Работа I. Скорость оседания эритроцитов

Предохранённая от свёртывания кровь, набранная в пробирку, через некоторое время разделяется на два слоя. Эритроциты, в силу большего удельного веса, постепенно оседают, а сверху остаётся прозрачный слой плазмы. Оседание эритроцитов в крови различных животных происходит с различной скоростью, которая колеблется в очень больших пределах и зависит от количества эритроцитов, их электрического заряда, состояния коллоидов плазмы и от ряда других факторов. Эритроциты имеют одноименный электрический заряд, поэтому они отталкиваются друг от друга. Если этот заряд уменьшается, электростатическая сила их взаимного отталкивания исчезает и, соответственно, увеличивается способность оседанию.

Скорость оседания эритроцитов (СОЭ) резко изменяется при некоторых патологических состояниях организма. СОЭ ускоряется при нормально протекающей беременности, при воспалительных процессах, при некоторых инфекционных процессах, замедляется после интенсивной работы.

Разбавление крови:

Пипетку прибора Панченкова промывают раствором лимонно - кислого натрия и наполняют её этим раствором до метки Р (50 делений). Выдувают раствор в небольшую пробирку, или чашку. Затем два раза набирают по полному капилляру (до метки К) кровь из ушной вены животного, выдувают ее в пробирку с лимонно - кислым натрием, тщательно перемешивают. При этом получают разведение крови 1:4.

Разведенную кровь набирают в пипетку до метки К, ставят в штатив (строго вертикально) (рис. 8).

Высоту столбика плазмы над осевшими эритроцитами учитывают через 1 и 24 часа. Данные заносят в тетрадь.

Рис. 8. Прибор Панченкова.

Работа 2. Определение количества гемоглобина

Количество гемоглобина измеряется в граммах на литр крови (г/л). У лошади уровень гемоглобина в среднем - 90...150 г/л, у крупного рогатого скота - 100...130 г/л, у свиней - 100...120 г/л.

Гемоглобин - дыхательный пигмент крови, содержащийся в эритроцитах. По химической структуре белок хромопотеид, который состоит из белковой части глобина и простетической группы – гема, содержащего железо.

1.Определение по методу Сали.

Этот метод основан на образовании солянокислого-гематина из децинормального раствора соляной кислоты и гемоглобина, который имеет коричневую окраску и доводится дистиллированной водой до цвета стандартных растворов. Гемометр ГС-3 состоит из штатива с тремя гнездами (рис. 9).

Рис. 9. Гемометр Сали.

Задняя стенка штатива представляет собой пластинку из матового стекла. В боковые гнезда вставлены одинаковые запаянные пробирки - цветные стандарты. Среднее гнездо с градуированной пробиркой для исследуемой крови. На пробирке нанесена шкала, показывающая количество гемоглобина в грамм % (т. е. сколько грамм гемоглобина содержится в 100 мл. крови). В градуированную пробирку наливают 0.1% раствор HCl до нижней круговой метки (0,2 мл). В капиллярную пипетку набирают 0,02 мл крови. Кровь, приставшую к кончику капилляра, удаляют ваткой.

Опускают капилляр на дно градуированной пробирки и осторожно выдувают из него кровь так, чтобы верхний слой раствора остался прозрачным. Не вынимая капилляра из верхнего слоя раствора, 2-3 раза промывают его.

Вынимают капилляр из пробирки, тщательно перемешивают ее содержимое стеклянной палочкой и ставят в штатив на 5 минут.

Затем к раствору по каплям прибавляют дистиллированную воду и перемешивают стеклянной палочкой до получения одинакового окрашивания со стандартом.

Деление на шкале, до которого поднялась жидкость, позывает количество гемоглобина. Грамм-процент переводят в СИ путем умножения полученного результата на 10, что соответствует содержанию гемоглобина в 1 л крови (г/л).