chebanov_m_s_galich_e_v_rukovodstvo_po_iskusstv

181

Таблица 46: Хронологическая схема проведения теста «открытое поле».

Адаптация рыбы к новым условиям занимает около 3 мин, в течение которых определяют ориентировочную двигательную активность (ОА, ед/ мин) путем подсчета среднего количества пересеченных рыбой линий. После того как двигательная активность рыб становится относительно постоянной, рассчитывают усредненное количество пересечений линий дна и принимают это значение за фоновую активность (ФА, ед/мин). После воздействия раздражающим элементом определяют реактивность (РА, ед/ мин) – среднее количество пересечений за следующие 30 сек. При этом у молоди может наблюдаться как положительная, так и отрицательная реакция на внешние раздражители. На основе полученных абсолютных характеристик рассчитываются относительные показатели (ОА и РА), позволяющие оценить степень двигательной активности молоди осетровых под действием сильных сенсорных стимулов:

ПА% = ОА/ФА×100%

ПР% = РА/ФА×100%,

гдеПА%–показательактивации;ОА(ед/мин)–ориентировочнаядвигательная активность; ФА (ед/мин) – фоновая двигательная активность; ПР – показатель реактивности; РА(ед/мин) – реактивность.

В качестве примера в Таблице 47 приведены данные сравнительного анализапоказателейдвигательнойактивностивтесте«открытоеполе»молоди севрюги, полученнойот одомашненной формы и диких производителей, заготовленных в Азовском море (Чeбанов, Галич и Меркулов, 2008).

Таблица47:Показателидвигательнойактивностимолодисеврюгиразличных групп.

182

Прмечание: ОА – Ориентировочная двигательная активность; ФА

– Фоновая двигательная активность; ПА – Показатель активации; Пр1 – Показатель реактивности в первые 30 сек после воздействия низкочастотным звуком; Пр2 – Показатель реактивности в первые 30 сек после воздействия высокочастотным звуком; Пр3 – Показатель реактивности в первые 30 сек после воздействия постоянным светом; Пр4 – Показатель реактивности в первые 30 сек после воздействия кратковременными вспышками света.

Оценку пригодности заводской молоди осетровых к выживанию в естественных водоёмах путём использования теста «открытое поле» и определение плавательной способности посредством её сортировки в гидродинамических лотках с регулируемой скоростью течения в условиях осетровых заводов более эффективно осуществлять в специализированной установке «Ихтиотест» (Никаноров и Витвицкая, 1993; Тихомиров и Хабумугиша, 1997).

9.8 НейрО-фАРМАКОЛОГИЧЕСКОЕ тестирОВАНИЕ

Нейрофармакологическое тестирование молоди, основанное на оценке

преимуществом метода является техническая простота применения, позволяющая осуществить нейрофармакологическую оценку в производственных масштабах при выпуске молоди в естественные водоёмы или отборе рыб в ремонтную часть стада. Более устойчивая к нейротропным препаратаммолодьотличаетсяповышеннойжизнестойкостьюиустойчивостью к экстремальным значениям температуры и солености, дефициту кислорода, сенсорным воздействиям и обладает более рациональным уровнем обмена веществ. Методика основана на определении продолжительности действия раствора анестетика, вызывающего устойчивую наркотизацию рыб, выражающуйюся в утрате равновесия и прекращении движений хвостового стебля.

Анализ внешней картины влияния наркоза на поведение молоди позволяет выделить три основные стадии:

•повышение двигательной активности с последующим нарушением координации движения;

•подавление фоновой активности рыб, потеря рефлекса равновесия;

•выключение внешнего дыхания и обездвиживание рыб.

Восстановление жизнедеятельности наркотизированных рыб, при помещении их в чистую воду, происходит в обратной последовательности. Следует отметить,чтосуществуютвидовыеразличияреакциимолодиосетровыхрыбс разной массой на воздействие нейрофармакологического препарата (Таблица

48) (Галич, 2000b).

183

Таблица 48: Динамика обездвиживания при наркотизации МS-222 с концентрацией 50 мг/л и возвращения двигательной активности молоди осетровых рыб (% от общего числа).

Для экспресс-анализа могут быть также использованы и другие нейрофармакологические препараты: хинальдин (2-метилхинолин), гвоздичное масло, гидрохлорид хинолина и др. (Никоноров и Витвицкая, 1993).

Нейрофармакологическое тестирование молоди по реакции на воздействие нейротропных веществ проводится при различных концентрациях (50 и 75 мг/л) анестетика MS-222 (трикаинметансульфоната). Время экспозиции зависит от концентрации MS-222. При проведении процедуры проводится мониторинг двигательной активности, числа наркотизированных особей и скорости их восстановления в чистой воде (Галич, 2000б; Galich and Chebanov, 2009).

Чувствительность молоди различных видов осетровых рыб к абиотическимстрессорам(высокойтемпературеводы(32oC),солёности(12‰), дефицитукислорода)достаточнотеснокоррелируетсихчувствительностьюк анестетикам(Лукьяненко,КасимовиКокоза,1984).Этопозволяетиспользовать время наркотизации отдельных особей в качестве интегрального показателя жизнеспособности рыб. Вместе с тем, данный метод является прижизненным в отличие от летального метода функциональных нагрузок.

9.9 Флуктуирующая асимметрия как стаТИСТИЧЕСКИЙ показаТЕЛьизменчивоСТИ молоДИ и воздействия экоЛОГИЧЕСКИХ стрессорОВ

Флуктуирующая асимметрия (ФА) (случайные отклонения от идеальной билатеральнойсимметрии)сталапопулярнымметодомоценкинестабильности развития, которая связана с неспособностью организма продуцировать нормальныйфенотипвсвязисгенетическимииэкологическиминарушениями в период онтогенеза (Palmer and Strobeck, 2003; Lemberget and MсCormic, 2009).

184

ОценкастабильностиразвитиямолодиосетровыхрыбпопараметрамФА является одним из элементов программы мониторинга молоди на осетровых заводах. Оценка данного параметра – эффективный нетравматичный способ через проявление внутрииндивидуальной изменчивости выявить возможное снижение гетерозиготности формируемой популяции, а также наличие экологических факторов стресса (Valentine, Soule and Samollow, 1973; Whitlock, 1998; Leung, Forbes and Houle, 2000; Lajus, Graham and Kozhara, 2003). Ввиду стохастической природы данного явления, его анализ возможен только на индивидуальном уровне – уровне групп особей.

ФА часто используется для оценки качества рыб, а также их фитнес- (адаптивных) характеристик (Clarke, 1995), однако корреляция между ФА и фитнес-характеристиками представляется более сложной (Lens et al., 2002).

Для оценки ФА осетровых, как правило, используют следующие билатеральныемеристическиепризнаки:числобоковыхжучексправаислева, число тычинок на первой жаберной дуге, число лучей в грудных плавниках справа и слева и число лучей в брюшных плавниках справа и слева.

Формула для расчета флуктуирующей асимметрии (Md):

Где,d – разности между значениями признака на левой l и правой r сторонах тела у отдельной особи, n – число особей в выборке.

В качестве показателя ФА используется дисперсия ФА (σ2), которая определяется по формуле:

Достоверность различий дисперсий ФА определяется по величине F – критерия Фишера, а средних значений признаков – по величине tst критерия Стьюдента (Плохинский, 1970).

Использование в исследованиях ФА только одного признака не позволяет делать надежные выводы, поэтому предпочтительно использование нескольких признаков. При этом, каждый дополнительный признак добавляет одну степень свободы к оценке уровня нестабильности развития (Palmer and Strobeck, 2003).

Для анализа ФА нескольких признаков, особенно для разноразмерных признаков, необходимо осуществлять нормирование.

