Хроматографії на папері.
В наш час розроблені різні методи аналізу , які дозволяють визначити якісний і кількісний вміст окремих амінокислот в різних білкових речовинах. Велике значення має метод хроматографічного аналізу, запропонований в 1903 році російським вченим М.С. Цвітом.
Для визначення амінокислот найбільш зручний метод розподільної хроматографії на фільтрувальному папері. Суть цього методу полягає в тому, що на один кінець смужки фільтрувального паперу, наносять краплю досліджуваного розчину. Потім цей кінець паперу занурюють в відповідний органічний розчинник, наприклад в розчин фенолу або бутанолу. Рідина яка усмоктується папером, рухається по направленню до іншого його інця. При цьому окремі амінокислоти розподіляються на папері на різній висоті. Це відбувається врезультаті різного співвідношення між розчинністю амінокислот в воді, які знаходяться на фільтрувальному папері, і розчинністю їх в органічному розчиннику.
Чим більша розчинність амінокислот виявляється у вигляді кольорових плям. За місцем знаходження плями і інтенсивності її забарвлення можна визначити наявність окремих амінокислот, а також їх концентрацію в досліджуваному розчині.
На одному кінці смужки фільтрувального паперу зробити прокол голкою, вдіти нитку і зав’язати її петлею. В пробірку налити піпеткою 0,5 – 1 мл, простим олівцем обвести коло діаметром в 2 – 4 мм. В цент кола за допомогою капіляру нанести маленьку краплю досліджуваного розчину амінокислот і підсушити її на повітрі. Взяти смужку паперу за нитку і опустити її в пробірку до зіткнення з бутанолом. Щільно закрити пробірку пробкою таким чином, щоб папір висів вертикально на нитці, затиснутій пробкою, і занурювався в бутанол на1 – 2 мм.
Поставити пробірку в штатив і помістити її в термостат при 350 - 400 на 45 – 60 хвилин. Коли бутанол підніметься на 8 – 10 см, смужки паперу витягнути і підвісити за нитку в сушильну шафу при 1050 на 5 хвилин. З’являються плями, відповідні різним амінокислотам. Порівнюючи одержану хромотограму зі стандартною, визначають, які амінокислоти містяться в досліджуваному розчині.
Робота 9.Гідроліз сечовини.
Уреаза діє на сечовину, гідролізуючи її до аміаку і вугільної кислоти. Цей фермент синтезується ґрунтовими мікробами і знаходиться в деяких рослинах, наприклад в сої, а також синтезується мікроорганізмами рудця жуйних тварин.
Налити в пробірку 3 мл води, розчинити декілька кристалів сечовини, добавити 3 краплі фенолфталеїну і 0,5 г соєвої муки, в які знаходиться уреаза. поставити пробірку на водяну баню на 20 хвилин. Скоро з’явиться малинове забарвлення. Напишіть реацію і поясніть причину зміни забарвлення розчину.
ЗАНЯТТЯ 5. ХІМІЯ І ОБМІН ВУГЛЕВОДІВ.
Вуглеводи (цукри) за міжнародною номенклатурою називаються “глюциди” або “гліциди” (подібні глюкозі).
Класифікація вуглеводів: (дайте визначення і назвіть представників)
1. По відношенню до гідролізу
а) моносахариди ___________________________________________________________
________________________________________________________________________________
________________________________________________________________________________
________________________________________________________________________________
б) олігосахариди ___________________________________________________________
________________________________________________________________________________
________________________________________________________________________________
________________________________________________________________________________
________________________________________________________________________________
________________________________________________________________________________
в) полісахариди ____________________________________________________________
________________________________________________________________________________
________________________________________________________________________________
________________________________________________________________________________
________________________________________________________________________________
2. Моносахариди за числом вуглецевих атомів розподіляються на:
а) триози __________________________________________________________________
________________________________________________________________________________
б) тетрози _________________________________________________________________
в) пентози ________________________________________________________________
________________________________________________________________________________
г) гексози _________________________________________________________________
________________________________________________________________________________
3. Моносахариди за функціональними групами розрізняються на:
а) альдози _________________________________________________________________
________________________________________________________________________________
б) кетони _________________________________________________________________
________________________________________________________________________________
4. Вуглеводи – оптично активні речовини, так як містять в собі асиметричні атоми вуглецю, через це розрізняють
а) Д-ряд ________________________________________________________________________
________________________________________________________________________________
________________________________________________________________________________
________________________________________________________________________________
б) L -ряд __________________________________________________________________
________________________________________________________________________________
________________________________________________________________________________
5. Крім того, циклічні форми моносахаридів бувають:
а) -форми _______________________________________________________________
________________________________________________________________________________
б)
-форми
_______________________________________________________________
________________________________________________________________________________
________________________________________________________________________________
6. Дисахариди поділяють на:
а) відновлювальні __________________________________________________________
________________________________________________________________________________
________________________________________________________________________________
________________________________________________________________________________
б) не відновлювальні _______________________________________________________
________________________________________________________________________________
________________________________________________________________________________
________________________________________________________________________________
Напишіть формули указаних цукрів: