Работа № 4. Определение щелочности слюны
Слюна животных имеет щелочную реакцию. Щелочность более выражена в слюне околоушных желез по сравнению со слизистыми. Щелочная реакция обусловлена наличием в слюне щелочных солей, главным образом - бикарбонатов натрия и кальция. Особенно высока щелочность паротидной слюны жвачных. Содержащиеся в ней щелочные соли способствуют нормальному, протеканию микробиологических процессов в преджелудках жвачных, нейтрализуя кислоты, образующиеся в процессе брожения. Щелочность слюны увеличивается с возрастом, повышается при кормлении и жвачке.
ХОД ОПЫТА.
Для определения щелочности слюны возьмите в стаканчик 2 мл слюны и добавьте к ней 2 капли индикатора метилоранжа. Протитруйте пробу слюны 0,01 N раствором серной кислоты до красновато- оранжевого цвета. Произведите расчет: 1 мл 0,01 N раствора серной кислоты связывает 1 мл 0,01 N раствора NaHCO3, 1 мл 0,01 N NaHCO3 содержит 0,00084 г NaHCO3, следовательно: кол-во 0,01 N раствора серной кислоты 0,00084 100 / количество слюны = составляет щелочность слюны в (%).
ВОПРОСЫ:
1. Что такое слюна, где она вырабатывается и сколько ее выделяется на различные пищевые и отвергаемые вещества?
2. Механизм безусловной и условной слюноотделительной реакции.
3. Какова разница в составе слюны на положительные и отвергаемые раздражители?
4. Что такое муцин? Его значение и метод обнаруживания в слюне.
5. Какие ферменты содержатся в слюне, и на какие вещества они действуют?
6. Условия, необходимые для действия ферментов слюны.
ЗАНЯТИЕ 11. ФИЗИОЛОГИЯ ЖЕЛУДОЧНОГО ПИЩЕВАРЕНИЯ. НАБЛЮДЕНИЕ ЖЕЛУДОЧНОГО СОКООТДЕЛЕНИЯ ИЗ ИЗОЛИРОВАННОГО ЖЕЛУДОЧКА У СОБАКИ. ОПРЕДЕЛЕНИЕ КИСЛОТНОСТИ ЖЕЛУДОЧНОГО СОКА
ЦЕЛЬ ЗАНЯТИЯ: 1. Ознакомиться с методами изучения желудочного пищеварения.
2. Выяснить характер желудочного сокоотделения у собаки с изолированным желудочком по Павлову.
3. Овладеть методикой определения кислотности желудочного сока.
Работа №1. Наблюдение желудочного сокоотделения из изолированного желудочка у собаки
Для получения чистого желудочного сока без примесей слюны и пищевых веществ, а также для изучения закономерностей сокоотделения на разные корма используют животных с изолированным и малым желудочком. Желудочек по способу И.П.Павлова (1894) выкраивается таким образом, что он сохраняет вегетативные нервные связи и поэтому полностью отражает секреторную функцию большого желудочка, с которым он соединен серозно-мышечной перемычкой. На павловском желудочке можно изучить как сложнорефлекторную, так и нейрохимическую фазы желудочного сокоотделения. На собаках с изолированным желудочком И.П. Павловым получены классические кривые отделения сока на мясо, хлеб, молоко и другие пищевые раздражители.
1. Выяснить: отделяется желудочный сок постоянно или периодически.
2. Определить скрытый период желудочного сокоотделения.
3. Определить количество желудочного сока на пищевой раздражитель за единицу времени (мл в мин).
4.
Сделать заключение о характере реакции
желудочных желез на пищевой раздражитель,
Ход опыта:
Собаку с малым желудочком по Павлову после 15-18 часов голодания ставят в станок. В течение 5 минут наблюдают за секреторной деятельностью малого желудочка. Убеждаются в щелочной реакции отделяемой из желудочка слизи (фильтровальную бумажку прикладывают к отверстию малого желудочка и действуют индикатором диметиламидоазобензолом, который в щелочной среде дает желтое окрашивание, а в кислой – малиновое). Дают собаке в течение 2 минут 200 г хлеба (100 г мяса или 600 г молока), отмечая время от начала кормления до появления первой капли кислого сока (малиновое окрашивание). Далее количество выделяющегося сока измерять каждые 15 минут в течение часа: полученные данные занести в тетрадь, проанализировать и сделать вывод.
Работа № 2. Определение кислотности желудочного сока
Желудочный сок в норме имеет, кислую реакцию, которая обусловлена наличием в нем HCl (0,5-0,6%). Степень кислотности сока определяется соотношением секреции обкладочных клеток, продуцирующих соляную кислоту, и других клеточных элементов, выделяющих нейтральный секрет, иногда с выраженными буферными свойствами. В желудочном соке определяют свободную соляную кислоту, связанную соляную кислоту, общую соляную кислоту и общую кислотность.
Ход опыта.
В пробирку берут 5 мл желудочного сока, добавляют по 2 капли 0,5% спиртового раствора диметиламидоазобензола и 1% раствор фенолфталеина. При этом появляется малиновое окрашивание жидкости. Титруют по каплям 0,1 N раствором едкого натрия до перехода малиновой окраски в слабо-желтый цвет. Это значит, что вся свободная кислота нейтрализовалась. Учитывают количество израсходованной щелочи. Титрование продолжают до появления красной окраски. Учитывают все количество щелочи, которое пошло на титрование до перехода содержимого пробирки в красный цвет, и по ней делают расчет общей кислотности. По разности общей и свободной кислотности находят связанную кислотность.
Показателем кислотности принято считать количество мл 0,1 N раствора едкого натрия, израсходованного на нейтрализацию 100 мл желудочного сока. Зная количество щелочи, пошедшей на титрование, можно определить % свободной, связанной и общей соляной кислоты. Для этого следует учесть, что в 1 мл N раствора соляной кислоты содержится 0,00365 г соляной кислоты. Известно, что I мл 0,1 N раствора едкого натрия, нейтрализует 1 мл 0,1 N раствора соляной кислоты, тогда, умножив 0,00365 г на количество (мл) щелочи пошедшей на нейтрализацию соляной кислоты в 100 мл желудочного сока, узнаем, сколько в нем содержится соляной кислоты, т.е. определим ее процентное содержание.
ВОПРОСЫ:
1.Секреторный аппарат желудка.
2.Нервно-гуморальная регуляция желудочного сокоотделения.
3.Механизм и фазы желудочного сокоотделения.
4.Состав и свойства желудочного сока.
5.Роль соляной кислоты в желудочном пищеварении.
ЗАНЯТИЕ 12. ИССЛЕДОВАНИЕ ФЕРМЕНТАТИВНЫХ СВОЙСТВ ЖЕЛУДОЧНОГО СОКА. ДЕЙСТВИЕ ЖЕЛУДОЧНОГО СОКА НА БЕЛОК. ДЕЙСТВИЕ ХИМОЗИНА НА МОЛОКО
ЦЕЛЬ ЗАНЯТИЯ: 1. Доказать наличие протеолитической активности желудочного сока.
2. Установить зависимость действия ферментов от реакции среды.
3. Наблюдать коагулирующее; действие химозина на молоко.
4. Установить зависимость реакции от величины рН среды.