Обычно нормирование производится следующим образом (Захаров и Кларк, 1993):

185

Другой метод нормирования был предложен Леунгом, Форбсом и Хоули

(Leung, Forbes and Houle, 2000):

гдеavg|Lij-Rij|означаетусреднениеповсемвыборкам,рассматриваемым в исследовании. В результате применения такой нормировки значения асимметрии оказываются распределены вокруг единицы.

Полученные оценки дисперсии σ2 для каждой партии заводской молоди различных видов следует использовать для сравнения со значениямиσ2 диких особей, в некоторых случаях полученными в предшествующие периоды исследований. Например, подобные оценки σ2 ФА азовских осетровых имеются в работе Дехта (1996), Дехта и Цветненко(1996).

Обычно показатель ФА для заводской молоди различных видов рыб выше, чем для образцов диких рыб (Романов, 2001; Eriksen et al., 2008; Lajus et al., 2009). Среди основных причин, приводящих к повышению уровня ФА заводской молоди, обычно отмечаются высокие плотности посадки, низкое качество воды и генетические изменения, вызванные направленным отбором. Адаптация к условиям осетрового завода, даже когда множество других факторов, таких как качество воды, плотность посадки, гетерозиготность и температура, находятся под контролем, также может приводить к повышению асимметрии (Vøllestad and Hindar, 1997). Естественный отбор против асимметричных особей в природных условиях, и, вследствие этого, снижение уровня ФА в природных популяциях, также считается важным фактором, определяющим значения этого показателя (Казаков и Титов, 1998).

187

Глава 10 Выпуск молоди в естественные водоемы 10.1 Введение

Длительный период нереста, сезонные формы (экотипы) нерестовых мигрантов, продолжительный скат молоди в море являются важными экологическими особенностями осетровых рыб. В естественных речных условиях (до зарегулирования рек) разновозрастная и разноразмерная молодь различныхсезонныхформ(озимых,яровых,летне-нерестящихся)скатывалась в приустьевую часть рек и в море в различные сезоны, что снижало пищевую конкуренцию и оптимизировало использование кормовых ресурсов.

Исследования сезонной динамики кормовых организмов в реке, эстуарии и устьевой области, а также наблюдения за выживаемостью и ростом молоди различных видов осетровых позволили предложить новую стратегию выпуска осетровых. Новый подход включает оптимизацию этого процесса на основе экологических особенностей видов, управлении сезонностью воспроизводства, выпуска разноразмерной и разновозрастной молоди в зависимости от сезона выпуска и водности года (Chebanov, 1996c; Chebanov and Savelyeva, 1999; Chebanov et al., 2002). Поэтому растянутый во времени выпуск разноразмерной и разновозрастной молоди будет способствовать не только повышению выживаемости выпускаемой молоди, но и сохранению биоразнообразия формируемых популяций и рациональному использованию кормовых организмов в реках, их устьях, и в прибрежной зоне моря

(Chebanov, 1998; Chebanov and Billard, 2001).Выпуск рыбоводной продукции производится при положительном заключении об её ихтиопатологическом состоянии (FAO, 2007).

10.2МетОДЫучетавыпускаемойрыбовоДНОЙпроДУКЦИИ

Определение количества молоди, выпускаемой осетровыми заводами, производитсясплошным(весовым,объемным,поштучным)ибонитировочным методами. Конкретный метод учета молоди выбирают в соответствии с особенностями осетрового завода.

10.2.1 Сплошной учет

Вся выпускаемая молодь измеряется объемно, взвешивается или просчитывается поштучно. Учет молоди производится с помощью мерной емкости (не менее 0,5 литра). Каждая десятая по счету объемная мерка просчитывается, определяется средняя арифметическая величина количества молоди в мерке, по среднеарифметической производится подсчет общего количества выпущенной молоди.

