5: Основные рыбоводные показатели диких производителей (при прижизненном получении икры).

41

Глава 4

Работа с производителями

4.1. ВВЕДЕНИЕ

Подготовку производителей осетровых рыб к использованию можно

разделить на несколько этапов:

1.осенняя бонитировка или отбор производителей осеннего хода;

2.зимовка производителей;

3.весенняя бонитировка или отбор производителей весеннего хода;

4.предварительное тестирование производителей;

5.обеспечение соответствующих температурных режимов и сроков преднерестового выдерживания;

6.тестирование производителей перед инъекцией гормональных препаратов.

При межсезонном получении зрелых половых продуктов от производителей осетровых схема работы будет выглядеть иначе. При работе с производителями необходимо руководствоваться как визуально оцениваемымиморфологическимипризнаками,такиспециальнымиметодами оценки функционального состояния репродуктивной системы самцов и самок. Методы отбора «диких» производителей в местах заготовки подробно изложены в соответствующих инструкциях с учетом особенностей отдельных бассейновирайонов(Сборникинструкций…,1996)инетсмыслаихописывать подробно в данном руководстве. Более важны и актуальны в настоящее время принципы работы с производителями из выращенных маточных стад, которые в ближайшие годы должны стать основным источником получения оплодотвореннойикрыдляпонто-каспийскихосетровыхрыбоводныхзаводов.

Основной задачей осенней бонитировки производителей является отбор рыб, способных дать зрелые половые продукты в предстоящем рыбоводном сезоне. Так как успешное завершение гаметогенеза зависит от многих факторов (условия зимовки, температурные условия в весеннее время, нагул и т.д.), некоторые из рыб, отобранных при осенней бонитировке, могут быть отбракованы весной.

Для выбора правильного режима преднерестового содержания и получения гамет, в ходе весенней бонитировки производится отбор рыб, готовых к нересту. При проведении оценки, неподходящая для выращивания (воспроизводства) рыба отбраковывается.

43

Дляотборазрелыхпроизводителейприосеннейбонитировкеоптимально использовать метод определения стадий зрелости гонад при помощи неинвазивногоэкспресс-методаУЗИ(Чебанов,ГаличиЧмырь,2004;Chebanov and Galich, 2009; Чебанов и Галич, 2010). При отсутствии УЗИ-сканера отбор проводят путем биопсийного, оперативного или эндоскопического изучения гонад, что требует значительно большего времени и травмирует рыбу. Для проведения бонитировки необходимо хорошо знать стадии развития гонад осетровых.

4.2.2 Стадии зрелости гонад осетровых рыб

В настоящее время разработано несколько классификаций стадий зрелости гонад осетровых рыб, отличающихся различной степенью детализации, и даже, числом выделяемых стадий (Трусов, 1964; Шилов, 1971; Кукурадзе,

Кирилюк и Сальников, 1975; Conte et al., 1988;Williot, Brun and Rooryck, 1991; Vaini,PazzagliaandRuzza,2001).Наиболеедетальнойявляетсяклассификация Трусова (1964), в которой выделены не только отдельные стадии, но и подстадии гонадогенеза (Глава 14). Данная классификация принята за основу при использовании ультразвуковой диагностики пола и стадий зрелости осетровых рыб. Ниже приведена более генерализованная шкала стадий зрелости осетровых (Conte et al., 1988), которая наиболее часто используется в англоязычной литературе (Таблица 6).

44

Таблица 6: Классификация стадий гаметогенеза белого осетра (Conte et al., 1988).

Кроме того, в последние годы в ходе проведения специализированных семинаров по определению пола и стадий зрелости гонад производителей осетровых рыб в рамках Международных симпозиумов (Ошкош, США, 2001 и Рамсар, Иран, 2005) использовалась классификация, предложенная Бруком, Диком и Чоудхёри (Bruch, Dick and Choudhury, 2001), отличающаяся по числу выделяемых стадий зрелости (Таблица 6). В Таблице 7 приводятся результаты сравнения классификаций Брука, Дика и Чоудхёри (2001) и Трусова.

45

Таблица 7: Сравнительная таблица стадий зрелости (1–6) самок (F) и самцов (M) осетровых.

Примечание: F – стадия зрелости самок; M – стадия зрелости самцов.

4.2.3 Методы предварительного отбора производителей осетровых рыб

Хорошо известно, что для осетровых рыб характерно отсутствие четко выраженного полового диморфизма (Детлаф, Гинзбург и Шмальгаузен, 1981; Doroshov, Moberg and Van Eenennaam, 1997). В настоящее время существуетнесколькоразличныхметодовопределенияполаистадийзрелости гонад незрелых осетровых, не считая метода УЗИ, включая:

•биопсийные методы;

•эндоскопия;

•эндокринологический метод (анализ содержания половых стероидов);

•метод низкочастотного инфракрасного сканирования;

•морфометрические методы.

4.2.3.1Биопсия

Биопсия гонад осуществляется путем введения через брюшную стенку или через боковые мышцы специального стального щупа (диаметр для русского осетра – 4,5–5,0 мм, белуги – 5,5–6,0 мм, севрюги, шипа и стерляди 3–4 мм; длина канавки – 3–6 см). Во избежание повреждения внутренних органов и облегчения отбора участка генеративной ткани, целесообразно

47

Предварительно продезинфицированный щуп вводят между рядами боковых и брюшных жучек в задней трети брюшка рыбы под острым углом к оси тела на глубину 5–7 см. При повороте щупа по оси, в канавке остаётся ткань гонады (Рисунок 32).

Рисунок32:А-биопсиясеврюгесиспользованиемщупа,Б-щупсфрагментом яичника четвертой стадии зрелости.

В США отбор образцов икринок осуществляется при помощи катетера (жесткого, тефлонового, диаметром 4,5 мм) через небольшой (6–8 мм)

абдоминальный разрез (Conte et al.,1988; Parauka, 1993; Webb et al., 2009) (Рисунок 33).

48

Рисунок 33: Отбор образца икры с помощью катетера через небольшой абдоминальный разрез: (А – Parauka, 1993; Б – Webb et al., 2009).

В гонадах рыб в период нагула доля жировой ткани значительно больше, чем генеративной, в связи с чем, попасть щупом в генеративную часть гонад не всегда удается. Поэтому этот способ применим при тестировании только зрелых самцов и самок, начиная со II-III и III стадий зрелости гонад.

Прибиопсиипроизводителейосетровыхрыб,вкачествепредварительного критерия отбора зрелых самок, рекомендуется использовать диаметр фолликулов (Williot and Brun, 1998; Williot, 2002). Например, самки имеющие ооцитысдиаметромнеменее2,6мм(севрюга);2,8мм(сибирскийосетришип); 3,2 мм (русский осетр) имеют шанс созреть через несколько месяцев. Стадия зрелости окончательно уточняется в ходе весенней бонитировки. Можно использовать в качестве критерия для отбора зрелых самок, минимальную массу ооцитов в пробе (русский осетр – 16 мг, белуга – 22 мг, севрюга –

11мг,шип–13мг,стерлядь–8мг)(Трусов,1972).Врыбоводнойпрактике для того, чтобы отличить жир от ткани семенника, биоптат помещают в 4% формалин. Жир всплывает, в то время, как ткань семенника тонет в формалине (Chapman по Parauka, 1993), что позволяет провести визуальное изучение отобранной биопсийной пробы.(Conte et al., 1988; Parauka, 1993; Van Eenennaam and Doroshov, 1998). Метод биопсии продолжителен по времени и оказывает на рыб сильное стрессирующее воздействие. Использование анестетиков при проведении биопсии может привести к гибели рыб (до 5%), вследствие возможного их инфицирования.

4.2.3.2 Прямая пальпация и лапароскопия

Исследование гонад может быть проведено с помощью пальпации. Определение пола предполагает аккуратное введение пальца в тело рыбы через операционное отверстие (Рисунок 34) для изучения структуры гонад на ощупь (Bruch, Dick and Choudhury, 2001).