Работа 2. Определения вязкости крови

ВЯЗКОСТЬ - показатель, характеризующий внутреннее сцепление составных частей крови. Вязкость- это способность оказывать сопротивление течению жидкости при перемещении одних частиц относительно других за счет внутреннего трения. Вязкость имеет большое значение для дви­жения крови по сосудистой системе, т.к. она во много определяет гидродинамические свойства крови. На величину вязкости влияет содержание форменных элементов, гемоглобина и белков плазмы.

Наиболее простым методом определения вязкости крови является наблюдение времени протекания ее через капиллярные трубочки (вискозиметры). Насосать воду в вискозиметр до верхней метки и зажать пальцем выходное отверстие. Определить с помощью секундомера вре­мя вытекания воды (до нижней метки). Проверить трижды. Точно таким же методом определить время вытекания стабилизированной крови из вискозиметра.

Время вытекания крови разделить на время вытекания воды. Полученная величина характеризует вязкость крови. Вязкость крови в 3-6 раз больше вязкости воды. После определения капилляры промыть водой и просушить.

Работа 3. Гемолиз. Осмотическая резистентность

(Устойчивость эритроцитов)

ГЕМОЛИЗ - это выход гемоглобина в плазму (раствор), вызванный повреждением (разрывом или растворением) оболочки эритроцита. Гемолиз может быть вызван воздействием разных повреждающих факторов - механических, термических, химических, осмотических, биологических (гемолизинов).

Осмотический гемолиз происходит при помещении эритроцитов в гипотонический раствор (т.е. раствор с меньшим осмотическим давлением) или в изотонический раствор веществ, способных диффундировать через оболочку эритроцита (мочевина, глюкоза).

Под РЕЗИСТЕНТНОСТЬЮ (устойчивостью) эритроцитов понимают их способность противостоять различным, разрушительным воздействиям. Обычно исследуют резистентность эритроцитов по отношению к гипотоническим растворам хлористого натрия, т.е. их осмотическую устойчивость. В нормальных условиях эритроциты выдерживают концентра­цию хлористого натрия в пределах 0.60…0.40%, не гемолизируясь. У сельскохозяйственных животных наименьшую резистентность имеют эри­троциты овец, коз, свиней, наибольшую - птиц и рыб. В летний период времени резистентноеть эритроцитов животных повышается.

1. Гемолиз под влиянием физических и химических факторов

Берут три пронумерованные пробирки. В первую пробирку наливают 5 мл дистиллированной воды и 5 капель крови. Во вторую- 5 мл 1% раствора хлорида натрия, 1 мл нашатырного спирта и 5 капель крови. В третью - 5 мл 1% раствора хлорида натрия и 5 капель крови. Все пробирки встряхивают и ставят на 5 минут в штатив (рис. 7.).

Рис. 7. Гемолиз и плазмолиз эритроцитов.

1- физический гемолиз; 2- химический гемолиз; 3-плазмолиз эритроцитов.

ПЛАЗМОЛИЗ - сморщивание, сжатие эритроцитов, в гипертонических растворах (в пробирке раствор мутный, появляется взвесь эритроцитов).

Физический гемолиз – разрыв, разрушение оболочки эритроцитов и выход гемоглобина в плазму (раствор) (в пробирке раствор прозрачный, ярко красного цвета).

Химический гемолиз – растворение оболочки эритроцитов и выход гемоглобина в плазму (раствор) (в пробирке раствор прозрачный темно красного цвета).

Записывают результаты, обращая внимание на степень окраски жидкости и на ее прозрачность.

2. Определение осмотической резистентности эритроцитов

Приготавливают растворы хлорида натрия различной концентрации из 1% раствора хлорида натрия по следующей схеме (табл. 13):

Таблица 13

№ пробирки	1% раствор хлорида натрия (исходный раствор), мл	Дистиллированная вода, мл	Концентрация (рабочего раствора) хлорида натрия, %	Окраска раствора после центрифугирования	Осадок эритроцитов	Границы резистентности
1	0.9	0.1	0.9
2	0.8	0.2	0.8
3	0.7	0.3	0.7
4	0.6	0.4	0.6
5	0.5	0.5	0.5
6	0.4	0.6	0.4
7	0.3	0.7	0.3
8	0.2	0.8	0.2

В каждую пробирку пипеткой вносят по 2 капли стабилизированной крови, хорошо смешивают и дают постоять 3…5 минут. Затем все пробирки центрифугируют при 2000 об/мин.

По результатам опыта определяют минимальную, максимальную резистентность и ширину резистентности. Занести в таблицу результаты "+" - полный гемолиз, "" - частичный гемолиз, "-" - отсутствие гемолиза.

Минимальная резистентность эритроцитов соответствует концентрации хлорида натрия (0.7…0.5%), обуславливающей частичный гемолиз эритроцитов, в пробирках жидкость слабо окрашена, на дне пробирок имеется осадок эритроцитов.

Максимальная резистентность эритроцитов соответствует концентрации хлорида натрия (0.4…0.2%), обуславливающей полный гемолиз, в пробирках жидкость прозрачна, окрашивается в ярко красный цвет, осадок эритроцитов отсутствует.

ВОПРОСЫ:

1. Что показывает гематокритный показатель?

2. Что такое вязкость крови, как ее определить?

3. Объясните явления гемолиза и укажите его причины.

4. Что называется осмотической резистентностью эритроцитов?

5. Дайте понятие минимальной и максимальной резистентнооти эритроцитов.

6. Что называется изо-, гипо-, гипертоническими растворами хлорида натрия и каково их действие на эритроциты?

ЗАНЯТИЕ 3. СКОРОСТЬ ОСЕДАНИЯ ЭРИТРОЦИТОВ (СОЭ). ОПРЕДЕЛЕНИЕ КОЛИЧЕСТВА ГЕМОГЛОБИНА В КРОВИ ПО САЛИ И С ПОМОЩЬЮ ЭРИТРОГЕМОМЕТРА

ЦЕЛЬ ЗАНЯТИЯ: Овладеть методикой определения скорости оседания эритроцитов, выяснить механизм реакции оседания эритроцитов и его значение для клиники, овладеть методикой определения количества гемоглобина по Сали и с помощью эритрогемометра, определить его количество, изучить основные свойства и значение гемоглобина.