10.2.2 Бонитировочный учет

Учет производится перед выпуском молоди. В выростном пруду устанавливаются зоны учета. Пробы отбираются с помощью орудий лова (бим-трал или мальковый невод с размахом «крыльев» 20–25 м), для которых

188

обычно определяют коэффициент уловистости (как правило, коэффициент принимают равным 0,5). Сбор проб производят одновременно или в течение нескольких очень коротких периодов. На основе анализа отобранных проб, с учетом коэффициента уловистости орудий лова, рассчитывают общее количество молоди в водоеме (N):

N nSks

где n – количество молоди в улове, шт.; S – площадь водоема, м2; s – площадь обловленного участка, м2; k - коэффициент уловистости орудия лова (Кушнаренко, 1971).

Обычно коэффициент уловистости малькового трала принимают равным 0,5. Кроме того, существует прямая зависимость между массой молоди и коэффициентом уловистости, который значительно увеличивается при достижении рыбой массы 0,4 г. Для более крупной молоди (весом более 10–12 г), коэффициент уловистости считают равным 0,8 (Кушнаренко, 1971).

При проведении бонитировочного учета в водоемах с молодью белуги укрупненной массы (5–7 г) коэффициент уловистости малькового трала принимают равным 0,25–0,3. При этом он зависит от плотности посадки и возрастает до 0,58 при ее увеличении до 1500 шт./м2 (Крупий, Григорьев и Отпущенникова, 2005).

10.3 Выпуск моЛОДИ из прУДОВ

Сброс воды из прудов осуществляется через специальные рыбоуловители, из которых, по мере накопления, молодь переносят в садки или непосредственно

вживорыбный транспорт. Следует отметить, что выдерживание молоди

всадках (или огороженной аэрируемой части прудов) перед выпуском в естественные водоемы в течение 1–1,5 суток благоприятно влияет на ее адаптивные способности, поскольку скорость плавания молоди, голодавшей

втечение 1–2 суток значительно выше, чем сытой, что может способствовать поиску кормовых площадей и повышению её выживаемости, после выпуска в естественные водоемы.

10.4 ВыбОР оптимальных мест выпуска моЛОДИ

Выпускмолодиосуществляетсявзаранеевыбранныеместа,соответствующие биологическим потребностям выпускаемого вида осетровых (Рисунок 109). Основными критериями при выборе мест выпуска осетровых являются: обеспеченность пищей в соответствии с количеством выпускаемой молоди и ее доступность; состояние дна (плотные, песчаные, слабозаиленные грунты) во избежание скопления молоди на ограниченных участках.

189

Рисунок 109: Выпуск молоди осетровых в прибрежную часть моря.

Выпуск молоди в реки или приустьевые участки моря должен быть рассредоточенпоплощадиивовремени,сучетомразмеровосновныхкормовых организмов, отсутствия большого числа хищников, вредителей молоди и подводной растительности. Перед выпуском молоди необходимо оценить соответствие ключевых гидрохимических показателей (температурный режим, рН, содержание кислорода и токсических веществ) видовым требованиям. В местах выпуска молоди должна отсутствовать термическая и солевая стратификация, снижающая скорость расселения, что может привести клокализацииплощадинагулаиповышениюпрессахищников,отрицательно сказаться нафизиологическомсостояниимолодии,соответственно,науровне её выживаемости (Левин, 1989).

10.4.1 Солеустойчивость молоди различных видов осетровых как критерий оптимизации выпуска

Солеустойчивость молоди осетровых играет важную роль при выпуске в естественные водоёмы. Поэтому анализ солерезистентности различных размерно-возрастных групп рыб позволяет оптимизировать места, сроки выпуска и видоспецифичные схемы адаптации молоди, выращенной на осетровых заводах, к различной солёности.

В естественных условиях скатывающаяся молодь осетровых по мере роста осваивает все более соленые участки моря. Молодь осетровых старшего возраста обладает более сформированными механизмами осмотического и ионного гомеостаза. Важным условием является то, что эмбриональное развитие (например, A. gueldenstaedtii, H.huso и A. stellatus) должно проходить в пресной воде (максимальная допустимая соленость 2–3‰). Наиболее чувствительной к колебаниям солености воды является развивающаяся икра шипа, высокий уровнь смертности эмбрионов (до 30%) наблюдается уже